潘文,王波,薛红,赵明秋,琚春梅,陈金顶. 牛布鲁菌与牛分枝杆菌双重PCR方法的建立及应用[J]. 华南农业大学学报, 2010, 31(4). DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2010.04.022
    引用本文: 潘文,王波,薛红,赵明秋,琚春梅,陈金顶. 牛布鲁菌与牛分枝杆菌双重PCR方法的建立及应用[J]. 华南农业大学学报, 2010, 31(4). DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2010.04.022
    Establishment and Application of a Multiplex PCR Assay for the Detection of Brucella abortus and/or Mycobacterium bovis[J]. Journal of South China Agricultural University, 2010, 31(4). DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2010.04.022
    Citation: Establishment and Application of a Multiplex PCR Assay for the Detection of Brucella abortus and/or Mycobacterium bovis[J]. Journal of South China Agricultural University, 2010, 31(4). DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2010.04.022

    牛布鲁菌与牛分枝杆菌双重PCR方法的建立及应用

    Establishment and Application of a Multiplex PCR Assay for the Detection of Brucella abortus and/or Mycobacterium bovis

    • 摘要: 根据GenBank中已发表的流产布鲁菌种特异的omp25基因序列及牛分枝杆菌特异保守的16S rRNA加工蛋白rimM基因序列设计了2对特异性引物,通过对PCR条件的优化,建立了快速鉴别检测牛布鲁菌Brucella abortus和牛分枝杆菌Mycobacterium bovis的双重PCR方法.对建立的方法进行特异性和敏感性试验,结果显示,在牛布鲁菌和牛分枝杆菌中分别扩增出448、269 bp的特异性目的条带,作为对照的大肠杆菌Escherichia coli、沙门菌Salmonella typhimurium、八叠球菌Sarcina lutea、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、巴氏杆菌Pasteurella multocida、军团菌Legionella pneumophila、枯草杆菌Bacillus subtilis及溶血性链球菌Streptococcus pneumonia均未扩增出任何条带.牛布鲁菌和牛分枝杆菌的DNA 最低检出量均为10 pg;牛奶样品中人工污染的牛布鲁菌和牛分枝杆菌的检测敏感性分别为7.9×103 CFU/mL、3 ng/mL.

       

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