Isolation, screening and indoor control effect of biocontrol bacteria against Acanthopanax senticosus black spot
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摘要:目的
筛选对刺五加黑斑病具有生防潜力的细菌菌株。
方法采用平板对峙法从健康刺五加根际土壤中分离筛选对刺五加黑斑病菌具有拮抗作用的菌株，基于形态学、生理生化鉴定及16S rDNA结合gyrB测序分析进行菌种分类鉴定，测定其抗菌谱；并通过叶面定殖及盆栽防效试验进一步评价该菌的生防潜力。
结果分离得到419株细菌，其中，菌株YZ-375鉴定为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis。菌株YZ-375对刺五加黑斑病菌的拮抗效果较好，无菌滤液的抑制率为65.85%，且对人参立枯丝核菌Rhizoctonia solani、人参链格孢菌Alternaria panax、人参茄腐皮镰孢菌Fusarium solani、人参核盘菌Sclerotinia ginseng、人参毁灭柱孢菌Cylindrocarpon destructans、五味子尖镰孢菌Fusarium oxysporum均具有拮抗效果，抑制率为69.21%~77.44%。在鲜叶定殖35 d后，菌株YZ-375菌量仍能保持在每克鲜叶103 CFU。菌株YZ-375对刺五加黑斑病防效达72.31%，与枯草芽孢杆菌、苯醚甲环唑防效无显著差异。
结论贝莱斯芽孢杆菌YZ-375具有良好的生防潜力，具有一定的开发应用前景。
Abstract:ObjectiveIn order to screen the bacteria with biological control potential against Acanthopanax senticosus black spot.
MethodThe bacteria with antagonistic effect against A. senticosus black spot were isolated and screened from the rhizosphere soil of healthy A. senticosus by plate confrontation method. The screened strains was classified and identified based on morphological, physiological, biochemical identification and 16S rDNA combined with gyrB sequencing analysis, and the antibacterial spectrum was determined. Its biocontrol potential was further evaluated through leaf colonization and pot control effect test.
ResultA total of 419 strains of rhizosphere bacteria were isolated from A. senticosus. Among them, the strain YZ-375 was identified as Bacillus velezensis. Strain YZ-375 had good antagonistic effect against the black spot pathogen of A. senticosus, the inhibition rate of sterile filtrate was 65.85%. The strain YZ-375 had antagonistic effects against Rhizoctonia solani, Alternaria panax, Fusarium solani, Sclerotinia gingseng, Cylindrocarpon destructans and Fusarium oxysporum, with the inhibition rates from 69.21% to 77.44%. After 35 d of colonization in fresh leaves, the bacterial count of strain YZ-375 remained at 103 CFU per gram of fresh leaves. The control effect of strain YZ-375 on black spot of A. senticosus reached 72.31%, which was not significantly different from that of Bacillus subtilis and difenoconazole.
ConclusionB. velezensis YZ-375 has good biocontrol potential and has certain development and application prospects.
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由荔枝霜疫霉Peronophythora litchii引起的霜疫病是荔枝的一种重要病害，可严重影响荔枝的生产和采后保鲜。在田间自然环境中，该病原菌主要以孢子囊和游动孢子的形式经流水和液滴飞溅传播，以卵孢子的形式在土壤和落果上越冬[1]。防治霜疫病以使用化学药剂为主[2-3]。但化学药剂的大量使用不仅污染环境，还会导致病原菌产生抗药性，因此急需开发环境友好型杀菌剂。
荔枝多酚作为荔枝体内重要的次生代谢产物，广泛存在于荔枝叶片、果皮和果核中，其不但具有降糖、抗癌、抗氧化等活性[4-5]，还具有抗细菌和抗病毒活性，例如木犀草素(Luteolin，荔枝叶片多酚类物质)对金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、大肠埃希菌Escherichia coli、痢疾志贺氏菌Shigella dysenteriae等具有很强的抑制作用[6]；原花青素A(A-type proanthocyanidins，荔枝种子多酚类物质)在体外具有抗单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus-1)和柯萨奇病毒(Coxsackie virus B3)的活性[7]。荔枝多酚抗植物病原菌活性鲜有报道。植物多酚具有很强的抗真菌活性，Wang等[8]报道甜樱桃多酚类物质可以抑制链格孢Alternaria alternata生长和交链孢菌酮酸的积累；Xu等[9]研究了18种合成或天然酚类物质对货架期葡萄灰霉病的控制作用，表明紫檀芪和白皮杉醇能显著减轻灰霉病害发生的严重程度。关于荔枝多酚对荔枝霜疫霉及霜疫病的作用效果鲜见报道。本文通过纯培养条件研究荔枝多酚对霜疫霉生长、产孢、孢子萌发、卵孢子产生等方面的影响，以期为荔枝霜疫病的发生流行和开发荔枝多酚类生物源杀菌剂研究奠定理论基础。
1. 材料和方法
1.1 供试菌株
荔枝霜疫霉菌株(编号SHS3)为华南农业大学农学院植物病理学系真菌研究室分离、鉴定和保存。
1.2 荔枝果皮多酚的抽提及含量测定
1.2.1 多酚物质的抽提
参考王敏等[10]的方法并略加改进，取黑叶荔枝的果皮，用粉碎机研磨粉碎后置于干燥器中保存。称取荔枝果皮粉末0.2 g，加入70%(φ)的乙醇溶液15 mL及少许CaCO3，浸提24 h，在45 ℃下超声波(700 W)提取15 min，5 000 r·min−1离心10 min，再加入5 mL 70%(φ)乙醇溶液提取2次，合并浸提液，将浸提液真空浓缩，除去乙醇备用。
1.2.2 多酚含量的测定
多酚含量的测定采用福林−酚比色法[11]。精密称取没食子酸标准品(美国sigma公司)0.1 g，用去离子水定容至100 mL。将此溶液稀释成质量浓度为500.000、250.000、125.000、62.500、31.250、15.625 μg·mL−1的溶液，各质量浓度梯度的溶液分别取20 μL于5 mL试管中，加入1.8 mL 2 mol·L−1的福林−酚试剂(购自Fluka公司)，放置5 min后加入1.2 mL 15%(w) Na2CO3溶液，在40 ℃烘箱中保温30 min后，测定D760 nm，绘制标准曲线，并进行线性回归分析。
取果皮浸提液20 μL按上述同样的步骤和方法测定浸提液的D760 nm，进而求出抽提得到的多酚总含量。
1.3 荔枝多酚对荔枝霜疫霉的影响
1.3.1 对菌落生长形态的影响
方法参考文献[12]，荔枝霜疫霉于25 ℃条件下PDA培养基培养7 d后，用打孔器获取直径为5 mm的菌饼置于含有不同质量浓度荔枝多酚(0、10、50、100、150、200、250、300 μg·mL−1)的PDA平板上，于25 ℃条件下培养7 d后，拍照记录霜疫霉菌落生长状态。试验重复3次。
1.3.2 对生长量的影响
方法参考文献[13]，荔枝霜疫霉于25 ℃条件下PDA培养基培养7 d后，用打孔器获取直径一致的菌饼(d = 5 mm)，接种于含有100 mL PD培养基的250 mL三角瓶中，PD培养基中荔枝多酚的终质量浓度分别为0、10、50、100、150、200、250和300 μg·mL−1。每个锥形瓶中接入3个菌饼，置于28 ℃条件下，200 r·min−1培养5 d后，使用真空抽滤的方法收集菌丝和孢子，80 ℃烘箱中烘干至恒质量，以只接相同大小的空白PDA培养基作为对照，将每个处理的质量减去对照的质量即可计算菌丝的生长量。每个处理设置3次重复。
1.3.3 对孢子囊产量的影响
方法参考文献[14]，将荔枝霜疫霉在PDA培养基上培养7 d后，切取生长直径一致的菌落，用无菌水冲洗孢子囊并配制成5×104 mL−1的悬浮液。吸取100 μL的孢子囊悬浮液分别涂布在含有多酚质量浓度为10、50、100、150、200、250、300 μg·mL−1的PDA平板上，以空白PDA为对照，每个处理设置3次重复。将所有的处理置于25 ℃条件下分别培养2、4、6 d后，于每个培养皿的5个不同点各取菌碟5块，无菌水冲洗后测定单位面积孢子囊的数量。
1.3.4 对孢子囊形态和萌发方式的影响
将“1.3.3”不同处理培养得到的霜疫霉配制成浓度为104 mL−1的孢子囊悬浮液，分别吸取30 μL不同处理的孢子囊悬浮液于凹玻片上，25 ℃条件下黑暗培养2 h后，在显微镜下观察孢子囊的形态和萌发，每个处理设置3次重复，每次重复选取50个孢子囊测定大小，计数100个孢子囊测定萌发率。
1.3.5 对孢子囊萌发的影响
将荔枝霜疫霉在胡萝卜培养基上培养7 d后，切取生长直径一致的菌落，用无菌水冲洗后配制成5×104 mL−1的孢子囊悬浮液。分别在水琼脂平板上加入荔枝多酚化合物使其终质量浓度分别达到10、50、100、150、200、250、300 μg·mL−1，然后取200 μL孢子囊悬浮液分别涂布在含不同浓度多酚的平板上，以不加多酚为对照。参照Kao等[15]和Neufeld等[16]方法，将处理后的平板在16 ℃条件下放置30 min，然后在25 ℃条件下放置2 h后加入2 μL 12%(w) CuSO4溶液固定，观察孢子囊的萌发，统计萌发率。每个处理设置3次重复，每次重复计数100个孢子囊。
1.3.6 对游动孢子萌发的影响
参考Pauline等[17]方法，将荔枝霜疫霉在胡萝卜培养基中于25 ℃条件下培养7 d后，用无菌水迅速配成浓度为104 mL−1的孢子囊悬浮液，置于16 ℃黑暗培养2 h后用孔径为20 μm的滤膜过滤混合液，即可除去孢子囊，配制得到游动孢子悬浮液，将得到的悬浮液在振荡器震荡30 s。
分别在水琼脂平板上加入荔枝多酚化合物使其终质量浓度分别达到10、50、100、150、200、250、300 μg·mL−1，取200 μL配制得到的游动孢子悬浮液分别涂布在含不同浓度多酚的平板上，以不加多酚为对照。将处理的平板在25 ℃下放置2 h后统计游动孢子的萌发，每个处理设置3次重复，每次重复计数100个游动孢子。
1.3.7 对卵孢子产量的影响
参照Flier等[18]方法，将荔枝霜疫霉菌饼接种在含有多酚质量浓度分别为10、50、100、150、200、250、300 μg·mL−1的PDA平板中央，25 ℃条件下黑暗培养25 d后，在离接种点10 mm的区域内随机切取2块10 mm×10 mm的菌丝块，置于10 mL离心管中，加入3 mL去离子水，用高速匀浆机(6 000 r·min−1)匀浆2 min，吸取50 μL匀浆液，在显微镜下记录其中的卵孢子数量，从而求得每平方毫米卵孢子数量。每个处理设置3次重复。
2. 结果与分析
2.1 没食子酸标准曲线的绘制及荔枝多酚质量浓度的确定
通过测定不同质量浓度没食子酸的D760 nm，得到没食子酸标准曲线图，其线性方程为y = 0.000 8 x + 0.143 4，R2 = 0.999 2>0.95，D760 nm与对应的质量浓度呈线性关系。根据测得的标准曲线和荔枝多酚的D760 nm求出分离得到的荔枝多酚质量浓度，并在此基础上配制不同质量浓度的荔枝多酚溶液。
2.2 荔枝多酚对荔枝霜疫霉菌落形态的影响
多酚的不同质量浓度影响荔枝霜疫霉的菌落形态。多酚质量浓度较低时，霜疫霉菌落的气生菌丝为绒状；多酚质量浓度为300 μg·mL−1时，气生菌丝为毡状，菌落致密，平铺在平板表面(图1)。
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图 1 荔枝霜疫霉在不同质量浓度荔枝多酚的PDA平板上的菌落形态a：0(CK)；b：50 μg·mL−1；c：200 μg·mL−1；d：300 μg·mL−1Figure 1. Colony morphologies of Peronophythora litchii cultured on PDA plates at different concentrations of litchi polyphenols2.3 荔枝多酚对荔枝霜疫霉生长量的影响
不同质量浓度的荔枝多酚能够显著影响霜疫霉的生长量。如图2所示，低质量浓度的多酚对荔枝霜疫霉的生长量有显著促进作用，多酚质量浓度为50 μg·mL−1时，霜疫霉的生长量最大，菌丝干质量达到0.53 g；荔枝多酚质量浓度为150~300 μg·mL−1时，霜疫霉的生长量无显著差异，但显著低于对照。
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图 2 不同质量浓度的荔枝多酚对荔枝霜疫霉菌丝干质量的影响图中柱子上方不同小写字母者，表示差异显著(P<0.05，Duncan’ s法)Figure 2. Effects of different litchi polyphenol concentrations on dry weight of Peronophythora litchiiColumns with different lowercase letters indicate significantly different (P<0.05，Duncan’ s method)2.4 荔枝多酚对霜疫霉孢子囊产量的影响
荔枝多酚抑制霜疫霉孢子囊的产量，由表1可知，随着荔枝多酚质量浓度的提高，霜疫霉孢子囊的产量呈下降趋势。培养6 d时，对照的孢子囊产量最多，当荔枝多酚质量浓度增大为250 μg·mL−1时，孢子囊产量下降了89.6%，仅为28.0 mm−2。
表 1 荔枝多酚对霜疫霉孢子囊产量的影响1)Table 1. Effects of litchi polyphenols on sporangia production of Peronophythora litchiit/d ρ(荔枝多酚)/(μg·mL−1) Litchi polyphenol concentration 0(CK) 10 50 100 150 200 250 300 2 2.1±0.2a 0.7±0.1b 0.3±0.09c 0.2±0.0c 0.2±0.0c 0.1±0.0c 0.1±0.0c 0±0.0c 4 117.3±2.9b 253.5±24.3a 88.9±2.9c 80.2±2.1c 65.8±2.5cd 46.1±0.4d 16.0±1.4e 13.6±1.2e 6 268.3±13.2a 290.5±26.4a 140.7±4.9b 111.1±1.4bc 94.7±3.7c 53.9±4.6d 28.0±3.7d 27.2±1.4d 1)表中数据为3次重复的平均值±标准误，同行数据后不同小写字母者表示差异显著(P<0.05，Duncan’ s法)
1)The data in the table indicate the average value of three repetitions (± standard error), data with different lowercase letters in the same line are significantly different(P<0.05，Duncan’ s method)2.5 荔枝多酚对霜疫霉孢子囊萌发方式的影响
荔枝多酚影响霜疫霉孢子囊的萌发方式和大小。当荔枝多酚的质量浓度不大于100 μg·mL−1时，孢子囊只以产生芽管的方式萌发，当多酚质量浓度为150 μg·mL−1时，有1.9%的孢子囊以释放游动孢子的方式萌发，且随着多酚质量浓度的增加，孢子囊释放游动孢子的萌发方式所占的比例逐渐加大(表2)。随着多酚质量浓度的增加，孢子囊变长，多酚为300 μg·mL−1时，孢子囊为38.6 μm ×21.6 μm，明显长于对照孢子囊。
表 2 荔枝多酚对霜疫霉孢子囊萌发方式及大小的影响1)Table 2. Effects of litchi polyphenols on sporangia germination mode and size of Peronophythora litchiρ(荔枝多酚)/
(μg·mL−1)
Litchi polyphenol concentration孢子囊萌发方式及比例
Germination mode and proportion of sporangia孢子囊长度/μm
Length of sporangia孢子囊宽度/μm
Width of sporangia萌发成芽管/%
Rate of germination to germ tube释放游动孢子/%
Rate of zoospores release0(CK) 60.6 0 27.9d 20.3ab 10 54.4 0 29.6cd 19.5b 50 52.3 0 30.7bcd 19.6b 100 51.7 0 32.9bc 19.6b 150 56.2 1.9 33.2b 18.9b 200 48.6 3.8 33.0bc 18.6b 250 42.6 9.3 36.7a 18.9b 300 50.6 10.7 38.6a 21.6a 1)同列数据后不同小写字母者，表示差异显著(P<0.05，Duncan’ s法)
1)Data in the same column with different letters are significantly different(P<0.05，Duncan’ s method)2.6 荔枝多酚对霜疫霉孢子囊和游动孢子萌发的影响
荔枝多酚质量浓度为10~50 μg·mL−1时促进孢子囊萌发，之后多酚质量浓度的增加抑制霜疫霉孢子囊萌发，当多酚质量浓度为300 μg·mL−1时，孢子囊萌发率降低了19.2%(图3A)。荔枝多酚质量浓度为0~300 μg·mL−1时，显著促进游动孢子萌发(图3B)。
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图 3 荔枝多酚对霜疫霉孢子囊和游动孢子萌发的影响图中柱子上方不同小写字母者，表示差异显著(P<0.05，Duncan’ s法)Figure 3. Effects of litchi polyphenols on germination of sporangia and zoospores of Peronophythora litchiiColumns with different lowercase letters are significantly different (P<0.05，Duncan’ s method)2.7 荔枝多酚对荔枝霜疫霉卵孢子产量的影响
在PDA培养基中加入荔枝多酚后，可显著提高荔枝霜疫霉卵孢子产量。在无荔枝多酚的PDA培养基上，培养荔枝霜疫霉2~4周未见卵孢子产生，而在培养基中加入100 μg·mL−1的荔枝多酚，培养1周后可见大量卵孢子产生，最多可达10.8 mm−2，继而随着多酚质量浓度的提高，卵孢子的产量逐渐降低至稳定水平(图4)。
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图 4 荔枝多酚对荔枝霜疫霉卵孢子产量的影响图中柱子上方不同小写字母者，表示差异显著(P<0.05，Duncan’ s法)Figure 4. Effect of litchi polyphenols on oospore number of Peronophythora litchiiColumns with different lowercase letters are significantly different (P<0.05，Duncan’ s method)3. 结论与讨论
多酚作为植保素的重要组成成分，广泛存在于各种植物体内，对多种病原微生物的活性均有显著的影响[19-20]。本文利用溶剂浸提法，从果皮中提取荔枝多酚类物质，当其质量浓度大于150 μg·mL−1时可明显抑制霜疫霉的生长、孢子囊萌发；孢子囊的产量随着荔枝多酚质量浓度的升高明显减少。此结果说明荔枝多酚类物质具有抑制霜疫霉生长和产生孢子囊的活性，表明其具有开发新型安全性生物源杀菌剂的潜力，但具体是哪一种酚起主要作用有待于进一步研究。
荔枝多酚类物质可参与荔枝霜疫霉生长发育的调控。研究表明当荔枝多酚质量浓度大于150 μg·mL−1时，孢子囊开始以释放游动孢子的形式萌发，而且随着多酚质量浓度增加，游动孢子的萌发率亦增加；荔枝霜疫霉在含有荔枝多酚的PDA培养基上产生大量卵孢子，而在PDA培养基上不易产生卵孢子。据此推测荔枝霜疫霉在长期的进化中，因为不断适应环境和寄主，一方面荔枝多酚类物质可导致孢子囊数量的减少并抑制其萌发，但可通过促进游动孢子的产生和萌发来弥补孢子囊作为侵染源数量上的损失；另一方面霜疫霉利用荔枝多酚类物质产生卵孢子，并以此度过不良环境条件而使之成为次年的初侵染源。由此可见，荔枝多酚类物质对霜疫病的发生和流行起到一定的抑制作用。
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图 1 菌株YZ-375对细极链格孢的抑菌效果
Figure 1. Inhibitory effect of antagonistic strain YZ-375 on Alternaria tenuissima
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图 2 菌株YZ-375 菌落形态(A)与革兰染色(B)
Figure 2. Colony morphology (A) and gram staining (B) of strain YZ-375
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图 3 菌株YZ-375基于16S rDNA与gyrB序列的进化树
Figure 3. Phylogenetic trees about YZ-375 based on sequences of 16S rDNA and gyrB
表 1 菌株YZ-375对刺五加黑斑病防控效果1)
Table 1 Control effect of strain YZ-375 against Alternaria tenuissima
处理
Treatment病情指数
Disease index防治效果/%
Control effectYZ-375 12.59±2.46b 72.31±5.40a 枯草芽孢杆菌
Bacillus subtilis12.59±1.74b 72.31±3.82a 苯醚甲环唑
Difenoconazole14.22±0.81b 68.73±1.78a CK 45.48±2.20a 1)表中数据为平均值±标准差；同列数据后不同小写字母表示差异显著(P < 0.05 ，Duncan’s 法)
1)Data in the table are means ± SDs; Different lowercase letters in the same column indicate significant differences (P < 0.05, Duncan’s test)
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[1] 中国科学院植物研究所. 中国高等植物图鉴: 第二册[M]. 北京: 科学出版社, 1983: 54-88. [2] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典[M]. 北京: 中国医药科技出版社, 2020: 206. [3] 支叶. 刺五加病害的病原学研究及室内药剂筛选[D]. 长春: 吉林农业大学, 2011. [4] ZHENG H H, WU X H. First report of Alternaria blight of potato caused by Alternaria tenuissima in China[J]. Plant Disease, 2013, 97(9): 1246.
[5] KHAN M F R, HAQUE M E, BLOOMQUIST M, et al. First report of Alternaria leaf spot caused by Alternaria tenuissima on sugar beet (Beta vulgaris) in Minnesota, U. S. A.[J]. Plant Disease, 2020, 104(2): 580.
[6] 王壮, 张爱华, 雷锋杰, 等. 五味子叶枯病病原菌的生物学特性及其拮抗放线菌的初筛[J]. 吉林农业大学学报, 2015, 37(5): 524-529. [7] 王飞, 杨瑾, 李雪梦, 等. 丹参茎基腐病病原鉴定及防治药剂筛选[J]. 植物病理学报, 2022, 52(6): 950-958. [8] 刘畅, 卢宝慧, 刘小畅, 等. 刺五加黑斑病的室内药剂筛选和田间药效试验[J]. 吉林农业大学学报, 2015, 37(3): 281-286. [9] 杨利民. 中药材生态种植理论与技术前沿[J]. 吉林农业大学学报, 2020, 42(4): 355-363. [10] 邹曼, 陈雨诗, 许春艳, 等. 生防芽孢杆菌对果蔬采后病害防治的研究进展[J]. 食品工业科技, 2023, 44(4): 488-495. [11] 王妍, 张福军, 孙卓, 等. 防风枯萎病拮抗真菌的筛选鉴定及防效评价[J]. 华南农业大学学报, 2023, 44(2): 263-269. [12] RYU H, PARK H, SUH D, et al. Biological control of Colletotrichum panacicola on Panax ginseng by Bacillus subtilis HK-CSM-1[J]. Journal of Ginseng Research, 2014, 38(3): 215-219. doi: 10.1016/j.jgr.2014.05.001
[13] SUN Z, YANG L M, ZHANG L X, et al. An investigation of Panax ginseng Meyer growth promotion and the biocontrol potential of antagonistic bacteria against ginseng black spot[J]. Journal of Ginseng Research, 2018, 42(3): 304-311. doi: 10.1016/j.jgr.2017.03.012
[14] 冯志珍, 陈太春, 段军娜, 等. 烟草黑胫病拮抗根际芽胞杆菌FB-16的筛选鉴定及其抑菌活性[J]. 植物保护学报, 2012, 39(3): 224-230. [15] 单文荣, 李俊霞, 刘花粉. 滤纸片法筛选不同活性物对棉花黄萎病菌抑制效果研究[J]. 中国农学通报, 2010, 26(19): 285-289. [16] 贾凤安, 陈亮, 陈立, 等. 大棚甜瓜三种主要真菌病害拮抗细菌的筛选与鉴定[J]. 植物保护学报, 2010, 37(6): 505-510. [17] 东秀珠, 蔡妙英. 常见细菌系统鉴定手册[M]. 北京: 科学出版社, 2001: 242-370. [18] GOODFELLOW M, KÄMPFER P, BUSSE H J, et al. Bergey’s Manual® of Systematic Bacteriology[M]. New York: Springer, 2012: 732-758.
[19] 豆雅楠, 牛世全, 豆建涛, 等. 芽孢杆菌拮抗苹果树腐烂病菌的筛选、鉴定及抑菌活性初探[J]. 微生物学通报, 2018, 45(12): 2684-2694. [20] 张洁婧, 陈德国, 高继轩, 等. 人参锈腐病生防菌的筛选、鉴定及其对根际土壤微生物多样性的影响[J]. 吉林农业大学学报, 2020, 42(5): 526-532. [21] YAMAMOTO S, HARAYAMA S. PCR amplification and direct sequencing of gyrB genes with universal primers and their application to the detection and taxonomic analysis of Pseudomonas putida strains[J]. Applied and Environmental Microbiology, 1995, 61(3): 1104-1109. doi: 10.1128/aem.61.3.1104-1109.1995
[22] 孙卓, 杨利民. 人参灰霉病拮抗细菌的筛选及鉴定[J]. 植物保护学报, 2016, 43(6): 935-942. [23] CUI X L, MAO P H, ZENG M, et al. Streptimonospora salina gen. nov., sp nov., a new member of the family Nocardiopsaceae[J]. International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology, 2001, 51(2): 357-363. doi: 10.1099/00207713-51-2-357
[24] 刘锦霞, 李娜, 李晶, 等. 生防菌株SW11在番茄植株上的定殖能力及其对番茄灰霉病的防控效果[J]. 中国生物防治学报, 2015, 31(3): 353-360. [25] 雷晶晶, 康业斌, 苗圃, 等. 枯草芽孢杆菌B2-GFP菌株的构建及其在土壤中的定殖[J]. 福建农林大学学报(自然科学版), 2022, 51(5): 577-582. [26] 冉淦侨, 王楠, 戴佳锟, 等. 枯草芽孢杆菌BS24在苹果叶面的定殖及其对叶面菌群的影响[J]. 生物技术通报, 2013(10): 131-136. [27] 孙卓. 人参病害生防细菌的筛选及其防病作用研究[D]. 长春: 吉林农业大学, 2014. [28] 林星辰. 人参内生细菌B69的生防功能研究[D]. 长春: 吉林农业大学, 2018. [29] LIU Y, TENG K, WANG T, et al. Antimicrobial Bacillus velezensis HC6: Production of three kinds of lipopeptides and biocontrol potential in maize[J]. Journal of Applied Microbiology, 2020, 128(1): 242-254. doi: 10.1111/jam.14459
[30] JIANG C H, LIAO M J, WANG H K, et al. Bacillus velezensis, a potential and efficient biocontrol agent in control of pepper gray mold caused by Botrytis cinerea[J]. Biological Control, 2018, 126: 147-157. doi: 10.1016/j.biocontrol.2018.07.017
[31] KUMBAR B, MAHMOOD R, NAGESHA S N, et al. Field application of Bacillus subtilis isolates for controlling late blight disease of potato caused by Phytophthora infestans[J]. Biocatalysis and Agricultural Biotechnology, 2019, 22: 101366. doi: 10.1016/j.bcab.2019.101366.
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期刊类型引用(2)
1. 赵岩，祝文慧，赵晓军，殷辉，任璐，周建波. 不同诱孢方法对辣椒疫霉菌孢子囊消长动态的影响. 山西农业科学. 2023(04): 400-405 . 
百度学术
2. 孔广辉，冯迪南，李雯，连帅利，习平根，姜子德. 荔枝霜疫病的研究进展. 果树学报. 2021(04): 603-612 . 百度学术
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