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山药块茎发育过程中淀粉积累及差异蛋白分析

罗海玲, 龚明霞, 周芸伊, 何龙飞

罗海玲, 龚明霞, 周芸伊, 等. 山药块茎发育过程中淀粉积累及差异蛋白分析[J]. 华南农业大学学报, 2018, 39(6): 61-69. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2018.06.010
引用本文: 罗海玲, 龚明霞, 周芸伊, 等. 山药块茎发育过程中淀粉积累及差异蛋白分析[J]. 华南农业大学学报, 2018, 39(6): 61-69. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2018.06.010
LUO Hailing, GONG Mingxia, ZHOU Yunyi, HE Longfei. Analysis of starch accumulation and differentially expressed proteins during the development of Chinese yam tuber[J]. Journal of South China Agricultural University, 2018, 39(6): 61-69. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2018.06.010
Citation: LUO Hailing, GONG Mingxia, ZHOU Yunyi, HE Longfei. Analysis of starch accumulation and differentially expressed proteins during the development of Chinese yam tuber[J]. Journal of South China Agricultural University, 2018, 39(6): 61-69. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2018.06.010

山药块茎发育过程中淀粉积累及差异蛋白分析

基金项目: 国家现代农业产业技术体系广西薯类创新团队项目(nycytxgxcxtd-11-01)
详细信息
    作者简介:

    罗海玲(1980—),女,助理研究员,博士研究生,E-mail:40833183@qq.com

    通讯作者:

    何龙飞(1967—)男,教授,博士,E-mail: lfhe@gxu.edu.cn

  • 中图分类号: S184;S632

Analysis of starch accumulation and differentially expressed proteins during the development of Chinese yam tuber

  • 摘要:
    目的 

    明确山药Dioscoreaspp.块茎发育过程中淀粉积累规律,为高产优质山药栽培及育种提供理论依据。

    方法 

    以‘GH16’为材料,测定山药块茎发育过程中淀粉积累变化,并通过石蜡切片观测块茎组织、细胞及淀粉粒变化,采用蛋白质双向电泳技术寻找与块茎物质积累相关的关键蛋白。

    结果 

    在块茎形成初期(4—5月)未见淀粉积累;块茎膨大初期(6月)淀粉粒均匀分布于薄壁组织细胞中,随后块茎细胞、淀粉粒随着山药块茎的发育逐渐增大,淀粉迅速积累;至膨大中后期(9月后),淀粉粒大量积累于靠近维管束周围的薄壁组织细胞中;到膨大后期(11月)块茎细胞达到最大值,细胞纵径和横径分别为121.685和89.572 μm,淀粉积累达到高峰,淀粉粒长径最长达27.608 μm (12月),短径最长达16.450 μm (11月);3个发育时期共有179个蛋白表达发生了显著变化。选取其中差异较大的52个蛋白点进行质谱鉴定,其中31个差异表达的蛋白被鉴定,这些差异蛋白主要是与糖代谢和淀粉合成相关的酶,如6–磷酸葡萄糖酸脱氢酶、果糖–1,6–二磷酸醛缩酶、ATP合成酶α亚基、UTP–葡萄糖–1–磷酸尿苷酰转移酶、磷酸甘油酸激酶1等,它们在膨大初期后表达上调。山药块茎特异蛋白Dioscorin在膨大后期大量积累。

    结论 

    山药块茎的膨大是细胞分裂与细胞膨大及淀粉积累共同作用的结果;块茎发育过程中的主要差异蛋白在糖代谢及淀粉合成过程中起关键作用。

    Abstract:
    Objective 

    To understand the rules of starch accumulation during development of Chinese yam (Dioscoreaspp.) tuber, and provide theoretical references for breeding and cultivation of Chinese yam with high yield and quality.

    Method 

    Using ‘GH16’ as material, starch accumulation during development process of Chinese yam tuber was measured. The changes of tuber tissues, cells and starch grains were studied through paraffin sectioning. The key proteins related to tuber development were discovered by two-dimensional electrophoresis.

    Result 

    There was no starch accumulation in early stage of tuber formation (April to May). In the early expansion stage (June), starch grains distributed uniformly in parenchyma cells. With the development of yam tuber, tuber cells and starch grains enlarged gradually, and starch accumulated rapidly. In the mid and late expansion stages (after September), substantial starch grains distributed near parenchyma cells around vascular bundle. In the late expansion stage, tuber cell size reached the maximum in November with cell longitudinal diameter and transverse diameter reaching 121.685 and 89.572 μm respectively, and starch accumulation reached the peak with longitudinal diameter of starch grain being up to 27.608 μm (December), and transverse diameter being up to 16.450 μm (November). There were 179 differentially expressed proteins to be found. Among them, Fifty-two proteins with relatively larger differences in expression were analyzed by mass spectra, and 31 differentially expressed proteins were identified. Most of them were enzymes related to sugar metabolism and starch synthesis, such as glucose 6-phosphate acid dehydrogenase, fructose-bisphosphatealdolase cytoplasmic isozyme-like, ATP synthetase alpha subunit, UTP-glucose-1-phosphate uridylyltransferase and phosphoglycerate kinase 1, and these were up-regulated after the early stage of tuber formation. Chinese yam tuber specific protein, Dioscorin, was accumulated in the late stage of tuber expansion.

    Conclusion 

    The expansion of Chinese yam tuber is the results of cell division, cell amplification and starch accumulation. The main differentially expressed proteins during development of Chinese yam tuber play the key roles of sugar metabolism and starch synthesis.

  • 砖红壤是我国最南端热带雨林或季雨林地区的地带性土壤。广东省雷州半岛是我国砖红壤4个主要分布地区之一,也是我国热带经济作物的重要农业生产基地[1]。丰富的水热资源为农业生产提供了良好的自然条件,但热带地区具有高温多雨的特点,引起水土流失,土壤有机质分解快,养分淋溶流失强烈,因此热带地区的红壤和砖红壤的有机质和速效养分含量都较低。再加上不合理的耕地利用方式,导致土壤质量退化[2],对该地区农业可持续发展产生了严重的影响[3]。近年来有关华南地区红壤、赤红壤的退化及持续利用研究已引起广泛重视[4-5],但关于我国雷州半岛地区玄武岩母质砖红壤养分特征及高效管理的研究仍鲜有报道。为了研究该地区不同种植模式下的砖红壤养分特征,以便更合理地利用砖红壤地区耕地资源,本研究选取了我国玄武岩母质砖红壤典型区域—雷州半岛吴川市11个镇的木薯地、水稻地、水稻与甘薯轮作地、花生与水稻轮作地、甘薯地、花生与大豆轮作地、蔬菜园以及香蕉园共8种耕地土壤作为研究对象,探讨不同种植模式下砖红壤养分特征及其差异,揭示不同种植模式与土壤肥力属性的关系,以期为砖红壤资源的合理利用及典型地区土地的高效管理提供理论依据。

    样品采集区位于广东省雷州半岛吴川市的11个镇(21°32′~21°54′N,110°48′~110°95′E),包括大山江镇、海滨镇、黄坡镇、王村港镇、兰石镇、覃巴镇、塘尾镇、塘缀镇、吴阳镇、樟铺镇、长歧镇。该地区属亚热带性季风气候,日照充足,热量丰富,高温多雨。年均气温、降雨量和日照分别为22.5 ℃、1 597.8 mm和2 008.2 h,日照百分率为45%,日均温≥10 ℃的连续积温为8 991.8 ℃。土壤类型主要是由玄武岩发育而成的砖红壤(黏土)或砖红壤性水稻土。

    研究区主要选取地形、地貌和成土母质基本一致,种植制度连续5年以上不变的香蕉园、木薯地、水稻地(水稻–水稻)、水稻与甘薯轮作地(水稻–甘薯)、花生与水稻轮作地(花生–水稻)、甘薯地、花生与大豆轮作地(花生–大豆)、蔬菜园共8种不同种植模式的地块进行研究。该区域平均海拔5.7 m,地貌类型为平原,地形均为平地。香蕉园植被为一年一熟的香蕉,该地块年均施肥7~8次,施肥量较大,氮、钾肥多于磷肥,并进行较为精细的耕作;木薯地和甘薯地主要作物分别为一年一熟的木薯和甘薯,该地块为无灌溉设施的旱地,每年施入较少化肥及进行少量耕作;水稻–水稻地为水稻连作,水稻–甘薯地为水稻与甘薯轮作,花生–水稻地为花生与水稻轮作,均为一年两熟,其年均分4次施入农肥和化肥,并进行较为精细的耕作;蔬菜地主要为蔬菜连作,一年三熟,主要种植制度为芥菜–菜心–长茄、菜心–菜心–辣椒、芥菜–大白菜–长茄、青瓜–豆角–菜心或菜心–青瓜–辣椒。该地块年均施肥6次,施肥量大,氮、钾肥多于磷肥,并进行较为精细的耕作。为了提高蔬菜的成活率和产量,研究区的菜农大多先利用蔬菜育苗基质土(将泥炭、蛭石和珍珠岩与当地土壤混合)在蔬菜大棚或网室中育苗,待蔬菜种子发芽,苗长势健壮,再将蔬菜苗连同育苗盘里的基质土一并移栽到大田蔬菜地里,经过多年的蔬菜连作,该区蔬菜地耕层中含有了一定量的蛭石和珍珠岩;花生–大豆地为花生与大豆轮作,一年两熟,年均施肥4次,并进行常规耕作。研究区主要使用的化肥为尿素、磷酸二氢铵和氯化钾。

    根据研究区8个种植模式耕地面积的实际大小,分别选取具有代表性的田块并GPS定位,木薯地为10个、甘薯地13个、蔬菜地45个、花生–水稻地57个、花生–大豆地15个、水稻–甘薯12个、水稻–水稻71个、香蕉35个田块。每个田块内随机选取 10 m×10 m的正方形样地,依据“对角线法”选取5点采集 0~20 cm深的耕层土壤,将样品混匀、用四分法分取备用。土样在室温下自然风干,磨碎,分别过2.000和0.149 mm筛,密封保存,用于测定各项土壤肥力指标。

    土壤pH的测定选用pH计电位法(10 g土加入到25 mL去离子水中);土壤有机质的测定采用重铬酸钾容量法;全氮的测定采用凯氏消煮法;碱解氮的测定采用碱解扩散法;速效磷的测定采用Olsen法;缓效钾的测定采用热HNO3浸提–火焰光度法;速效钾的测定采用NH4AOC浸提–火焰光度法[6]

    数据统计采用SAS 9.0和ADE-4[7]等软件进行。

    表1所示,不同种植模式对土壤pH、有机质、全氮、碱解氮、速效磷、缓效钾和速效钾含量的影响达到极显著水平(P<0.001)。其中香蕉地土壤的pH最小,显著小于除水稻–甘薯轮作外的其他耕地。水稻–甘薯轮作地土壤pH显著小于花生–水稻轮作、木薯和蔬菜地;

    表  1  不同种植模式的土壤肥力指标及方差分析1)
    Table  1.  ANOVA results and soil fertility properties under different tillage modes
    种植模式 pH w/(g·kg–1) w/(mg·kg–1)
    有机质 全氮 碱解氮 速效磷 缓效钾 速效钾
    甘薯 5.45±0.21ab 8.9±3.3c 0.498±0.211c 67.9±27.7de 37.6±22.6b 80.2±119.1b 141.0±264.4bcd
    花生–大豆 5.12±0.54ab 14.5±7.6b 0.810±0.402b 69.6±37.8de 8.8±9.4c 96.1±72.2b 256.1±311.8ab
    花生–水稻 5.48±0.69a 14.5±8.5b 0.818±0.469b 116.8±63.8bcd 32.0±27.2bc 325.5±429.9b 129.8±249.5bcd
    木薯 5.50±0.66a 8.0±2.9c 0.455±0.170c 55.5±27.3e 29.4±21.5bc 87.0±43.7b 24.5±11.2d
    蔬菜 5.57±0.67a 14.0±5.7b 0.816±0.330b 162.0±48.6ab 65.9±34.1a 745.6±413.3a 194.6±213.3bc
    水稻–甘薯 4.98±0.86bc 14.7±9.0b 0.814±0.468b 88.0±56.6cde 13.5±16.7c 253.8±271.3b 95.6±62.3bcd
    水稻–水稻 5.24±0.66ab 21.5±9.6a 1.159±0.518a 126.1±91.3bc 19.4±20.5bc 373.3±398.7b 68.3±85.0cd
    香蕉 4.61±0.79c 20.4±8.7a 1.111±0.466ab 194.5±103.5a 67.6±63.8a 672.2±609.8a 376.4±381.3a
    F 7.558 9.561 8.208 10.158 14.608 10.185 7.366
    P <0.001 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001
     1) 同列数据后凡是具有一个相同小写字母者表示不同种植模式间差异不显著(P>0.05,DMRT 法)
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    从土壤有机质含量的方差分析结果看出,香蕉地和水稻–水稻连作地土壤有机质含量显著大于其他耕地土壤,水稻–水稻连作地和香蕉地较木薯地有机质含量分别增加168%和154%。蔬菜、花生–水稻、花生–大豆和水稻–甘薯轮作地有机质含量显著大于木薯和甘薯地;各种植模式耕地的土壤全氮含量比较结果为:水稻–水稻连作地和香蕉地土壤全氮含量最高,其中水稻–水稻连作地显著大于除香蕉地以外的其他耕地,香蕉地显著大于木薯和甘薯地土壤的全氮含量。水稻–水稻连作地和香蕉地较木薯地土壤全氮含量分别增加155%和144%;土壤碱解氮含量的分析结果显示:香蕉、蔬菜地和水稻–水稻连作地土壤碱解氮含量较其他耕地高,香蕉地显著大于除蔬菜地以外的其他耕地,蔬菜地和水稻–水稻连作地显著大于水稻–甘薯、花生–大豆、甘薯和木薯地,其中碱解氮含量最高的香蕉地是含量最低的木薯地的3.50倍,蔬菜地是木薯地的2.92倍,水稻–水稻连作地是木薯地的2.27倍;

    土壤速效磷含量的方差分析结果表明,香蕉和蔬菜地土壤的速效磷含量最高,花生–大豆和水稻–甘薯轮作地的含量最低。香蕉和蔬菜地的速效磷含量显著大于其他耕地,甘薯、花生–水稻、木薯和水稻–水稻地显著大于或大于花生–大豆和水稻–甘薯地,其中速效磷含量最多的香蕉和蔬菜地分别是含量最少的花生–大豆地的7.65和7.46倍;

    土壤缓效钾含量的方差分析结果表明,蔬菜和香蕉地缓效钾含量最高,显著大于其他种植模式的耕地,其中蔬菜和香蕉地的缓效钾含量是含量最少的甘薯地的9.30倍和8.39倍;土壤速效钾的分析结果表明,香蕉地的速效钾含量最高,显著大于除花生–大豆地以外的其他耕地土壤,是含量最低木薯地的15.36倍。花生–大豆和蔬菜地的速效钾含量较高,显著大于水稻–水稻和木薯地,分别是木薯地的10.45和7.94倍。

    主成分分析可以实现对各指标及主成分得分的综合变异分析[8]。本研究对8个不同种植模式的土壤肥力质量综合特征进行了主成分分析,结果如图1所示:

    图  1  不同种植模式下砖红壤肥力特征差异的主成分分析
    a:PC1和PC2主成分载荷,b:土壤肥力综合特征在PC1和PC2主成分上的得分;①:木薯,②:水稻–水稻,③:水稻–甘薯,④:花生–水稻,⑤:甘薯,⑥:花生–大豆,⑦:香蕉,⑧:蔬菜
    Figure  1.  Principal component analyses of fertility properties of latosols under different tillage modes

    第1和第2主成分累计方差贡献率达到62.92%,8个种植模式下7个土壤肥力变量的全部信息均可以由图1体现出来。主成分空间载荷图(图1a)中箭头代表各土壤肥力指标的矢量,矢量在2个主成分轴(XY)上的垂直投影长短代表该变量与主成分的关系,投影越长,该变量在主成分上的贡献率越大;主成分得分空间分布图(图1b)中①~⑧这8个种植模式的土壤综合得分位置,与该样点在载荷图上土壤肥力矢量的位置相对应。由图1可以看出,第1主成分方差贡献率为 43.64%,其主要与土壤pH及有机质、全氮、碱解氮、缓效钾含量等变量密切相关(图1a),水稻–水稻(②)、香蕉(⑦)和蔬菜(⑧)地与其他5个种植模式土壤肥力质量综合差异主要由这些因素决定。水稻–水稻、香蕉和蔬菜地的土壤样点明显向较高有机质、全氮、碱解氮和缓效钾以及较低pH的方向偏移(图1b),而其他5个种植模式的土壤样点则向相反的方向偏移,其中⑦在第1主成分上能够与木薯(①)、水稻–甘薯(③)、花生–水稻(④)、甘薯(⑤)、花生–大豆(⑥)种植模式的土壤样点明显区分,②和⑧与④和⑤明显区分(P<0.000 1)。

    第2主成分方差贡献率为19.28%(Y轴),其与土壤有机质、全氮、速效磷、缓效钾和pH等变量紧密联系(图1a),⑧的土壤肥力特征能与②、③和⑥的土壤明显区分,前者的土壤样点明显向pH、速效磷和缓效钾含量较高以及全氮和有机质含量较低的方向偏移(P<0.000 1,图1b),而后三者则向相反的方向偏移。

    综上所述,在第1和第2主成分上,香蕉地与蔬菜地,以及它们与其他种植模式耕地之间的土壤肥力质量特征区分明显(P<0.000 1,图1b);在本文研究中,相比其他土壤肥力指标,速效钾的矢量在主成分上的垂直投影最短,因此其引起8个种植模式耕地之间综合肥力差异的贡献率最小,即8个种植模式耕地对速效钾的总体影响较小。

    主成分载荷图(图1a)中的矢量箭头代表各土壤变量,2个箭头间余弦角度显示了7个变量的相互关系,角度越小,相关性越高。由图1a可以看出,土壤缓效钾、速效磷、碱解氮含量之间具有一定程度的正相关性,土壤有机质、全氮、碱解氮含量之间也有一定程度的正相关性,而土壤pH与有机质、全氮、速效钾含量有一定的负相关关系,因此本文对土壤肥力各变量进行了进一步的相关性分析,结果如表2所示。土壤pH与有机质、速效钾含量之间有显著的负相关关系。而有机质含量与全氮、碱解氮含量呈显著正相关关系,且碱解氮含量与全氮含量之间也呈显著正相关关系。速效磷含量与碱解氮含量之间有显著的正相关关系。缓效钾含量与有机质、全氮、碱解氮、速效磷含量之间呈显著正相关关系。

    表  2  土壤各变量间相关分析1)
    Table  2.  Correlation analysis among soil variables
    变量 pH 有机质 全氮 碱解氮 速效磷 缓效钾 速效钾
    pH 1
    有机质 –0.622* 1
    全氮 –0.598 0.998** 1
    碱解氮 –0.415 0.715* 0.741* 1
    速效磷 –0.067 0.115 0.145 0.759* 1
    缓效钾 –0.246 0.621* 0.626* 0.959** 0.786** 1
    速效钾 –0.642* 0.423 0.440 0.618 0.525 0.509 1
     1)“*” 和 “* *” 分别表示在0.05和0.01水平显著相关(Pearson 相关分析法)
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    土壤的物理、化学质量与土壤质地、气候、水文和相关农田管理措施密切相关[4]。因为本文研究区域的土壤均为雷州半岛玄武岩母质砖红壤,且研究中的采样时间一致,海拔、坡度、地下水位、温度、降水量等因素差异不大,因此耕地不同种植模式所引起的施肥时间和方法、种植种类和结构、灌溉和耕作制度的差异是造成土壤肥力特征不同的主要原因。本研究结果显示,香蕉地的土壤pH显著低于其他种植模式耕地,这是因为香蕉树体较大,根茎叶生物量明显大于其他作物,当地香蕉园整地时将上年残留的香蕉根茎叶搅碎,并归还到土壤后,大量的根茎叶在土壤中腐烂产生较多的有机酸可能是造成其pH较低的一个重要原因[9];同时香蕉整个生育期需氮钾养分较多,根据当地蕉园施肥习惯,每年每株香蕉施入不少于300 g氮(N)的尿素和600 g钾(K2O)的氯化钾,多年来化肥的大量施用也可能直接影响土壤的交换性氢和铝的含量,造成其酸度较大[10-11]。对土壤有机质和速效钾含量的方差分析结果也表明,其在香蕉地土壤中的含量显著高于其他种植模式耕地,引起此结果的原因同样是大量香蕉根茎叶的还田和化肥的施用。这也是8个种植模式的土壤pH与有机质、速效钾含量呈显著负相关关系的主要原因。

    为了增加农作物的产量和品质,提高经济效益,所研究区域长期大量施用尿素、磷酸二铵、氯化钾等化肥,这是耕地具有较高的速效氮磷钾养分含量的主要原因[12]。蔬菜和香蕉在生长过程中需肥量很大,香蕉整个生育期长,所研究区域的香蕉地施肥次数多,施肥量大。蔬菜虽然生长期较短,但需肥量较大,且所研究区域一年种植三茬蔬菜,因此施肥量同样较大。这是研究区域蔬菜和香蕉地土壤中氮磷钾速效养分含量显著大于其他耕地的主要原因[13-14];相关分析结果显示,所研究区域的土壤速效钾与pH呈显著负相关,而土壤速效磷和碱解氮则呈显著正相关,这主要是因为长期施用氯化钾肥料导致土壤pH降低[10],施用磷酸二胺肥料引起土壤速效磷和碱解氮含量同时增加[15]。化肥的大量施用可以有效提高土壤中速效养分的含量,但是作为土壤肥力的重要标志,即有机质含量不能通过施用化肥来提高[16]。主成分分析结果显示蔬菜地的主要肥力障碍因子是有机质不足,相比香蕉和水稻–水稻等耕地,其有机质含量较低,这主要是因为研究区域蔬菜地1年收获3次,大量土壤养分被带走,加速有机质分解消耗,且绝大部分蔬菜没有还田,又考虑到成本,当地农户很少施用有机肥,这就导致了蔬菜地长期有机质消耗大于补充。由于碳素和氮素是植物和微生物生长及酶活性的限制因素[17],已有大量研究表明施用有机肥能够补充植物所需的营养元素,也能显著改善土壤微生物种群结构和酶活性[18],土壤酶和微生物作为土壤物质循环和能量转化的关键参与者,将最终活化土壤养分并提高肥料利用率[19]。因此需要施用有机肥或生物有机肥来进一步提高研究区蔬菜地土壤肥力。

    缓效钾是速效钾的储备库,是土壤长期供钾潜力的指标,它一般被固定在黑云母、伊利石、含水云母分解的中间体以及黏土矿物晶格中,在速效钾耗竭情况下,是作物吸收钾的主要来源[20]。相关分析结果表明,缓效钾与有机质、全氮、碱解氮、速效磷之间成显著正相关关系。这可能是由于有机质和土壤矿物黏粒形成稳定的团粒结构,钾的固定量增加[21]。铵根离子进入土壤黏粒层间,并将钙离子和镁离子置换出来,将非交换性钾离子闭蓄在晶层间的空穴中,降低缓效钾的释放[22]。所研究区域的施肥特点是氮磷钾肥料一起配合施用,同时补充土壤中速效氮、磷、钾养分,由于8种作物多数吸收氮和钾多,磷少,因此收获时从土壤中携出的养分以钾和氮最多,磷最少,每次施肥后速效磷将同缓效钾一样在土壤中累积;本研究还表明,香蕉和蔬菜地土壤中的缓效钾含量显著大于其他耕地的缓效钾含量,主要因为香蕉地的有机质含量最高,大量的有机质和土壤矿物黏粒形成稳定的团粒结构,更有利于土壤对交换性钾离子的固定。蔬菜地缓效钾含量较高是因为其相比于其他耕地,土壤中含有一定量的蛭石和珍珠岩,蛭石等矿物质对交换性钾有较强的固定能力[23]。并且香蕉和蔬菜需钾量较大,施用速效钾肥较多,土壤中的可溶性和交换性钾含量较高,则进入黏土矿物层间被固定的钾离子就较高,因此形成的非交换性缓效钾就较多[24]

    研究区8种耕地连续种植5年以上作物后,对土壤肥力指标的影响均达到显著水平。这说明不同种植模式通过改变土壤养分投入和管理,影响营养元素的循环强度、总量及路径,从而使土壤肥力发生变化[25]。但是基于方差分析的多重比较是针对单个肥力指标的变异情况,并不能全面地反映种植模式对土壤肥力综合影响的规律和趋势[5]。相关分析表明,土壤肥力的各个属性之间并不是孤立的,它们具有一定的相关性。在评价众多的土壤肥力属性时,变量彼此间紧密的相互关系一定程度上影响了对土壤综合肥力起决定作用的主要因子的查找[4]。Velasquez等[26]和Jouquet等[27]研究结果已证实主成分分析方法有助于评价不同土地利用方式下土壤多变量的综合质量特征。本研究在方差分析的基础上利用ADE-4软件进行主成分分析,该方法不仅能有效区别不同种植模式的土壤肥力属性差异,并能显示出各变量的相互关系,而且也能直观地识别影响耕地土壤肥力质量的主要因子,这将为土壤的进一步改良和高效管理提供参考。主成分分析结果显示,相比其他耕地,有机质和氮素(全氮和碱解氮)养分缺乏是木薯和甘薯地(旱地)土壤肥力质量较差的主要原因,这与红壤旱地有机质含量逐年呈显著下降趋势的结果一致[28]。因此认为施用有机肥、有机无机复合肥或生物有机肥来提高土壤肥力,是增加产量的有效措施[29];速效磷含量不足是水稻–甘薯、花生–大豆耕地土壤肥力较低的主要原因,建议增加速效磷肥(过磷酸钙)或有机肥的施用量来提高耕地中速效磷的含量,增加土壤综合肥力;在8种耕作模式中,香蕉地的土壤综合肥力最高,但其pH较其他耕地土壤低,土壤酸化加剧会导致土壤养分离子的淋失,使土壤日趋贫瘠化,同时释放出有害铝离子和重金属等污染物,可达到对植物生长有害水平[30]。因此在种植香蕉前,应向每公顷耕地中施入1 200~1 800 kg的石灰,以调节土壤酸度,提高产量[31]。8种耕作模式中,水稻–水稻连作地和蔬菜地的综合肥力仅次于香蕉地,水稻–水稻连作地较香蕉和蔬菜地,速效磷含量不足,因此建议增施磷肥(过磷酸钙)以补充土壤中的速效磷。蔬菜地较香蕉地和水稻–水稻连作地有机质含量有所不足,因此建议增施有机肥;所有肥力指标中,速效钾引起8种耕作模式土壤综合肥力差异的贡献率最小,且8种耕地模式土壤速效钾的标准差较大,说明其变异程度较其他肥力指标高。这可能与土壤矿物黏粒对钾的固定以及作物对矿物钾的活化作用有关。一方面,当为作物施速效钾肥料后,土壤水溶性和交换性钾离子浓度增加,土壤矿物黏粒对钾的固定作用随之增大[24]。另一方面,作物对钾的吸收会导致土壤溶液中钾离子浓度的下降,原本土壤中各种形态钾之间的平衡被打破,促进矿物钾向交换性或水溶性钾的转化。同时作物根系分泌物的有机酸也可促进矿物钾的释放[32]

    本研究结果显示,研究区不同耕作模式对土壤pH、有机质、全氮、碱解氮、速效磷、缓效钾和速效钾含量的影响显著。其中香蕉地和水稻–甘薯轮作地土壤pH最低;香蕉地和水稻–水稻连作地土壤有机质和全氮含量最高,而在木薯和甘薯地中其含量最低;香蕉、蔬菜地和水稻–水稻连作地土壤碱解氮含量较其他耕地多;香蕉和蔬菜地土壤的速效磷含量最高,而花生–大豆和水稻–甘薯轮作地其含量最低;土壤缓效钾在蔬菜和香蕉地中含量最高;速效钾含量也在香蕉地中最高,而木薯地中含量最低。

    研究区8种种植模式的土壤综合肥力差异明显,这种差异与各种种植模式下的土壤田间管理方式密切相关。香蕉、蔬菜地和水稻–水稻连作地综合肥力较好,其中香蕉地最高,蔬菜地和水稻–水稻连作地次之,土壤pH较低是香蕉地土壤肥力进一步提高的障碍因子,有机质含量较低是蔬菜地肥力的限制因素,速效磷含量较低则是水稻–水稻连作地肥力的限制因素;水稻–甘薯、花生–水稻和花生–大豆轮作地土壤综合肥力中等;而木薯和甘薯地综合肥力相对较差,有机质和氮素养分缺乏是其土壤综合肥力最低的主要原因,因此该区域增施有机肥、有机无机肥料的配合施用以及对土壤酸度的适当调节是进一步提高耕地土壤综合肥力的关键。

  • 图  1   山药块茎发育过程中的形态变化

    各图中数值上凡是具有一个相同小写字母者,表示不同月份间差异不显著(P>0.05,LSD法)

    Figure  1.   Morphological changes during development of Chinese yam tuber

    图  2   山药块茎发育过程中的营养组分含量变化

    各图中数值上凡是具有一个相同小写字母者,表示不同月份间差异不显著(P>0.05,LSD法)

    Figure  2.   Changes of nutrient constituents during development of Chinese yam tuber

    图  3   山药块茎发育的细胞学观察

    A、B和C分别为4、6和12月块茎皮层及其附近组织横切面结构,D、E、F、G、H和I分别为4、5、6、9、11和12月块茎薄壁组织横切面结构;Ep:表皮,Co:皮层,Vc:维管束,Xy:木质部,Pc:薄壁细胞,S:淀粉粒;标尺=100 μm

    Figure  3.   The cytology observation during development of Chinese yam tuber

    图  4   山药块茎发育过程中薄壁细胞与淀粉粒大小变化

    各图中数值上凡是具有一个相同小写字母者,表示不同月份间差异不显著(P>0.05,LSD法)

    Figure  4.   Changes of parenchyma cell and starch grain sizes during development of Chinese yam tuber

    图  5   山药块茎发育过程中的蛋白质双向电泳图

    红色数字为已鉴定的差异蛋白的序号

    Figure  5.   Two-dimensional electrophoresis of proteins during development of Chinese yam tuber

    表  1   等电聚焦参数

    Table  1   Isoelectric focusing (IEF) parameters

    步骤 电压/V 升压模式 时间/h
    S1 50 线性 12
    S2 500 线性 1
    S3 1 000 线性 1
    S4 1 000~10 000 快速 1
    S5 10 000 快速 11
    S6 500 快速 任意时长
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    表  2   部分差异蛋白质信息列表

    Table  2   Information of partial differentially expressed proteins

    蛋白
    序号
    Mascot数据库
    登陆号
    蛋白名称 得分 Mr 等电点 不同月份相对表达量比值1)
    5/6 5/11 6/11
    126 tr|W7NY18 几丁质酶 75 26 204 4.89 2.73 50.22 18.41
    211 sp|P80052 酸性内切壳多糖酶 106 28 859 4.80 0.28 0.49
    6207 gi|33312115 核酮糖–1,5–二磷酸羧化酶/加氧酶大亚基 151 32 695 5.90 2.15 9.04 4.20
    8427 gi|731391631 阳离子过氧化物酶 61 33 147 4.43 3.38 6.24
    8119 gi|586751268 肽基脯氨酸顺反异构酶 80 26 347 9.26 1.55 3.44 2.20
    1411 gi|46917481 块茎储藏蛋白 318 35 982 5.69 0.16 7.93
    7522 gi|719974028 果糖–1,6–二磷酸醛缩酶 193 40 958 6.04 0.26 0.06 0.23
    7618 gi|603221 6–磷酸葡萄糖酸脱氢酶 110 67 906 8.40 0.43 10.11 23.61
    8707 gi|20160920 ATP合成酶α亚基 66 61 537 8.49 196.00
    9111 gi|1079652 胚胎发育晚期丰富蛋白 145 17 567 9.49 0.12 13.29
    5724 gi|449456208 UTP–葡萄糖–1–磷酸尿苷酰转移酶 96 52 062 8.08 0.39 0.41
    3005 gi|672122878 40S核糖体蛋白质 106 18 124 5.82 0.10 19.18
    3522 gi|102139814 磷酸甘油酸激酶 198 42 269 9.58 0.30 2.80
    4209 gi|12229919 蛋白酶α亚基 63 27 506 5.75 0.18 2.63
    4526 gi|732559013 磷酸甘油酸激酶1 89 53 026 5.65 0.12 5.24
    5311 tr|C7E3T8 Dioscorin蛋白 283 31 815 6.10 0.10 0.11
     1)“–”表示该蛋白在2个时期的表达量差异不显著(P>0.05,t检验)
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  • [1] 裴鉴. 中国植物志: 第16卷: 第1分册[M]. 北京: 科学出版社, 1985.
    [2]

    SHEWRY P R. Tuber storage proteins[J]. Ann Bot, 2003, 91(7): 755-769. doi: 10.1093/aob/mcg084

    [3] 刘梦芸, 门福义. 马铃薯块茎生长发育的研究[J]. 内蒙古农业大学学报(自然科学版), 1987, 8(2): 104-116.
    [4] 王翠松, 张红梅, 李云峰, 等. 马铃薯块茎发育过程中的影响因子[J]. 中国马铃薯, 2003, 17(1): 29-33. doi: 10.3969/j.issn.1672-3635.2003.01.013
    [5]

    FERNIE A R, ROESSNER U, TRETHEWEY R N, et al. The contribution of plastidial phosphoglucomutase to the control of starch synthesis within the potato tuber[J]. Planta, 2001, 213(3): 418-426. doi: 10.1007/s004250100521

    [6] 柳俊, 谢从华. 马铃薯块茎发育机理及其基因表达[J]. 植物学通报, 2001, 18(5): 531-539. doi: 10.3969/j.issn.1674-3466.2001.05.003
    [7]

    AGRAWAL L, CHAKRABORTY S, JAISWAL D K, et al. Comparative proteomics of tuber induction, development and maturation reveal the complexity of tuberization process in potato (Solanum tuberosum L.)[J]. J Proteome Res, 2008, 7(9): 3803-3817. doi: 10.1021/pr8000755

    [8] 张小静, 马铃薯块茎蛋白质双向电泳技术体系的建立及发育相关蛋白质的分析[D]. 兰州: 甘肃农业大学, 2008.
    [9] 刘海霞. 马铃薯块茎离体发育过程的差异蛋白质组[D]. 兰州: 甘肃农业大学, 2013.
    [10] 孙霞. 毕克齐长山药生育和贮藏期间营养成分及相关酶活性的研究[D]. 呼和浩特: 内蒙古农业大学, 2008.
    [11] 龚明霞. 赤霉素调控山药块茎生长的生理和分子机制[D]. 南宁: 广西大学, 2017.
    [12] 孙启善. 山药优质高产栽培实用技术[M]. 北京: 中国农业出版社, 2001
    [13] 梁任繁, 李创珍, 张娟, 等. 山药块茎发育中物质积累及相关代谢酶变化[J]. 作物学报, 2011, 37(5): 903-910.
    [14]

    HOU W C, LIU J S, CHEN H J, et al. Dioscorin, the major tuber storage protein of yam (Dioscorea batatas Decne) with carbonic anhydrase and trypsin inhibitor activities[J]. J Agric Food Chem, 1999, 47(5): 2168-2172. doi: 10.1021/jf980738o

    [15]

    FARHAT I A, OGUNTONA T, NEALE R J, et al. Characterization of starches from West African yams[J]. J Sci Food Agr, 1999, 79(15): 2105-2112. doi: 10.1002/(ISSN)1097-0010

    [16]

    AMANI N G, BULEON A, KAMENAN A, et al. Variability in starch physicochemical and functional properties of yam (Dioscorea sp.) cultivated in Ivory Coast[J]. J Sci Food Agr, 2004, 84(15): 2085-2096. doi: 10.1002/jsfa.1834

    [17]

    OKUNLOLA A, ODEKU O A. Evaluation of starches obtained from four Dioscorea species as binding agent in chloroquine phosphate tablet formulations[J]. Saudi Pharm J, 2011, 19(2): 95-105. doi: 10.1016/j.jsps.2011.01.002

    [18] 中国科学院上海植物生理研究所, 上海市植物生理学会. 现代植物生理学实验指南[M]. 北京: 科学出版社, 1999.
    [19] 李合生. 植物生理生化实验原理和技术[M]. 北京: 高等教育出版社, 2000.
    [20] 王晶英, 敖红, 张杰, 等. 植物生理生化实验技术与原理[M]. 哈尔滨: 东北林业大学出版社, 2003.
    [21] 陆国权, 李秀玲, 丁守仁, 等. 盐酸水解DNS比色法快速测定甘薯淀粉含量的标准方法研究[J]. 中国粮油学报, 2002, 17(1): 25-28. doi: 10.3321/j.issn:1003-0174.2002.01.007
    [22]

    CARPENTIER S C, WITTERS E, LAUKENS K, et al. Preparation of protein extracts from recalcitrant plant tissues: An evaluation of different methods for two-dimensional gel electrophoresis analysis[J]. Proteomics, 2005, 5(10): 2497-2507. doi: 10.1002/(ISSN)1615-9861

    [23]

    YANG L T, LIN H, TAKAHASHI Y, et al. Proteomic analysis of grapevine stem in response to Xylella fastidiosa inoculation[J]. Physiol Mol Plant Pathol, 2011, 75(3): 90-99. doi: 10.1016/j.pmpp.2010.11.002

    [24] 李奇松, 陈军, 林世圣, 等. 水稻籽粒蛋白双向电泳条件的优化及其蛋白组学方法的比较[J]. 作物学报, 2012, 38(5): 921-927.
    [25]

    VREUGDENHIL D, SERGEEVA L I. Gibberellins and tuberization in potato[J]. Potato Res, 1999, 42(3/4): 471-481.

    [26]

    MÜLLER-RÖBER B, SONNEWALD U, WILLMITZER L. Inhibition of the ADP-glucose pyrophosphorylase in transgenic potatoes leads to sugar-storing tubers and influences tuber formation and expression of tuber storage protein genes[J]. Embo J, 1992, 11(4): 1229-1238.

    [27] 刘薇, 吴晶晶, 陈宏文. 米曲霉6–磷酸葡萄糖脱氢酶基因gsdA的克隆及生物信息学分析[J]. 亚热带植物科学, 2012, 41(3): 11-15.
    [28]

    HUANG J, ZHANG H, WANG J, et al. Molecular cloning and characterization of rice 6-phosphogluconate dehydrogenase gene that is up-regulated by salt stress[J]. Mol Biol Rep, 2003, 30(4): 223-227. doi: 10.1023/A:1026392422995

    [29] 汤晓丽, 拟南芥两个胞质果糖–1, 6–二磷酸醛缩酶基因的新功能初探[D]. 泰安: 山东农业大学, 2013.
    [30]

    HAAKE V, ZRENNER R, SONNEWALD U, et al. A moderate decrease of plastid aldolase activity inhibits photosynthesis, alters the levels of sugars and starch, and inhibits growth of potato plants[J]. Plant J, 1998, 14(2): 147-157. doi: 10.1046/j.1365-313X.1998.00089.x

    [31] 王海云. 牡丹试管苗生根诱导过程中蛋白质表达变化的研究[D]. 郑州: 河南农业大学, 2010.
    [32] 娄沂春, 董海涛, 李德葆, 等. 水稻叶绿体ATP合成酶基因转录丰度受赤霉素诱导调节[J]. 中国水稻科学, 2001, 15(1): 17-20. doi: 10.3321/j.issn:1001-7216.2001.01.004
    [33] 张欣欣, 柳参奎. 水稻线粒体ATP合成酶小亚基基因的鉴定及解析[J]. 分子植物育种, 2003, 1(5): 605-612. doi: 10.3969/j.issn.1672-416X.2003.05.003
    [34]

    YANG C C, LIN K C. Class A dioscorins of various yam species suppress ovalbumin-induced allergic reactions[J]. Immunopharmacol Immunotoxicol, 2014, 36(3): 242-249. doi: 10.3109/08923973.2014.921691

  • 期刊类型引用(19)

    1. 钱卫星,郑东. 动态环境监测系统的设计. 集成电路应用. 2024(03): 186-187 . 百度学术
    2. 陈雄,罗海波. 碳汇渔业贝类养殖监测管理系统的设计与开发. 闽江学院学报. 2024(05): 51-58 . 百度学术
    3. 罗潜,吉艺宽,李美娣. 基于STM32和ZigBee的水产养殖水质监测系统设计. 仪器仪表用户. 2023(08): 22-26 . 百度学术
    4. 杨智玲,程玮. 基于无人机遥感技术的渔业养殖池塘水质监测方法. 太原师范学院学报(自然科学版). 2023(02): 35-40 . 百度学术
    5. 余钱程,管延敏,黄温赟,韦龙,虞嘉晨. 基于STM32与树莓派的养殖水质监测无人艇系统研究. 渔业现代化. 2023(05): 33-42 . 百度学术
    6. 林盾,怀晓伟,宁睿. 面向电网基建现场的LoRa通信低功耗组网控制技术的优化设计. 自动化应用. 2023(22): 73-75 . 百度学术
    7. 杨智玲. 无人机技术在水产养殖作业通信系统中的应用. 长江信息通信. 2022(04): 1-3 . 百度学术
    8. 孔兵,余梅,乔欣. 基于LoRa无线通信的水产养殖水质监测系统设计. 滨州学院学报. 2022(02): 74-80 . 百度学术
    9. 任晓亮,施羽露,廖河庭,杨晓曦,钱信宇,郑尧,陈家长. 水产环境污染现状及治理策略. 农学学报. 2022(05): 42-46 . 百度学术
    10. 闫尉深,刘威,刘家俊,李志达. 基于无线技术的隧道积水监测系统设计. 电子设计工程. 2022(14): 137-141 . 百度学术
    11. 李阳东,漆林,笪亨融,谢洋洋. 基于物联网的近海岸水质监测平台方案设计. 海岸工程. 2022(03): 268-276 . 百度学术
    12. 康晋. 基于LoRa无线通信的工业机器人远程监控系统设计. 计算机测量与控制. 2022(09): 119-124+132 . 百度学术
    13. 肖军. 基于无线通信技术的医院信息管理系统设计. 自动化技术与应用. 2022(11): 107-111 . 百度学术
    14. 巫鹏航,王锦鹏,朱敬宾,郭来功. 基于STM32与LabVIEW的地下水压水温监测系统设计. 长春师范大学学报. 2021(04): 43-47 . 百度学术
    15. 覃伟锋,郝文杰,莫胜胜,龙应萍,蔡世媚,范嘉晨. 基于云服务的水产养殖水质监测系统. 电子制作. 2021(10): 30-32 . 百度学术
    16. 胡颖,徐轶群. 基于窄带物联网通信的海洋水质监测系统设计. 广州航海学院学报. 2021(02): 14-19 . 百度学术
    17. 谭明,曾海涛,王田. 基于无线通信的换流阀冷却塔温度监测系统设计. 电工技术. 2021(12): 8-9+12 . 百度学术
    18. 颜瑞,王震,李言浩,李哲敏,李娴. 中国农业智能传感器的应用、问题与发展. 农业大数据学报. 2021(02): 3-15 . 百度学术
    19. 尹航,廖梓渊,徐龙琴,刘双印,曹亮,郭建军. 基于ECharts的对虾产业数据可视化分析平台设计及实现. 现代农业装备. 2021(04): 7-14 . 百度学术

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出版历程
  • 收稿日期:  2018-01-11
  • 网络出版日期:  2023-05-18
  • 刊出日期:  2018-11-09

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