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大豆核心种质籽粒铁、锌含量精准鉴定及相关性分析

贾佳, 汪欢, 段明明, 陈博, 程艳波, 年海

贾佳, 汪欢, 段明明, 等. 大豆核心种质籽粒铁、锌含量精准鉴定及相关性分析[J]. 华南农业大学学报, 2023, 44(5): 760-768. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.202211004
引用本文: 贾佳, 汪欢, 段明明, 等. 大豆核心种质籽粒铁、锌含量精准鉴定及相关性分析[J]. 华南农业大学学报, 2023, 44(5): 760-768. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.202211004
JIA Jia, WANG Huan, DUAN Mingming, et al. Accurate identification and correlation analysis of iron and zinc contents in soybean core accessions[J]. Journal of South China Agricultural University, 2023, 44(5): 760-768. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.202211004
Citation: JIA Jia, WANG Huan, DUAN Mingming, et al. Accurate identification and correlation analysis of iron and zinc contents in soybean core accessions[J]. Journal of South China Agricultural University, 2023, 44(5): 760-768. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.202211004

大豆核心种质籽粒铁、锌含量精准鉴定及相关性分析

基金项目: 国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-04-PS11);广东省花生大豆产业技术体系创新团队建设项目(2022KJ136-03)
详细信息
    作者简介:

    贾 佳,博士研究生,主要从事大豆遗传育种研究,E-mail: 1456830603@qq.com

    通讯作者:

    年 海,教授,博士,主要从事大豆遗传育种研究,E-mail: hnian@scau.edu.cn

  • 中图分类号: S565.1

Accurate identification and correlation analysis of iron and zinc contents in soybean core accessions

  • 摘要:
    目的 

    针对中国居民因铁、锌等微量元素摄取不足引发的营养不良问题,开展大豆核心种质籽粒铁、锌含量的精准鉴定。

    方法 

    以国内外来源不同的163份大豆核心种质为材料,2019—2020年种植于华南农业大学试验教学基地,采用火焰原子吸收光谱仪测定籽粒铁和锌的含量,并进行相关性分析。

    结果 

    大豆种质籽粒铁、锌含量在年份间存在显著差异(P<0.05);籽粒铁质量分数为71.02~159.92 mg·kg−1,平均为107.09 mg·kg−1;籽粒锌质量分数为36.32~53.11 mg·kg−1,平均为42.80 mg·kg−1。相关性分析发现,不同年份间籽粒铁与锌含量存在正相关关系,说明这2个元素在大豆籽粒吸收中存在较强的相互促进关系。利用概率分级法将163份大豆种质籽粒铁、锌元素含量分为5级(即极低、低、中、高和极高),综合分析筛选出4份高铁含量、4份高锌含量、5份低铁含量、6份低锌含量和2份铁锌含量双高的大豆种质。

    结论 

    鉴定出多份不同来源的高/低铁、锌含量的大豆种质,可用于富铁、锌大豆新品种的选育和种质创新,同时也为营养功能型新品种遗传基础解析提供基础材料,加快推动大豆核心种质在华南地区的开发与利用。

    Abstract:
    Objective 

    Aiming at the malnutrition problem caused by iron (Fe) and zinc (Zn) minerals deficiency for Chinese people, it is significant to conduct the accurate identification of Fe and Zn contents in soybean core accessions.

    Method 

    The 163 domestic and foreign soybean core accessions were planted in teaching base of South China Agricultural University consecutively in the early season from 2019 to 2020. The contents of two trace elements of Fe and Zn in the sample grains, were measured by flame atomic absorption spectrometer method, and the correlation analysis was carried out.

    Result 

    There were significant differences in the contents of two trace elements between the test years (P<0.05). The variation range of grain Fe content of soybean germplasm resources in two years was 71.02−147.91 mg·kg−1, the average Fe content was 107.09 mg·kg−1, and the variation range of grain Zn content was 36.32−53.11 mg·kg−1, the average content of Zn was 42.80 mg·kg−1. There was a positive correlation between Fe and Zn contents in grains of 163 soybean lines from different sources in different years, indicating that there was a strong mutual promotion between two elements. The mineral contents of 163 soybean accessions were divided into five grades by probability grading method, namely extremely low, low, medium, high and very high. And four soybean accessions with high Fe content, four with high Zn content, five with low Fe content, six with low Zn content and two with high Fe and Zn contents were screened out.

    Conclusion 

    The soybean core accessions screened with high/low Fe and Zn content in this study can not only be used for breeding new accessions rich in Fe and Zn content, but also provide the valuable materials for elucidating the genetic basis of functional and new nutrition accessions, and accelerate the use of soybean core accessions and promote the development of soybean production in the South China area.

  • 弄蝶科Hesperiidae昆虫是一类色泽比较单一,翅面斑纹变化较大的蝴蝶,其种间、属间,甚至亚科间有模拟现象,表现出翅面斑纹的高度相似性,而有的种类雌、雄或种下存在明显的差异。越来越多的研究表明,仅依据成虫的形态特征,尤其过分依赖翅面斑纹的传统分类导致的误判与分类地位的混乱普遍存在[1-10]

    银弄蝶属Carterocephalus Lederer, 1852隶属于弄蝶科链弄蝶亚科Heteropterinae,目前已知约19种,分布于亚洲、欧洲和北美洲,在中国均有分布,其中12种为我国特有。成虫活跃于高山草甸及林窗地带,喜访花和在潮湿地面吸水;幼虫以雀麦属Bromus、洋狗尾草属Cynosurus等禾本科植物为食[11]

    醒斑银弄蝶C. alcina是Evans于1939年以产自云南腾冲的标本为模式描述的[12]。李传隆[13]以产自云南昆明西山的标本为模式描述了黄斑银弄蝶C. alcinoides,之后的多数研究中仅有黄斑银弄蝶的记录[11, 14-21];另外,将其他种误定为该种的也不少见[11, 22]。近来我们在研究银弄蝶时发现,2头产自北京的标本与醒斑银弄蝶非常相似,但又存在明显差异,有研究将其误定为黄斑银弄蝶[18-19, 23-24]

    本研究的目的旨在系统研究银弄蝶形态学的基础上,以醒斑银弄蝶及相近物种为主要研究对象,综合其形态特征、COI序列和地理分布等信息,厘清它们之间的关系。

    根据Evans[25]、武春生等[11]的分类结果,本研究以醒斑银弄蝶、黄斑银弄蝶为主要研究对象,为了更好地解决疑难种的分类及近似种的关系问题,研究材料包括这2个种不同分布地,同一分布地斑纹变异的不同个体以及近似斑纹的其他种,共9种,32个个体(表1),根据近年弄蝶科系统发育研究[10, 26-27],选取链弄蝶亚科Heteropterinae中4个不同属的物种:链弄蝶 Heteropterus morpheus(Genebank 序列号:KF881050)、小弄蝶 Leptalina unicolor (Genebank 序列号:AB192500)、糜弄蝶 Metisella metis(Genebank 序列号:KY019796)、胆弄蝶 Dardarina dardaris(Genebank 序列号:GU161460)为外群。除GeneBank下载的序列外,其余均为本研究测序结果,并已上传NCBI,具有标本编号的材料均保存于华南农业大学昆虫学系昆虫标本馆(表1)。

    表  1  本研究银弄蝶属Carterocephalus的标本信息1)
    Table  1.  The specimen information of Carterocephalus in this study
    物种名
    Species
    采集地点
    Collecting locus
    采集日期
    Collecting date
    性别
    Sexuality
    标本编号
    Specimen ID
    登录号2)
    Accession number
    醒斑银弄蝶 Carterocephalus alcina 云南昆明西山森林公园 2016-08-07 SCAU He2228 MW115543
    2016-08-07 SCAU He2229 MW115544
    云南腾冲明光乡 2016-07-06 SCAU He2209 MW115545
    2016-07-07 SCAU He2203 MW115546
    云南泸水片马镇 2018-07-16 SCAU He2204 MW115547
    2018-07-16 SCAU He2211 MW115548
    2018-07-16 SCAU He2212 MW115549
    云南楚雄哀牢山 2018-08-23 SCAU He2205 MW115550
    2018-08-23 SCAU He2210 MW115551
    云南保山龙陵县 2017-07 SCAU He2236 MW115552
    云南大理弥渡县 2016-07-27 SCAU He2227 MW115553
    云南丽江玉龙县 2019-05-02 SCAU He2206 MW115554
    云南昆明寻甸县 2013-04-09 SCAU He2234 MW115555
    云南曲靖竹园镇 2016-07-04 SCAU He2207 MW115556
    贵州贵阳 2006-06-15 SCAU He2235 MW115557
    越南河江 2016-06 SCAU He2216 MW115558
    四川甘孜州雅江县 2018-06-08 SCAU He2208 MW115559
    2019-05-21 SCAU He2213 MW115560
    2019-05-21 SCAU He2218 MW115561
    2019-05-21 SCAU He2219 MW115562
    云南昆明西山森林公园 2018-08-23 MN012974*
    长斑银弄蝶 C. longimaculatussp. nov. 北京小龙门森林公园 2014-05-25 SCAU He2202 MW115563
    北京灵山 2017-06-03 SCAU He2217 MW115564
    白斑银弄蝶 C. dieckmanni 甘肃甘南州夏河县 2020-06-02 SCAU He2200 MW115565
    基点银弄蝶 C. argyrostigma 甘肃甘南州夏河县 2020-06-02 SCAU He2201 MW115566
    银线银弄蝶 C. patra 云南香格里拉小中甸镇 2019-08-05 SCAU He2222 MW115567
    2019-08-04 SCAU He2221 MW115568
    射线银弄蝶 C. abax 云南香格里拉小中甸镇 2019-08-04 SCAU He2225 MW115569
    2019-08-04 SCAU He2226 MW115570
    银弄蝶 C. palaemon 日本岐阜县高山市 2014-07-30 SCAU He2231 MW115571
    波兰莫克拉 2017-05-18 SCAU He2232 MW115572
    俄罗斯莫斯科 2016-06 SCAU He2233 MW115573
    芬兰海卢奥托 2006-06-11 HM871044*
    黄翅银弄蝶 C. silvicola 日本上川郡大曲市 2017-07-20 SCAU He2230 MW115574
    挪威艾斯考格 KX049745*
    芬兰托尔尼奥 2003-06-30 JF853608*
    瑞典瑞拉 2012-06-14 MN140974*
    愈斑银弄蝶 C. houangty 西藏林芝波密县 2017-07-28 SCAU He1655 MN199393*
    前进银弄蝶 C. avanti 西藏日喀则吉隆县 2018-05-16 SCAU He1654 MN199391*
     1)“—”表示无法获得该信息;2)“*”表示此序列从NCBI下载
     1)“—”indicates that the information was unavailable; 2)“*” indicates that the sequence was downloaded from NCBI
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    选取代表性标本展翅后用SONY DSC - RX100拍照,将其腹部完整取下,用100 g/L的NaOH溶液加热处理,检视其外生殖器,采用Keyence VHX-5000超景深三维显微系统拍照。稳定的斑纹、外生殖器特征是鉴定种的标准,采用Fan等[3] 的形态术语。

    总DNA的提取使用天根生化科技(北京)有限公司的血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒 (DP304)。COI序列(658 bp)扩增与测序引物多为LCO1490和HCO2198[28],部分扩增困难的标本,根据黄翅银弄蝶C. silvicola[29]、醒斑银弄蝶C. alcina[27]全线粒体基因组及本研究已获得的序列,采用新设计的1对引物(CarF:5′- CGCGCTACTAATCATAAAGATATTG G-3′ 和CarR:5′- CTTCAGGGTGTCCAAAAAATCA-3′)。PCR扩增采用20 μL体系,包括1 μL DNA模板,各0.8 μL(10 μmol/L)的上、下游引物,10 μL的2 × EasyTaq PCR superMix(北京,全式金生物技术有限公司)。PCR扩增程序为94 ℃预变性4 min;94 ℃变性30 s、48或49 ℃退火45 s,72 ℃延伸1.5 min,循环35或40次;72 ℃延伸7 min。测序由上海生工生物工程股份有限公司完成。

    序列检查、拼接及遗传距离的计算使用MAGE 7.0软件[30]。系统发育树构建采用最大似然法(Maximum likelihood, ML)和贝叶斯分析法(Bayesian inference,BI)。其中ML使用RAxML-HPC2 on XSEDE 8.2.12软件[31],选择GTR+G模型,重复抽样1000次,以自展值(Bootstrap support values, BS)评估其节点的稳定性;BI使用MrBayes on XSEDE 3.2.7a软件[32],采用可逆跳跃马尔可夫链蒙特卡罗(Reversible-jump markov chain monte carlo,MCMC)策略,运行5×106代,每1000代抽样1次,用后验概率(Posterior probabilities, PP)评估其分支的稳定性。2种分析均在CIPRES 线上服务平台上完成( https://www.phylo.org/)[33]

    采用Fig Tree 1.4.4和Photoshop CS5软件显示与编辑系统发育树。

    基于ML、BI构建的系统发育树基本一致,仅部分节点的支持值存在差异(图1)。系统树显示银弄蝶属Carterocephalus单系并得到较强支持(BS=91, PP=1);研究材料聚为明显的9支,分别对应形态上的基点银弄蝶C. argyrostigma、射线银弄蝶C.abax、银线银弄蝶C. patra、前进银弄蝶C. avanti、白斑银弄蝶C. dieckmanni、愈斑银弄蝶C. houangty、黄翅银弄蝶C. silvicola与银弄蝶C. palaemon、Clade A和醒斑银弄蝶C. alcina。其中射线银弄蝶与银线银弄蝶,前进银弄蝶与白斑银弄蝶的姐妹关系得到强烈支持;黄翅银弄蝶银弄蝶Clade A和醒斑银弄蝶聚为高度支持的单系支(BS=98, PP=1)。在这一支中,银弄蝶C. palaemon非单系,并与黄翅银弄蝶C. silvicola聚为有强烈支持的一支(BS=98, PP=1);昆明西山的2个样本,即黄斑银弄蝶C. alcinoides没有独立成支,而是嵌套于醒斑银弄蝶C. alcina中,结合形态特征与地理分布,提出黄斑银弄蝶C. alcinoidesLee, 1962是醒斑银弄蝶C. alcina Evans, 1939的异名;北京产的2个个体独立聚成一支(Clade A),综合形态特征及遗传距离,Clade A应该是1个新种,即长斑银弄蝶Carterocephalus longimaculatusHou, Fan & Li sp. nov.

    图  1  基于COI条形码以最大似然法构建的银弄蝶属的系统发育树
    节点处“/”前后数值分别表示最大似然法的自展值和贝叶斯分析法后验概率
    Figure  1.  Phylogenetic tree of Carterocephalus based on COI barcodes using Maximum likelihood analysis
    The values before and after“/” at nodes represent the bootstrap support values (BS) of Maximum likelihood analysis and the posterior probabilities (PP) of Bayesian inference, respectively

    http://zoobank.org/A68ADACD-5893-41F1-AED8-00F72BE5995B

    Carterocephalus sp. Yang et al., 1994: 54[34].

    Carterocephalus alcinus: Seto, 2013: Plate37[24].

    Carterocephalus alcinoides: Wang et al., 1998: 188[18]; Wang, 1999: 277[19].

    鉴别特征:外观与醒斑银弄蝶C. alcina相似,其主要不同在于前翅中室基部具有1个三角形小斑;后翅Sc+R1室具有1个不规则方斑,端部M1-M2室具有1个长斑,延伸至亚缘。

    雄性(图2A2B):触角长约7 mm;下唇须第2节粗、腹面被黄色长毛,第3节尖细、前伸。前翅长13~14 mm,前缘中部没有明显凹入;翅正面深褐色,斑纹橙黄色;中室端斑大,近方形,前缘具有1个较宽条状斑纹,与中室斑相连,终止于R2室基部,中室基部有1个三角形斑,与前缘斑相连或不相连,翅端部R3-R5室、M1-M2室2个方形大斑相连,R4、R5外缘常有2个小斑,M3、CuA1、CuA2室斑相连呈1条宽短带,CuA2室近基部有1个水滴状黄斑,向基部渐窄;反面除外缘具有1列浅黄色小斑、中室端脉淡黄外,与正面基本相同。后翅正面底色、斑纹颜色同前翅,端部分别于M1、M2,CuA1和CuA2室有3个黄斑,其中M1、M2室的最大并延伸近外缘,并在外1/3处有缢缩状,M3室有时可见1个极小斑,Sc+R1室具有1个不规则的方斑,中室基部具有1个水滴形斑,向基部渐窄;反面底色浅褐色,与正面斑对应位置的斑浅黄色,其余奶白色,外缘及亚缘具有2列小斑,Sc+R1室、CuA2室基部均具有1个长斑,中室斑与M1、M2斑之间具不规则的条形斑。前翅缘毛深褐色,后翅外缘毛橙黄色。

    图  2  2种银弄蝶成虫
    A:长斑银弄蝶(SCAU He2217);B:长斑银弄蝶(SCAU He2202); C:醒斑银弄蝶(模式);D:黄斑银弄蝶(模式);E~N:醒斑银弄蝶(SCAU He2210、SCAU He2203、SCAU He2209、SCAU He2229、SCAU He2228、SCAU He2218、SCAU He2206、SCAU He2213、SCAU He2208、SCAU He2219);A~E:1、2分别表示正、反面,3为标签;F~N左右分别表示正、反面
    Figure  2.  Adults of two Carterocephalus species
    A: Carterocephalus longimaculatus sp.nov. (SCAU He2217); B: C. longimaculatus sp.nov. (SCAU He2202) C: C. alcina (Model); D: C. alcinoides (Model); E−N: C. alcina (SCAU He2210, SCAU He2203, SCAU He2209, SCAU He2229, SCAU He2228, SCAU He2218, SCAU He2206, SCAU He2213, SCAU He2208, SCAU He2219); A−E: 1, upperside; 2, underside; 3, lable; F-N: left, upperside; right, underside

    雄性外生殖器(图3A3B):钩形突狭长渐细,端部两裂;颚形突左右愈合,渐窄,末端稍短于钩形突端;囊形突很长,占基腹弧的一半以上;阳茎很长,长于整个基腹弧的骨环结构,阳茎端膜被小刺;阳基轭片环状且沿阳茎背腹面突出;抱器端两裂,其中背端突钝圆,腹端突末端突出,被小刺。

    图  3  2种银弄蝶的外生殖器
    A:长斑银弄蝶(SCAU He2217);B:长斑银弄蝶(SCAU He2202);C:醒斑银弄蝶(SCAU He2203);D:醒斑银弄蝶(SCAU He2213);E:醒斑银弄蝶(SCAU He2212);F:醒斑银弄蝶(SCAU He2219);a:基腹弧侧面观;b:阳茎侧面观;c:背兜与钩形突背面观;d:抱器瓣内侧观;e1:阳基轭片背面观;e2:阳基轭片侧面观
    Figure  3.  Genitalia of two Carterocephalusspecies
    A: Carterocephalus longimaculatus sp. nov. (SCAU He2217); B: C. longimaculatus sp. nov. (SCAU He2202); C: C. alcina (SCAU He2203); D: C. alcina (SCAU He2213); E: C. alcina (SCAU He2212); F: C. alcina (SCAU He2219); a: Lateral view of vinculum; b: Lateral view of phallus; c: Dorsal view of tegumen & uncus; d: Inside view of valva; e1: Dorsal view of juxta; e2: Lateral view of juxta

    雌性:未见标本。根据北京蝶类原色图鉴118页图24a[34],前翅前缘橙黄长条及R4、R5室外缘的小斑缺如,中室基部斑小;后翅M1、M2室大斑不向外延伸、Sc+R1斑小,其余似雄性。

    模式标本:正模♂,北京灵山,2017-Ⅵ-3,李鹏采;副模♂,北京小龙门,2014-Ⅴ-25。模式标本保存于华南农业大学昆虫系昆虫标本室。

    词源:学名longimaculatus源于longi+maculatus,意为后翅正面M1、M2室的长斑。

    主要分布于中国辽宁(建平)、北京(灵山)、天津(八仙山)、河南(济源)等地。该种在北京地区的生境为林间空地及草地,成虫常被目击访花,发生期为5月初至7月中下旬。

    Evans[12]描述醒斑银弄蝶Carterocephalus alcina时除检视了腾冲的标本外,同时还检视了产自丽江与昆明的雌、雄标本共19头。李传隆[13]依据产自昆明西山的2雄1雌标本及河口的1雄标本描述了黄斑银弄蝶C. alcinoides。根据原描述后者与前者极为相似,但又不同,表现在“前翅正面前缘橙黄色长条斑粗且中部膨大;前翅反面4、5(M1、M2)室的斑相连,且内缘略成一条直线;雄性外生殖器钩形突左右分叉,互相紧贴,形似钢笔尖;颚形突左右连成一体,尖长略等于钩形突;雌蝶前缘长条斑缺如”[13]。事实上,与二者的模式种(图2C2D)相比较,前翅前缘橙黄长条斑仅端部宽窄稍有差异,前翅反面M1、M2斑基本一致,而雌性根据Evans的描述[25]和黄斑银弄蝶一样,前翅前缘条缺如。另外通过检视15雄6雌标本,其中包括腾冲标本2头、昆明标本2头,发现不同分布地,甚至同一分布地的不同个体,雄性前翅前缘橙黄长条斑端部的宽窄有变异,M1、M2室斑的内缘成直线是不稳定的(图2E2F2G2I2J2L2M);雌性前缘条斑缺如(图2H2K2N);前翅端部R3-R5室和M1-M2室2个大斑通常雌性不相连(图2H2K2N),雄性有变异,有相连的、有稍微分离的,甚至有左右翅连接不一致的(图2E)。通过对斑纹有变异的外生殖器解剖发现,雄性外生殖器除分布于四川格西沟的抱器瓣腹端突稍钝外,腾冲、昆明及其他分布地的基本一致(图3C3D)。雌性外生殖器基本一致,前后阴片对称,前阴片上缘浅的小V型,后阴片稍弧形凹入(图3E3F),与袁峰等[35]所描述存在一定差异。系统发育树表明,昆明、腾冲及其他分布地的21个个体交织成高度支持的一支,且遗传距离为0~0.60%,其中,昆明与腾冲样本间遗传距离仅为0.15%;格西构分支与其余个体间遗传距离为0.60%,形态特征上,除了上述变异外中室基部有的个体可见小黄色斑纹(图2J2L2M),外生殖器无明显不同(图3C3D)。综合形态特征、分子系统发育分析、遗传距离及地理分布信息,我们认为黄斑银弄蝶C. alcinoidesLee, 1962是醒斑银弄蝶C. alcinaEvans, 1939的新异名(syn. nov.)。

    银弄蝶属已知19种20余亚种,本文仅包括醒斑银弄蝶C. alcina及其近似种且无涉及亚种的材料,因此该属的单系性仍需增加物种数和分子数据进一步确认。

    根据翅面斑纹,以前的研究认为醒斑银弄蝶C. alcina与银弄蝶C. palaemon、黄翅银弄蝶C. silvicola、愈斑银弄蝶C. houangty、射线银弄蝶C. abax(2亚种:指名亚种与银线亚种C. abax patra)、美丽银弄蝶C. pulchra相似,其中与射线银弄蝶C. abax的关系最近[12, 25]。Sugiyama[36]将银线亚种提升为种级分类单元,即银线银弄蝶C. patra。本研究结果支持该亚种的提升,同时显示银弄蝶C. palaemon、黄翅银弄蝶C. silvicola、长斑银弄蝶C. longimaculatussp. nov.与醒斑银弄蝶C. alcina为高度支持的单系群,且后翅具大而醒目的淡黄斑,M1、M2室斑与Sc+R1中部斑远离是其共同特征。基于基因组的研究也发现银弄蝶C. palaemon、黄翅银弄蝶C. silvicola和醒斑银弄蝶C. alcina 成单系[10]。遗传距离分析显示文中银弄蝶种间的平均遗传距离为1.2%~10%,长斑银弄蝶C. longimaculatussp. nov.与其他种的平均遗传距离为3.9%~10%,其中与醒斑银弄蝶的遗传距离为3.9%。系统发育树中长斑银弄蝶C. longimaculatussp. nov.独立成支,尽管支持值不高,但2种方法均显示其在已知种中与醒斑银弄蝶的关系更近。黄翅银弄蝶C.silvicola与银弄蝶C. palaemon在系统发育树上聚为一支,其平均遗传距离为1.2%,但产自日本的银弄蝶C. palaemon并没有与欧洲的聚在一起,其是亚种还是种?银弄蝶C. palaemon已知有近10余亚种。Cong等[10]基于基因组数据认为C. palaemon mandan为独立种。因此这2个种及种下问题的澄清需要更广泛的取材进行进一步深入研究。

    致谢:衷心感谢标本采集及提供者:李鹏、张珑,云南省农业科学院何成兴研究员,华南农业大学黄珍富、纪树钦、汤静、魏福宏、韩雨珂、缪志鹏、莫世芳、曹成龙和谭舜云。感谢华南农业大学洞穴生物实验室提供Keyence VHX-5000超景深三维显微系统以完成外生殖器拍照。感谢伦敦英国自然历史博物馆Blanca Huertas博士,中国科学院动物研究所的武春生研究员与姜楠博士在模式标本检视过程中给予的热情帮助与大力支持。

  • 图  1   铁和锌元素的标准曲线

    Figure  1.   Standard curves of Fe and Zn elements

    图  2   2019—2020年163份大豆种质籽粒铁、锌含量频率分布直方图

    Figure  2.   Histogram of frequency distribution of grain Fe and Zn contents of 163 soybean accessions in 2019 and 2020

    图  3   2019—2020年163份大豆种质籽粒铁、锌含量相关性分析

    “×”表示相关性不显著

    Figure  3.   Correlation analyses of grain Fe and Zn contents of 163 soybean accessions in 2019 and 2020

    “×” indicate no significance correlation

    表  1   163份大豆种质的编号与名称

    Table  1   Number and name of 163 soybean accessions

    编号
    No.
    名称
    Name
    编号
    No.
    名称
    Name
    编号
    No.
    名称
    Name
    编号
    No.
    名称
    Name
    编号
    No.
    名称
    Name
    1 BX1 34 泉豆27 67 HX13 100 华春2号 133 耐荫黑豆
    2 BX2 35 泉豆5号 68 HX14 101 HX3 134 新晃黑豆
    3 BX3 36 圣豆40 69 HX16 102 2015-XT-23 135 永顺黑豆
    4 BX4 37 M6-497 70 HX17 103 2015XT-35 136 徐豆20
    5 BX5 38 M桂2-599 71 HX18 104 瓦窑黄豆 137 南农99-6
    6 BX6 39 Y15 72 HX20 105 桂早1号 138 赣2016-7
    7 BX7 40 Y16 73 HX21 106 桂0112-3 139 赣豆10
    8 BX8 41 Y1697 74 HX22 107 桂0114-4 140 赣豆5
    9 BX9 42 Y1800 75 HX23 108 桂0513-3 141 赣豆7
    10 BX10 43 Y19 76 HX24 109 桂1605 142 S2
    11 BX11 44 Y3 77 HX25 110 桂1701 143 S20
    12 BX12 45 Y4 78 粤春2013-1 111 桂1702 144 Young
    13 BX14 46 Y5 79 粤春2014-2 112 桂1703 145 S427/5/7
    14 BX15 47 Y6 80 粤春2015-2 113 桂春16号 146 S519/6/14
    15 BX16 48 本地2号 81 粤春2017-1 114 桂春1805 147 SOMA
    16 BX17 49 华春1号 82 粤夏05-3 115 桂春1号 148 TGX1803-20E
    17 BX18 50 华春3号 83 粤夏05-5 116 桂春5 149 TGX1903-3F
    18 ICA-6-2 51 华春5 84 粤夏2012-1 117 桂春豆1号 150 TGX1908-89
    19 BX13 52 华春6号 85 粤夏2013-1 118 桂夏1801 151 OPE-Para4
    20 中黄24 53 华春7号 86 粤夏2013-2 119 桂夏1802 152 TGX48-30-20F
    21 福豆12 54 华春8号 87 粤夏2013-4 120 桂夏7号 153 简阳五月黄
    22 福豆15 55 华春10号 88 粤夏2014-3 121 桂夏豆109 154 贡秋豆5号
    23 福豆234 56 华春11号 89 粤夏2014-6 122 桂夏豆116 155 贡夏6973
    24 福豆310 57 华春12号 90 粤夏2016-1 123 桂夏豆117 156 贡夏7103
    25 莆豆019 58 粤春2016-1 91 粤夏2016-2 124 桂夏豆118 157 贡夏8173
    26 莆豆014 59 粤春2016-2 92 粤夏2016-4 125 桂夏豆119 158 贡选1号
    27 莆豆041 60 HX1 93 粤夏2017-1 126 桂夏豆2号 159 滇86-5
    28 莆豆5号 61 HX2 94 粤夏2017-2 127 黔豆6号 160 滇豆4号
    29 莆豆611 62 HX4 95 粤夏2017-3 128 冀豆12 161 滇豆7号
    30 莆豆704 63 HX5 96 粤夏2018-1 129 冀豆17 162 浙春3号
    31 莆豆8008 64 HX6 97 粤夏2018-2 130 天隆1号 163 浙春4号
    32 泉豆24 65 HX9 98 粤小黄粒1 131 中豆32
    33 泉豆26 66 HX10 99 粤小黄粒3 132 中豆41
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    表  2   仪器工作条件

    Table  2   Working conditions of instrument

    元素
    Element
    λ/nm
    Wave length
    I/mA
    Lamp current
    狭缝宽度/nm
    Slit width
    燃头高度/mm
    Burner height
    点灯方式
    Lighting method
    燃气流量/(L·min−1)
    Gas flow
    助燃气
    Supporting gas
    Fe248.3120.29.0BGC-D22.2空气
    Zn213.980.77.0BGC-D22.0空气
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    表  3   不同年份163份大豆种质籽粒铁、锌含量的描述性统计

    Table  3   Descriptive statistical of grain Fe and Zn content in 163 soybean accessions in two years

    元素
    Element
    年份
    Year
    w/(mg·kg−1)变异系数/%
    Coefficient
    of variation
    K-S检验 K-S testF1)
    最小值
    Minimum
    最大值
    Maximum
    平均值
    Mean
    标准差
    Standard
    deviation
    偏度
    Skewness
    峰度
    Kurtosis
    Sig.值
    Sig. value
    Fe201971.02147.9197.1716.0216.491.010.630.0012.09**
    202090.19159.92117.0213.0011.110.580.440.207.58**
    平均 Mean84.14144.86107.0911.2210.480.650.510.202.02**
    Zn201934.6253.1142.413.488.210.11−0.100.2030.62**
    202036.3251.4743.413.067.050.03−0.420.201.31*
    平均 Mean37.0349.5142.802.456.430.00−0.660.203.71**
     1) “*”和“**”分别表示数据在0.05和0.01水平上差异显著
     1) “*” and “**” indicate there were significant difference at 0.05 and 0.01 levels, respectively
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    表  4   163份大豆种质籽粒铁、锌含量概率分级1)

    Table  4   Probability classification of grain Fe and Zn contents of 163 soybean accessions w/(mg·kg−1)

    元素
    Element
    年份
    Year
    1/极低
    1/Very low
    2/低
    2/Low
    3/中级
    3/Middle
    4/高
    4/High
    5/极高
    5/Very high
    Fe2019< 76.64(7)76.64 ~ 88.77(50)88.77 ~ 105.57(66)105.57 ~ 117.70(16)> 117.70(22)
    2020< 100.36(15)100.36 ~ 110.20(31)110.2 ~ 123.84(19)123.84 ~ 133.68(25)> 133.68(16)
    平均 Mean< 92.71(14)92.71 ~ 101.20(40)101.2 ~ 112.98(64)112.98 ~ 121.47(32)> 121.47(13)
    Zn2019< 37.95(17)37.95 ~ 40.58(31)40.58 ~ 44.24(60)44.24 ~ 46.87(40)> 46.87(14)
    2020< 39.49(16)39.49 ~ 41.8(29)41.8 ~ 45.02(58)45.02 ~ 47.33(36)> 47.33(16)
    平均 Mean< 39.28(21)39.28 ~ 41.36(29)41.36 ~ 44.24(57)44.24 ~ 46.32(38)> 46.32(18)
     1) 括号中数据为相应概率等级的种质数量
     1) Data in brackets represent the number of the soybean accessions in the corresponding probability classification
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    表  5   大豆种质籽粒铁、锌含量突出表现材料概要1)

    Table  5   Summary of soybean accessions with prominent grain Fe and Zn contents

    类型
    Type
    Fe含量突出 Outstanding Fe contentZn含量突出 Outstanding Zn content
    名称 Namew(Fe)/(mg·kg−1)名称 Namew(Zn)/(mg·kg−1)
    高含量
    High content
    粤夏2018-2 144.86±23.10 桂夏豆116 49.51±1.64
    BX17 140.13±8.35 桂夏豆109 48.92±2.43
    TGX1803-20E 131.44±7.05 贡夏6973 47.85±4.40
    华夏24 130.76±9.50 赣豆7 47.74±2.19
    圣豆40 130.08±4.14 粤春2017-1 47.56±2.00
    桂夏豆117 47.11±1.62
    桂夏7号 47.10±0.70
    OPE-Para4 46.96±1.65
    双高含量
    Double high content
    桂1701 136.30±13.67 桂1701 47.58±3.16
    桂夏豆109 127.33±6.02 桂夏豆109 48.92±2.43
    低含量
    Low content
    粤春2015-2 84.14±12.12 S519/6/14 37.03±1.94
    TGX1908-89 84.38±6.96 中豆41 37.28±2.11
    S20 87.12±12.10 桂春5 37.47±2.55
    莆豆5号 88.77±10.81 Y4 37.62±2.43
    粤夏2017-2 90.63±5.63 Y6 37.83±2.89
    桂春1号 37.89±2.11
    双低含量
    Double low content
    S20 87.12±12.10 S20 39.12±2.20
    瓦窑黄豆 90.91±14.39 瓦窑黄豆 38.44±5.49
    Y6 91.40±10.44 Y6 37.83±2.89
    BX5 91.62±15.66 BX5 38.97±0.96
     1) 表中数据为3次重复的平均值±标准差
     1) The data in the table show the mean ± standard deviation of three replicates
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图(3)  /  表(5)
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出版历程
  • 收稿日期:  2022-11-01
  • 网络出版日期:  2023-11-12
  • 发布日期:  2023-06-12
  • 刊出日期:  2023-09-09

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