巴戟天Morinda officinalis为茜草科巴戟天属植物，是我国著名“四大南药”之一，以根入药，性微温，味甘、辛，具有祛风湿、补肝肾、强筋骨功效，可用于治疗风湿痹痛、阳痿遗精、月经不调、筋骨痿软等^[1]。巴戟天寡糖含量在药用成分总量中比例较高^[2]，是主要的活性成分，具有抗抑郁、抗衰老、抗肿瘤、抗氧化、提高机体免疫力和改善生殖功能等药理作用^[3-5]。

施肥是药用植物增产的主要管理措施之一，肥料的施用会显著影响中草药的生长及有效成分的积累^[6]。药用植物有效成分的形成以及含量变化是一个复杂的动态过程，与土壤肥力、生长环境以及植物生长年限等均有紧密的联系。合理施肥能提高药用植物产量，同样会影响药用植物品质。有研究发现氮(N)、磷(P)、钾(K)肥合理配施有利于提高药用植物有效成分含量^[7]，但也有研究发现，施肥后会降低药材有效成分含量^[8-9]。施肥对巴戟天生长与寡糖积累的影响尚不清楚，因此，施肥如何影响巴戟天的药用成分，有待深入研究。

目前对巴戟天的研究多侧重于药理作用^[10-11]、加工方法^[12]、种植产地^[13]、种植年限^[14-15]、种植方式^[16-17]等方面，对巴戟天需肥规律和养分吸收特性等方面的研究较少，现在亟需加强复合肥对巴戟天生长及其对药材产量、品质影响的研究。为此，本研究通过盆栽试验，研究复合肥不同施用量对巴戟天产量、养分吸收和寡糖累积的影响，探讨施肥量对巴戟天生长品质的作用规律，为巴戟天的规范化种植提供理论依据，促进产业发展。

1.   材料与方法

1.1   试验材料

试验土壤采自广东省德庆县(N23°25′97″，E111°89′70″)，取表层0~20 cm的土壤，自然风干后碾碎过孔径3 mm筛网备用。供试土壤基本性质：全氮0.80 g·kg⁻¹、碱解氮72.96 mg·kg⁻¹、全磷0.17 g·kg⁻¹、速效磷17.95 mg·kg⁻¹、全钾17.82 g·kg⁻¹、速效钾132.97 mg·kg⁻¹、有机质13.57 g·kg⁻¹、pH 5.0。

供试植物为长势基本一致的1年生巴戟天扦插苗，采购于广东省德庆县德鑫农业有限公司，平均株高10.52 cm，地径2.76 mm。肥料为雅苒大田复合肥，N、P₂O_5、K₂O的质量分数均为15%，塑料盆的规格为21.5 cm×23.0 cm(口径×高)。

1.2   试验设计

试验在华南农业大学林学与风景园林学院温室大棚进行，每盆添加土壤的干质量为4 kg。试验设置6个处理，每个处理施用肥料的总量分别为0、2、4、6、8和10 g，每盆N、P₂O₅、K₂O对应的总施用量分别为0、0.3、0.6、0.9、1.2和1.5 g，分别记作CK、T1、T2、T3、T4和T5，每个处理重复5次(每盆为1次重复，每盆种植1株巴戟天)。盆栽随机摆放，每隔1个月移动1次，施肥分作2次等量进行，距第1次施肥4个月后进行第2次追肥，试验周期为9个月。水分管理视天气情况与盆栽土壤的干湿情况进行，每隔1~3 d定量浇水，及时清除杂草。

1.3   样品采集与分析

种植9个月后，采用游标卡尺测量巴戟天的地径，随后全株采收，将收获的巴戟天植株清洗干净后晾干，将植株分为地上部和根部，置于烘箱中恒温105 ℃杀青30 min，然后调至75 ℃烘干至恒质量，并称量干质量。

巴戟天各部位样品经浓硫酸−过氧化氢消煮后获得待测液，N、P、K含量分别用奈氏比色法、钼锑抗比色法、火焰分光光度计法测定。巴戟天肉质根寡糖含量采用高效液相色谱−蒸发光散射法测定^[13]。

1.4   数据分析

所有试验数据利用Microsoft Excel 2016进行整理分析，试验中每个处理共5次重复，取其中3次各项指标的数据进行分析，运用SPSS 22.0对土壤理化性质和供试植物的生长指标进行单因素方差分析(One-way ANOVA)、Duncan’s(α=0.05)多重比较和主成分分析，图表中数据均为平均值±标准误(n=3)。采用Origin 2021软件绘图。

采用以下公式计算养分(N/P/K)积累与肥料利用效率等指标：

2.   结果与分析

2.1   复合肥不同施用量对巴戟天生长的影响

由表1可知，与CK相比，施用复合肥在不同程度上促进了巴戟天地径的生长，但各处理间的差异均未达到显著水平；不同施肥处理均能显著提高巴戟天的总生物量(P < 0.05)，且随着施肥量的增加，巴戟天总生物量呈现先增加后下降的变化趋势；除T1处理外，其余施肥处理均显著提高巴戟天根部产量(P < 0.05)，并且与总生物量的变化规律一致。与CK相比，T1~T5处理巴戟天总生物量增加了30.72%~128.10%，根部产量增加了17.11%~114.47%，均在T3处理达到最大值，显著高于其他处理(P < 0.05)，分别为13.96和1.63 g。

表  1  复合肥不同施用量对巴戟天生长指标的影响¹⁾

Table  1.  Effects of different application amounts of compound fertilizer on growth indexes of Morinda officinalis

处理 Treatment	地径/mm Ground diameter	总生物量/g Total biomass	根部产量/g Root yield
CK	5.19±0.35a	6.12±0.31d	0.76±0.04c
T1	5.25±0.14a	8.00±0.14c	0.89±0.05c
T2	6.32±0.54a	9.65±0.61bc	1.11±0.08b
T3	6.07±0.31a	13.96±0.78a	1.63±0.04a
T4	6.22±0.44a	10.88±0.24b	1.22±0.08b
T5	5.72±0.25a	10.40±0.82b	1.26±0.05b
1)同列数据后的不同小写字母表示处理间差异显著(P<0.05，Duncan’s法) 　1) Different lowercase letters in the same column indicate significant differences among different treatments (P<0.05, Duncan’s method)

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2.2   复合肥不同施用量对巴戟天养分吸收的影响

如图1所示，巴戟天在施肥条件(T1~T5)下的地上部和根部N、P、K含量均高于CK的，但不同施肥量之间存在差异。其中，巴戟天地上部N、P、K含量大体呈现随施肥量增加而升高的趋势，T5处理的N、K含量最高，T4处理的P含量最高，均显著高于CK、T1和T2处理的，相较于CK增幅达31.66%~101.83%。巴戟天根部N、P、K含量随施肥量的增加呈现先增后降的趋势，最高值均在T3处理，分别为30.38、3.90和10.82 mg·g⁻¹，是CK的0.52~1.62倍。

图  1  复合肥不同施用量对巴戟天不同部位N、P、K含量的影响

各小图中，相同部位柱子上方的不同小写字母表示处理间差异显著(P<0.05，Duncan’s法)

Figure  1.  Effects of different application amounts of compound fertilizer on contents of N, P and K in different parts of Morinda officinalis

In each figure, different lowercase letters on the columns of the same part indicate significant differences among different treatments (P<0.05, Duncan’s method)

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不同处理对巴戟天各部位N、P、K累积量的影响如图2所示。各处理地上部N、P、K累积量均大于根部的，CK各部位的N、P、K积累量均最低。巴戟天不同部位N、P、K累积量均随施肥量增加先增后降，在T3处理达到最大值，各部位N、P、K累积量均显著高于其他处理(P < 0.05)(T4处理的全株和地上部P累积量除外)，全株N、P、K累积量分别是CK的4.18、3.23、2.97倍。

图  2  复合肥不同施用量对巴戟天各部位N、P、K单株累积量的影响

各小图中，不同小写字母表示处理间地上部、根部养分累积量差异显著，不同大写字母表示处理间全株养分累积量差异显著(P<0.05，Duncan’s法)

Figure  2.  Effects of different application amounts of compound fertilizer on the accumulation of N, P and K per plant in different parts of Morinda officinalis

In each figure, different lowercase letters on the columns indicate significant differences in aboveground and root nutrient accumulation among treatments, different capital letters indicate significant differences in whole plant nutrient accumulation among treatments (P < 0.05, Duncan’s method)

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2.3   复合肥不同施用量的肥料利用效率

如表2所示，不同施肥处理中巴戟天对肥料中N、P、K等养分元素的利用效率有显著差异，均表现为N > K > P。随着肥料施用量的增加，N、P、K利用效率均呈先增后降趋势，T3处理对N、P和K的利用效率均达最高，分别为41.35%、3.23%和16.62%。各处理中巴戟天对肥料中N、P、K等养分元素的利用效率均表现为T3 > T1 > T2 > T4 > T5，其中T3和T1处理N和P利用效率显著高于其他处理，T3处理K利用效率均显著高于其他处理的(P < 0.05)。

表  2  复合肥不同施用量的肥料利用效率¹⁾

Table  2.  Fertilizer utilization efficiency of different application amounts of compound fertilizer %

处理 Treatment	N	P	K
T1	36.97±1.37a	2.69±0.31ab	9.16±0.53b
T2	27.14±4.41b	2.31±0.07b	8.04±2.05b
T3	41.35±2.37a	3.23±0.20a	16.62±2.63a
T4	20.97±1.29bc	2.11±0.17b	7.27±1.00b
T5	18.38±1.20c	1.18±0.10c	6.11±0.56b
1)同列数据后的不同小写字母表示处理间差异显著(P<0.05，Duncan’s法) 　1) Different lowercase letters in the same column indicate significant differences among treatments (P<0.05, Duncan’s method)

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2.4   复合肥不同施用量对巴戟天有效成分寡糖的影响

如图3所示，巴戟天的4种寡糖含量均随施肥量增加呈现先降后增的趋势。所有施肥处理的4种寡糖含量均低于CK，降幅最大达35.65%。其中，1−蔗果三糖含量在T1处理最低，其他寡糖含量均在T3处理最低，相较于CK降幅达8.56%~35.65%。各处理中蔗糖和1−蔗果三糖含量无显著差异，T3处理的耐斯糖和1^F−果呋喃糖基耐斯糖含量低于其余处理。

图  3  复合肥不同施用量对巴戟天4种寡糖含量的影响

相同寡糖柱子上方的不同小写字母表示处理间差异显著(P<0.05，Duncan’s法)

Figure  3.  Effects of different application amounts of compound fertilizer on contents of four oligosaccharides in Morinda officinalis

Different lowercase letters on the columns of the same oligosaccharide indicate significant differences among treatments (P<0.05, Duncan’s method)

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不同处理对巴戟天4种寡糖累积量的影响如图4所示，施肥处理寡糖累积量高于CK，同一处理中蔗糖累积量高于其他3种寡糖。巴戟天蔗糖、1−蔗果三糖、耐斯糖和寡糖总累积量均随复合肥施用量增加呈先增后降的趋势，最高值均在T3处理，单株累积量分别为81.58、59.23、38.22和217.08 mg，相较于CK，增幅达28.41%~95.98%。除T4处理的1^F−果呋喃糖基耐斯糖外，T2~T5处理4种寡糖的累积量均显著高于CK和T1处理的(P < 0.05)。施肥处理间，T3处理的巴戟天蔗糖、1−蔗果三糖和寡糖总累积量均显著高于其他处理的，耐斯糖累积量显著高于T1和T2处理的(P < 0.05)。

图  4  复合肥不同施用量对巴戟天4种寡糖单株累积量的影响

相同寡糖柱子上方的不同小写字母表示处理间差异显著(P<0.05，Duncan’s法)

Figure  4.  Effects of different application amounts of compound fertilizer on accumulation of four oligosaccharides in Morinda officinalis

Different lowercase letters on the columns of the same oligosaccharide indicate significant differences among treatments (P<0.05, Duncan’s method)

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2.5   相关性分析

巴戟天产量、养分和寡糖的相关性如图5所示。巴戟天总生物量、产量与全株的N/K含量、4种寡糖累积量均呈极显著正相关(P<0.01)，与全株P含量显著正相关(P<0.05)，而与耐斯糖、1^F−果呋喃糖基耐斯糖含量呈极显著负相关。巴戟天全株N含量与P/K含量、4种寡糖累积量呈极显著正相关，但与耐斯糖、1^F−果呋喃糖基耐斯糖含量呈极显著负相关；全株P含量与4种寡糖含量呈负相关，其中与耐斯糖和1^F−果呋喃糖基耐斯糖含量有显著负相关关系；全株K含量与耐斯糖、1^F−果呋喃糖基耐斯糖含量呈极显著、显著负相关。

图  5  巴戟天不同指标的相关性分析

“*”和“**”分别表示在P<0.05和P<0.01水平显著相关(Pearson法)

Figure  5.  Correlation analyses of different indicators for Morinda officinalis

“*” and “**” indicate significant correlations at P < 0.05 and P < 0.01 levels, respectively (Pearson method)

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巴戟天4种寡糖累积量与产量、总生物量的正相关性最大，其次为全株N、K、P含量。4种寡糖累积量与寡糖含量的相关性多数为负相关，其中除1^F−果呋喃糖基耐斯糖累积量与1^F−果呋喃糖基耐斯糖含量的相关性外，耐斯糖、1^F−果呋喃糖基耐斯糖含量与4种寡糖累积量有显著或极显著负相关关系。

2.6   综合评价

选取巴戟天总生物量、产量、全株N/P/K含量、4种寡糖累积量等9个指标进行主成分分析，综合评价不同施肥量对巴戟天的效果。KMO值为0.822(>0.6)，Bartlett球形检验的显著性系数为0.000(<0.05)，说明数据适合进行主成分分析。结果(表3)表明，前两个主成分的特征值大于1且各指标的累积贡献率达85.994%，说明已包含巴戟天各指标的大部分信息。其中，第一主成分的贡献率达74.246%，第二主成分仅占11.748%，特征值分别为6.682和1.057；所有指标均对第一主成分起主要贡献，而对第二主成分起主要贡献的有全株P含量和1^F−果呋喃糖基耐斯糖累积量(载荷系数绝对值大于0.4时，说明该项指标对相应主成分贡献较大)，因此第一主成分起主导作用。将载荷系数除以对应特征根的算术平方根得到线性组合系数，各主成分的线性函数表达式为：

表  3  主成分分析的载荷系数

Table  3.  Loading coefficients for principal component analysis

评价指标 Evaluation index	第一主成分 The first principal component	第二主成分 The second principal component
总生物量 Total biomass	0.952	−0.083
产量 Yield	0.959	−0.154
全株N含量 Whole plant N content	0.843	0.353
全株P含量 Whole plant P content	0.708	0.475
全株K含量 Whole plant K content	0.961	−0.141
蔗糖积累量 Sucrose accumulation	0.946	−0.189
1−蔗果三糖积累量 1-Kestose accumulation	0.935	−0.232
耐斯糖积累量 Nystose accumulation	0.755	−0.372
1F−果呋喃糖基耐斯糖累积量 1F-Fructofuranosyl nystose accumulation	0.618	0.655
特征值 Eigenvalue	6.682	1.057
方差贡献率/% Contribution of variance	74.246	11.748
累计贡献率/% Cumulative contribution rate	74.246	85.994

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式中，F₁：第一主成分得分，F₂：第二主成分得分；X₁：总生物量，X₂：产量，X₃：全株N含量，X₄：全株P含量，X₅：全株K含量，X₆：蔗糖累积量，X₇：1−蔗果三糖累积量，X₈：耐斯糖累积量，X₉：1^F−果呋喃糖基耐斯糖累积量。

将标准化处理的各指标数据代入公式(4)(5)，得出各主成分得分，再计算各处理的综合得分(F)。

由图6和表4得出不同处理的主成分得分排序为T3>T5>T4>T2>T1>CK，其中T3和T5处理均在第一主成分的正方向上，且T3处理分值最大。施用复合肥处理(T1~T5)主成分得分均大于CK，表明施肥促进巴戟天生长和寡糖累积。

图  6  复合肥不同施用量的主成分分析

PC1：第一主成分，PC2：第二主成分

Figure  6.  Principal component analyses of different application amounts of compound fertilizer

PC1: The first principal component, PC2: The second principal component

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表  4  复合肥不同施用量的主成分分析综合得分

Table  4.  Comprehensive score of principal component analysis of different application amounts of compound fertilizer

处理 Treatment	主成分分值 Principal component value		综合得分(F) Comprehensive score	排序 Ranking
	F1	F2
CK	−3.92	−0.49	−2.96	6
T1	−2.28	0.27	−1.66	5
T2	−0.01	−0.86	−0.11	4
T3	3.48	−0.52	2.53	1
T4	1.07	1.17	0.93	3
T5	1.65	0.42	1.27	2

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3.   讨论

3.1   施用复合肥对巴戟天产量的影响

施用复合肥可以提高土壤肥力，为植物提供生长所需的营养元素^[18]，是提高药用植物产量的重要措施。中药材人工种植的研究发现，施肥能够提高川明参Chuanminshen violaceum^[19]、川芎Ligusticum chuanxiong^[20]、丹参Salvia miltiorrhiza^[21]等多种中药材的产量。本研究同样发现，合理的施肥可以促进巴戟天生长，提高药材产量，但过量施肥在一定程度上会降低药材产量。范巧佳等^[22]对川芎施用不同水平N肥发现，与中水平N肥(31.8 kg·hm⁻²)相比，高水平N肥(54.3 kg·hm⁻²)降低川芎产量；贾袭伟等^[23]对款冬Tussilago farfara施肥后发现，地上部和根部干质量均随施肥量增加呈先增加后减少的趋势，与本试验结果一致。

3.2   施用复合肥对巴戟天养分元素吸收的影响

N、P、K是药用植物生长发育所需的重要元素，科学合理的施肥有利于提高药用植物的产量和品质。本研究发现，施复合肥可以促进巴戟天对N、P、K等养分的吸收，但随着施肥量的增加，巴戟天对N、P、K等养分的累积量均呈现先快速增加后缓慢下降的趋势，说明适量施肥能促进巴戟天对养分的吸收，过量施肥则会降低养分累积量。肥料利用率是衡量施肥是否合理的一项重要指标，通过提高肥料利用率可提高施肥的经济效益、降低肥料投入并减少对环境的污染^[24]。本研究发现，巴戟天对复合肥的肥料利用率随施肥量的增加先呈上升趋势，并在T3处理达到最大，随后急速下降。虽然T4和T5处理巴戟天养分(N、P和K)含量和累积量均大于T1和T2处理，但从生态环境及经济方面考虑，T4、T5处理并非本研究的最佳施肥配方。

N是植物体内叶绿素、蛋白质和核酸等物质的重要组成部分，施N肥能明显提高植物光合速率，从而促进植物生长^[25]。本研究中巴戟天N、P、K元素累积量大小表现为N > K > P，表明巴戟天生长过程中对N肥需求量较大，其次是K肥，对P肥需求较少，此结论与潘超美等^[26]对巴戟天的研究结果基本一致，与漆小雪等^[27]对黄花蒿Artemisia annua N、P、K累积量的研究结果基本一致。因此，在生产管理上应根据土壤理化性质合理满足巴戟天对N肥的需求，合理补充K肥和P肥。

3.3   施用复合肥对巴戟天寡糖的影响

在巴戟天栽培研究中，施肥对巴戟天寡糖影响的研究鲜见报道。本研究发现，随着施肥量的增加，巴戟天4种寡糖含量均呈先降后增的趋势，与生物量的变化趋势相反，说明巴戟天在良好的生长条件(适量施肥)下，以生长发育为主，进而提高产量，但其药用成分含量有所降低，而在不施肥条件下生长较慢，产量降低，但其药用成分含量上升。巴戟天不施肥处理下4种寡糖含量均高于施肥处理，其中耐斯糖和1^F−果呋喃糖基耐斯糖含量差异达到显著水平，说明巴戟天的高产量与高品质往往不能同时实现，符合植物次生代谢物合成机制中的生长/分化平衡假说、碳素/营养平衡假说和资源获得假说^[28]。

大量研究表明，合理施肥可以提高药用植物的产量并促进药用植物有效成分的累积^{[7, 19, 29-30]}。本研究发现，相比于不施肥处理，虽然施肥处理巴戟天寡糖含量降低，但是寡糖累积量显著提高。寡糖累积量随复合肥施用量增加呈先增后降的趋势，除1^F−果呋喃糖基耐斯糖外，其他3种寡糖累积量最高值均在T3处理(单株总施肥量为6 g)，表明合理施肥可以增加巴戟天寡糖累积量。

施肥对药用植物产量与有效成分含量影响的研究发现，提高产量的同时会降低其有效成分含量^{[8-9, 31]}，与本试验结果相似。平衡产量与有效成分含量是药用植物人工种植的关键。在巴戟天制药应用当中，有效成分寡糖的提取量由累积量决定^[32]，所以提高巴戟天的寡糖累积量才是关键，本研究表明，适量施肥可显著提高巴戟天寡糖的累积量，进而增加单位面积巴戟天的生产效益。

3.4   施用复合肥对巴戟天不同指标相关性的影响

巴戟天的产量、养分含量和寡糖含量间存在相关性。巴戟天N、P和K元素含量间呈显著正相关，3种养分元素共同促进植物生长^[33]。本试验中巴戟天耐斯糖和1^F−果呋喃糖基耐斯糖含量与产量、养分(N/P/K)含量呈显著或极显著负相关，蔗糖、1−蔗果三糖含量与产量、N/P含量呈负相关但未达到显著水平，巴戟天生长越快，吸收养分越多，其寡糖含量会相对降低；可能是由于施用复合肥能够提高土壤肥力，促进巴戟天的生长和养分吸收，但是寡糖的合成速率未跟上巴戟天生长速度，从而导致寡糖含量降低。

尽管巴戟天4种寡糖含量与总生物量、产量为负相关(−0.879~−0.095)，但巴戟天4种寡糖累积量与产量的相关性最高(0.695~0.955)，且大于4种寡糖累积量与其含量的相关性(−0.803~0.238)，说明寡糖累积量的主要影响因子是巴戟天产量而不是品质，与鲁泽刚等^[34]对灯盏花的研究结果相似。因此，在巴戟天栽培以及根部药用成分寡糖开发利用过程中，施肥管理的结果往往是增加根部药用成分产量，通过促进根部产量最大化而提高药用成分收获量，并非直接影响药用成分的含量。

4.   结论

施复合肥能不同程度地促进巴戟天对养分(N、P和K)的吸收，提高产量，促进有效成分寡糖的累积，养分及寡糖累积量随复合肥施用量增加呈先增后降的趋势，T3处理效果最佳。巴戟天对养分的需求表现为N > K > P，所以在巴戟天种植过程中应以N肥为主，适量补充K和P肥。巴戟天高产和优质不能兼得，寡糖累积量的主要影响因子是产量，巴戟天产量、养分元素含量与耐斯糖和1^F−果呋喃糖基耐斯糖含量呈显著负相关，虽然耐斯糖和1^F−果呋喃糖基耐斯糖含量均在T3处理最低，但其产量和寡糖累积量最高。因此，在现实生产中，通过施肥能够有效增加巴戟天根部药用成分产量，从而进一步提高单位面积巴戟天的生产效益。