• 《中国科学引文数据库(CSCD)》来源期刊
  • 中国科技期刊引证报告(核心版)期刊
  • 《中文核心期刊要目总览》核心期刊
  • RCCSE中国核心学术期刊

鸡催乳素受体胞外域的分子克隆及原核表达

刘颖,黎敏义,刘志,李孝伟,施振旦

刘颖,黎敏义,刘志,李孝伟,施振旦. 鸡催乳素受体胞外域的分子克隆及原核表达[J]. 华南农业大学学报, 2006, 27(4): 73-77. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2006.04.019
引用本文: 刘颖,黎敏义,刘志,李孝伟,施振旦. 鸡催乳素受体胞外域的分子克隆及原核表达[J]. 华南农业大学学报, 2006, 27(4): 73-77. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2006.04.019
LIU Ying,LI Min-yi,LIU Zhi,LI Xiao-wei,SHI Zhen-dan. Molecular Cloning and Prokaryotic Expression of Chicken Prolactin Receptor Extracellular Domain[J]. Journal of South China Agricultural University, 2006, 27(4): 73-77. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2006.04.019
Citation: LIU Ying,LI Min-yi,LIU Zhi,LI Xiao-wei,SHI Zhen-dan. Molecular Cloning and Prokaryotic Expression of Chicken Prolactin Receptor Extracellular Domain[J]. Journal of South China Agricultural University, 2006, 27(4): 73-77. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2006.04.019

鸡催乳素受体胞外域的分子克隆及原核表达

基金项目: 广东省自然科学基金;高等学校博士学科点专项科研项目

Molecular Cloning and Prokaryotic Expression of Chicken Prolactin Receptor Extracellular Domain

  • 摘要: 根据家鸡催乳素受体基因胞外域序列(GenBank号:D13154)设计并合成1对覆盖编码区58~1249位核苷酸的引物,以家鸡垂体总RNA为模板,经反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法获得了特异性片断,将该片断克隆入pMD18-T载体并转化感受态细菌Ecoli DH5α永久保存.通过设计第2对引物扩增PRLR胞外域cDNA片段,该片段经酶切后克隆到表达载体pRSETA的EcoRⅠ和HindⅢ两酶切位点之间,构建重组质粒pR-PRLR.该质粒在转化感受态细菌E.coli B121(DF.3)后,在IPTG诱导下促使重组菌表达了相对分子质量为53640左右的重组融合蛋白,表达量在0.1mmol/L IPTG诱导5h时达到最高,约占总菌体蛋白的17.6%左右.表达产物可经体积分数为50%的Ni-NTA凝胶纯化,说明重组蛋白中具有正确的His-tag标签及之后的鸡催乳素受体编码区胞外域序列.
计量
  • 文章访问数:  1019
  • HTML全文浏览量:  0
  • PDF下载量:  1189
  • 被引次数: 0
出版历程
  • 收稿日期:  2005-12-28
  • 刊出日期:  2006-10-09

目录

    /

    返回文章
    返回