用PCR-RFLP技术鉴别鲁道夫对盲囊线虫姊妹种的研究
Genetic identification of Contracaecum rudolphii complex by PCR-RFLP
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摘要: 用保守引物扩增鲁道夫对盲囊线虫Contracaecum rudolphii姊妹种和C.septentrionale rDNA第一内转录间隔区(ITS-1)片段并纯化,根据鲁道夫对盲囊线虫A、鲁道夫对盲囊线虫B和C.septentrionale rDN ITS-1序列,选用限制性内切酶Msp Ⅰ和Nsi Ⅰ酶切,酶切产物用琼脂糖凝胶电泳分析.结果经Msp Ⅰ酶切后,鲁道夫对盲囊线虫姊妹种与C.septentrionale表现出不同的条带;经Nsi Ⅰ酶切后,鲁道夫对盲囊线虫B和C.septentrionale结果一致,与鲁道夫对盲囊线虫A不同.用MspI可以鉴定出C.septentrionale,用Nsi Ⅰ可以鉴定出鲁道夫对盲囊线虫A,2个限制性内切酶合用可以将鲁道夫对盲囊线虫A、鲁道夫对盲囊线虫B以及C.septentrionale分别鉴定出来.根据鲁道夫对盲囊线虫A、鲁道夫对盲囊线虫B以及C.septentrionale rDNA ITS-1基因序列建立的鲁道夫对盲囊线虫姊妹种PCR-RFIP鉴别技术能够对鲁道夫对盲囊线虫姊妹种进行准确、特异和简便的鉴别.
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Keywords:
- PCR-RFLP /
- Contracaecum rudolphii complex /
- rDNA /
- ITS-1
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