Morphological characterization and genetic mapping of shrunken endosperm mutant sh2021 in maize
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摘要:目的
分析玉米籽粒皱缩突变体的表型特征并进行籽粒相关基因的精细定位，为揭示该基因调控玉米籽粒发育的分子机制奠定基础。
方法以玉米自交系‘B73’种植过程中籽粒自发突变个体为材料，命名为shank2021(sh2021)，对其形态学和细胞学特征进行观察；构建分离群体，通过混合群体分离分析法(Bulked segregant analysis，BSA)对基因进行初步定位，筛选交换单株进一步缩小定位区间，最后结合转录组测序及基因功能注释推测控制籽粒缺陷性状的候选基因。
结果与野生型相比，sh2021籽粒凹陷皱缩、颜色加深、籽粒排列不规则，且百粒质量降低。扫描电镜观察发现，与野生型相比，sh2021胚乳细胞和淀粉粒均显著变小，且淀粉粒大小不均匀。遗传分析结果表明，sh2021是由单个隐性基因突变所致。利用BSA分析方法将目的基因定位在3号染色体末端约13.25 Mb区域。进一步扩大分离群体筛选交换单株，将目的基因定位在标记ID5与ID9之间的529.60 kb范围。通过sh2021和野生型的转录组测序，结合基因功能注释结果，预测Zm00001d044119、Zm00001d044120、Zm00001d044122、Zm00001d044129、Zm00001d044142这5个基因可能是影响玉米籽粒发育的重要候选基因。
结论sh2021的发现与鉴定为进一步深入解析玉米籽粒发育的遗传机制提供了丰富的试验材料，同时也为后续相关基因的克隆和功能解析奠定了基础。
Abstract:ObjectiveTo analyze the phenotypic characteristic of maize shrunk endosperm mutant and fine mapping of related genes, and lay a foundation for further understanding molecular mechanism of maize kernel development.
MethodThe spontaneous shrunk endosperm mutant shank2021(sh2021) was isolated from maize inbred line B73. Morphological and cytological characteristics were observed. A segregating population was developed, and the bulked segregant analysis (BSA) was used for preliminary gene mapping. The recombinant plants were screened for further narrowing the mapping interval. Finally the candidate genes controlling grain defect traits were speculated by transcriptome sequencing combined with gene function annotation analysis.
ResultCompared with wild type, sh2021 displayed sunken and shrunken kernels, darker color, irregular grain arrangement, and lower 100-grain weight. The scanning electron microscope observation revealed that sh2021 had smaller endosperm cells and starch granules, and the starch granules were varied in size. The genetic analysis results indicated that sh2021 was caused by a single recessive gene mutation. The BSA indicated that the target gene was located on a 13.25 Mb fragment at the end of chromosome 3. By further expanding the segregating population and screening recombinant plants, the target gene was narrowed down to an interval of 529.60 kb between markers ID5 and ID9. Transcriptome sequencing and gene annotation of sh2021 and wild type indicated that Zm00001d044119, Zm00001d044120, Zm00001d044122, Zm00001d044129, and Zm00001d044142 mighted be candidate genes controlling maize kernel development.
ConclusionThe identification of sh2021 provides abundant experimental materials for the study of kernel development, and lays a foundation for further map-based cloning and functional analysis of sh2021.
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Keywords:
- Maize /
- Shrunken endosperm mutant /
- Genetic analysis /
- Fine mapping
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水稻直播栽培技术便于实现机械化，具有降低劳动强度，缓解农时，节本增效等优点[1-3]，随着人们对水稻直播理念的深入了解[4]，水稻直播机在各地得到广泛推广。但现有的机械式水稻直播机大多采用镇压轮传动播种，这种播种方式普遍存在一些不足：镇压轮易于裹草堵转，导致漏播；播量靠手动调节且控制精度低；无法实时依据机具车速变化自动调节播种量；自动化程度较低。目前国内外针对播种机播量调节已有一些相关研究，国外直播装备研究和运用起步较早，基本实现自动化、智能化作业[5]，如LEMKEN公司生产的Saphir系列播种机通过配备电脑控制终端Easytronic系统，可以预设播种量并对播种量、施肥量进行校对，可完成多种作物播种；日本矢崎公司生产了一种直接配套插秧机进行播种作业的SYG-8型水稻直播机，播种量、穴距可精准调节，但该机具作业效率较低，价格高昂，使其推广受到限制。国内现有水稻直播机的研究主要集中在机械结构的设计改进以及关键部件的参数优化[6-8]，未能从根本上解决镇压轮传动播种导致的漏播以及播种量无法同步均匀调节问题。
本文以现有苏南地区机械式水稻播种机为基础，设计了一种基于PID控制算法[9-11]的水稻直播机播量控制系统。该系统可以在线无极调节排种量，实现排种转速的闭环控制，达到同步播种目的，提高播量控制精度，为现有的水稻直播机播量自动化改造提供了一种可靠途径。
1. 同步排种系统设计
1.1 同步排种控制原理
播量控制系统工作原理如图1所示。播种作业时，通过电位器设定目标播量，结合安装在测速轮上的编码器采集实时机具车速以及排种转速，计算出排种目标转速；同时安装在排种轴上的编码器实时检测排种轴转速；决策系统将目标播量、机具车速、排种转速作为控制系统的输入量，得到当前排种器的转速控制量，然后通过PID调速算法使控制器输出相应PWM波[12-13]，再经过放大调理后，驱动排种电机在线调节排种转速，实现同步排种作业。
1.2 排种转速控制策略
$$ Q(t) = \frac{{0.06q(t){{n}}}}{{L v(t)}}, $$ (1) 式中, q(t)为单个排种器播种量，g/min；n为播种行数；L为排种通道所能覆盖的作业幅宽，m；v(t)为机具作业车速，km/h；0.06是各变量单位换算产生的系数；q(t)和排种电机转速(ɑ)的标定公式为：
$$ q(t) = ka + b, $$ (2) 式中, k和b是标定试验测定系数。根据目标播种量，排种电机转速和机具车速之间关系可以表示为：
$$ a = \frac{{Q(t) L v(t)}}{{1\,000k{{n}}}} - \frac{b}{k}{\text{。}} $$ (3) 根据公式(3)，机具车速发生变化时，控制器可以同步调整排种轴转速，确保实际单位面积排种量与目标播种量一致。
1.3 控制系统设计
1.3.1 机械结构
针对江苏丹阳欣田机械制造有限公司生产的2BFGK-12型播种机进行自动化改造，改造后的播种机结构简图如图2所示。自动化改进保留了机械式播种开沟、旋耕、播种、镇压等功能，重点改进了排种驱动方式，将链轮传动改为直流电机驱动，排种轴下方种箱内侧安装直流电机驱动，通过链轮驱动排种轴，播种行数为12行，机具宽度230 mm，取消地轮与排种轴连接的链式结构；设计增加了一种铁质测速轮，直径为400 mm，测速轮表面均匀布设15个防滑齿[16]，抓地性良好，且具有单铰链仿行机构，弹簧支杆上方每隔20 mm开调节孔位1个，共计10个，可以通过开口销调节弹簧压缩长度，减缓测速轮对地弹跳，提高测速准确度；弹簧压杆上方安装行程开关，抬起机具可断停排种电机，防止重播；通过轴套分别在排种轴和地轮安装2个编码器用于测量排种轴转速和机具车速；播量可按需无极调节，简化了播量调节方法，可实现同步播种。
1.3.2 控制系统结构
控制系统按照模块化设计思路，由速度采集、人机交互、执行机构、主控单元等主要模块组成，如图3所示。排种控制系统设计手动和自动2种模式：手动模式可转动旋钮调节播量；自动模式下，控制系统可依据设定机具前进速度与播种量的比例系数，在线调节排种转速。数码管采用三段式设计，分别显示机具车速、播量档位、排种转速。速度采集模块采用2个编码器测速，分别采集排种转速和机具车速，信号经过A/D转换发送主控器STC12C5A60S2单片机[17]。驱动电路采用拖拉机12 V电源供电，控制电路经L7805稳压芯片输出5 V供电，强弱电分离，提高电路板稳定性与可靠性，控制系统主控原理图如图4。
1.3.3 主要设计模块
1)测速模块：编码器是把角位移或直线位移等非电量信号转换为电量信号的装置[18]，安装于具有单铰链仿行机构的测速轮，实时检测机具行进速度，产生脉冲信号经过调理电路将脉冲信号放大并滤掉杂波，确保输出标准方波。选用欧姆龙增量式编码器E6B2-CWZ6C，旋转1周输出600脉冲数，该编码器具有构造简单、性能稳定，测量精度高等优点[19]。编码器采样频率为5 Hz，对每5个采样脉冲数据进行均值滤波，输出1 Hz速度控制信号，提高了测量速度的精度与稳定性。采用一个0.2 μF电容滤除采样信号过程中的杂波，并对LM358放大器进行保护。
试验中设计直径为400 mm的测速轮模拟拖拉机后轮，播种机测速轮的转速与脉冲频率的关系为：
$$ N = \frac{{60{{f_0}}}}{{ZM}}, $$ (4) 式中，Z表示编码器每转输出的脉冲个数；f0为准时钟的脉冲频率，Hz；M为编码器2个脉冲之间的时钟脉冲的个数。
2)直流电机驱动模块：直流电机工作时需要驱动12个排种槽轮，为了提高电路板驱动性能，设计了二极驱动电路单元，双NPN型三极管组合构成达林顿管，提升了SSF7509增强型MOS管[20]驱动电流，有效提高了驱动效率，最大漏极电流达60 A，漏源击穿电压为80 V，漏源导通电阻为6.5 mΩ。PWM信号经驱动模块调理运算控制排种电机，为提高驱动模块可靠性与稳定性，对MOS管电路铜箔表面走锡处理，形成3 mm的焊锡导线，增大有效走线截面，提高电路板载荷电流，驱动模块电路图如图5。
3)人机交互模块：人机交互模块由按键、播量旋钮和数码管组成。74HC595驱动3个2位1.42 cm的共阴极数码管[21]，将串行信号转为并行信号，分别显示拖拉机速度(km/h)、播量档位、排种轴转速(r/min)；电源芯片实现了DC12 V与DC5 V的电压转换，排种轴控制模式可手动自动切换，按键输出端与P0.5引脚相连，高电平为自动模式、低电平为手动模式，墒情较为严重时，可选用手动模式，确保播种效果，人机交互电路图如图6。
1.4 系统建模与PID参数确定
排种器转速控制本质是一个直流电机控制系统，测速轮转速作为系统输入量，输出量为排种槽轮转速。在忽略微小电感的情形下[22]，可将该排种器驱动电机看成经典的一阶系统，其传递函数是一个典型积分环节和惯性环节串联[23]：
$$ G(s) = \frac{{1/2\pi {C_{\rm e}}}}{{s\left(\displaystyle\frac{{{J_{\rm a}}{R_{\rm a}}}}{{{C_{\rm e}}{C_{\rm t}}}}s + 1\right)}}, $$ (5) 式中，G(s)是原函数经过拉普拉斯变换后的复函数表达式；Ce为电动势常数，由电动机结构参数确定；Jɑ为电动机转子转动惯量；Rɑ为电动机电阻；Ct为电磁力矩常数，由电动机结构参数确定；s为复频率。
选用邦瑞公司生产的5D90-12GU直流电机，电机参数为Ce=12.04, Jɑ=4×10–5 kg·m2, Rɑ=6Ω, Ct=0.115 N·m/A，代入式(5)得：
$$ G(s) = \frac{{8.69}}{{s(0.642s + 1)}}{\text{。}} $$ (6) 本研究选用PID控制器模型，被控对象由排种电机、电机驱动器、执行机构组成。PID控制系统输入信号Nin，Sin为经PID控制器输出的最佳转速控制量，Nout为排种轴的作业转速；控制器执行过程中，编码器实时监测测速轮和排种轴转速，并将转速信号输入到控制系统中，与最佳转速控制量形成偏差(e)，经PID调节器输出相应的控制量来调节排种转速，实现播量在线无极调节，达到控制目标。PID控制器与电机数学模型、负反馈控制量组成闭环控制系统，其传递函数近似于二阶惯性环节，通过与标准惯性环节比较取PID参数：kp=15.216 2，ki=0.319 3，kd=1.012 1，PID控制系统结构图如图7。
2. 结果与分析
2.1 空载变速响应测试效果
电机空载下，测试控制器变速调节电机转速响应变化效果，排种轴转速选取农户常用播种量对应的3个转速，分别为20、30和40 r/min，测试控制系统启动后的电机响应转速数据曲线如图8，性能参数如表1所示。结果表明：控制系统在目标转速40 r/min下超调量最大，不同转速下的调整峰值时间差距较小，整体调整时间低于0.63 s，响应及时。
表 1 空载响应试验数据Table 1. The experimental data of no-load response转速/(r·min–1)
Speed超调量/%
Overshoot峰值时间/s
Peak time调整时间/s
Adjusted time20 7.66 0.24 0.38 30 8.02 0.29 0.54 40 8.21 0.33 0.63 ![]()
图 8 不同目标转速下电机空载转速响应曲线Figure 8. The response curve of motor velocity without load under different target speeds2.2 带负载性能测试结果
传统播种机由于制造工艺和加工精度的差异，致使相同槽轮的排种轴阻力差距较大，对控制系统带负载能力要求较高。依据排种轴扭矩标准[24]，12行以下播种机扭矩不大于10 N·m，通过磁负载装置给电机施加7.5、10.0和12.5 N·m负载，测试控制系统带负载能力及负载变化的调节能力，记录排种电机实时转速值及驱动电路负载电流。变负载响应曲线如图9所示。施加负载7.5 N·m时，电机瞬时转速回落较小，转速回调时间短，随着负载增大，电机瞬时转速回落逐渐增大，调整时间延长，当负载12.5 N·m时，转速瞬间下降了23.5%，控制系统迅速响应，系统转速回调时间为0.32 s，最大负载电流为6.5 A，大负载作业条件下控制系统工作稳定，性能可靠，为控制系统适配不同播种机提供了理论依据，带负载性能测试如图10所示。
2.3 田间试验结果
排种转速控制精度对于播种效果起关键作用，为了综合测试播种机性能，开展了排种转速及播量控制精度田间试验(图11)。试验地点位于南京高淳禾田家庭农场，田间秸秆留茬高度18.5 cm，秸秆含水率(w)21.2%，秸秆切碎长度13.5 cm，秸秆量6 725.6 kg/hm2。土壤状况如表2所示，试验品种为‘南粳46’。设计机具车速和目标播量两因素三水平试验，依据苏南地区农户实际播种要求，选取试验机具车速为0.8、1.2和1.6 m/s，目标播量为7.50、11.25和15.00 g/m2。水稻直播机有效播种幅宽2.3 m，由久保田754拖拉机牵引，播种作业距离140 m(田块长约70 m)视为1次试验，记录排种轴实时转速、机具车速、实际播量，每个目标播量重复2次试验，取平均值为最终数据，结果见表3。表3的结果表明，3种目标播量下的转速最大误差分别为6.73%、6.59%和7.21%，转速误差平均值分别为4.67%、4.92%和5.31%，对比传统播种机最大控制误差24.54%和平均控制误差17.08%[23]，本系统控制精度显著提高；目标播量15.00 g/m2时，机具车速提升后转速误差平均值降低较为明显且播量误差显著降低，说明本控制系统在较高车速和较高目标播量下，控制效果更好；播种机整机转速控制精准，能满足实际需求，在不同的测试条件下，播量控制系统性能稳定。
表 2 田间土壤状况Table 2. Soil condition in field土壤深度/cm
Soil depth容重/(g·cm−1)
Density含水率(w)/%
Water content坚实度/MPa
Firmness0~5 1.32 23.41 0.43 5~10 1.45 20.26 0.86 10~15 1.53 18.96 1.23 表 3 不同目标播量下田间试验的控制精度Table 3. Control accuracy of speed and seeding amount in field under different target seeding amounts播量/(g·m−2)
Seeding amount机具车速/(m·s−1)
Vehicle speed转速最大误差/%
Max. speed error转速误差均值/%
Average speed error播量误差/%
Seeding amount error7.50 0.8 6.73 4.67 3.86 1.2 4.96 3.62 3.91 1.6 4.13 2.74 3.66 11.25 0.8 6.59 4.92 3.25 1.2 5.81 3.83 2.76 1.6 5.34 2.32 2.12 15.00 7.21 5.21 3.96 7.21 5.68 3.54 2.52 5.68 4.08 1.63 1.04 4.08 机具行驶作业速度变化时需要排种轴快速同步响应，为测试播量控制系统排种同步性，设计了田间阶梯车速播种试验。选取目标播量11.25 g/m2，测试机具行驶速度在0.8~1.6 m/s范围内阶梯变化，实时记录排种轴转速和车速，田间排种车速同步跟随效果如图12。图12的结果表明，田间播种车速变化时排种转速响应及时，具有较高的排种同步性，说明本研究设计改造的排种驱动机构和PID控制算法的引入措施起到了关键性的作用。
3. 结论
对传统水稻直播机进行自动化改造，重点改进了播量调节机构，并设计了配套的播量控制系统，简化播量调节方式。控制系统引入PID控制策略，并且建立了相应的传递函数，针对设计目标播量下的转速范围内，排种电机空载转速最大超调量为8.21%，转速调整最大时间为0.63 s，电机负载状况下最大回调时间为0.32 s，最大负载电流6.5 A, 控制系统响应迅速，满足实际播种需求。
田间试验转速最大误差为7.21%，最大转速误差均值5.31%，最大播量误差为3.96%，播种机整机转速控制精度较传统播种机显著提高，田间播种车速变化时排种转速响应及时，具有较高的排种稳定性和同步性，实现了同步播种作业，提高了传统播种机播种性能。
该控制系统自动化改造简便，对传统机械直播机具有较高适配性，为现有的机械式播种机低成本播量自动化改造提供了思路。
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图 1 sh2021突变体表型鉴定(F2分离群体)
A：完熟期玉米果穗；B：籽粒表型；C：籽粒百粒质量；“**”表示sh201与野生型在0.01水平差异显著(t检验)
Figure 1. Phenotypic identification of sh2021 mutants (F2 segregating population)
A: Mature ear; B: Grain phenotype; C: 100-kernel weight; “**” indicate significant difference between wild type and sh2021 at the 0.01 level (t test)
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图 2 WT(A)和sh2021(B)籽粒的石蜡切片图
Figure 2. Paraffin sections of mature WT (A) and sh2021 (B) grains
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图 3 野生型与sh2021籽粒扫描电镜观察
A、 B分别为WT、sh2021籽粒胚乳；C、D分别为WT、sh2021籽粒淀粉粒
Figure 3. Scanning electron microscope observation of WT and sh2021 grains
A and B are the endosperms of WT and sh2021 grains respectively; C and D are starch granules of WT and sh2021 grains respectively
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图 4 SNP-index的全基因组分布图
散点为原始值，黑色曲线为拟合值；蓝色阈值线和红色阈值线分别表示各位点以及窗口的ΔSNP-index 95%和99%置信区间；横坐标为染色体的分布，每个点代表ΔSNP-index值
Figure 4. Genome-wide distribution of SNP-index
The scatter points are the original values, and the black curve is the fitted value; Blue threshold line and red threshold line indicate the ΔSNP-index 95% and 99% confidence intervals, respectively; The horizontal coordinate is the distribution of chromosomes, and each dot represents the ΔSNP-index value
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图 5 SNP-index在3号染色体上的分布
散点图为原始值，黑色曲线为拟合值，其他横线为指定阈值位置；横坐标为3号染色体的分布，每个点代表的ΔSNP-index值
Figure 5. Distribution of SNP-index on Chromosome 3
The scatter plot is the original value, the black curve is the fitted value, and the other horizontal lines are the specified threshold positions; The horizontal coordinate is the distribution of Chr 3, and each dot represents the ΔSNP-index value
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图 7 sh2021和WT籽粒在授粉后不同时间的差异表达基因GO (A、B)和KEGG (C、D)富集分析
Figure 7. GO(A,B) and KEGG(C,D) enrichment analyses of differentially expressed genes in sh2021 and WT grains at different time after pollination
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图 8 候选区间内差异表达基因qRT-PCR验证
“**”表示sh2021与WT在0.01水平差异显著(t检验)
Figure 8. Validation of differentially expressed genes in candidate intervals by qRT-PCR
“**” indicates significant difference at the level of 0.01between sh2021 and WT (t test)
表 1 sh2021 基因定位引物
Table 1 Primers used for gene mapping of sh2021
引物名称
Primer name序列(5′→3′)
SequenceID1 F：TACAGCTTGTAAAAATACAGGGCC
R：ATGAGAGTGCATGGTCCGTGID2 F：GGCAGCAGGATCAGAAGAGA
R：GGAACTTGTTGTGCCAAGGID3 F：TCTCGAATCAAGAACCAGCA
R：GGAGGGATTGGGTGAAGATTID4 F：GTCTACAACCGGCTCCTCAA
R；GTGGAAGTGTCGTCCGTTCTID5 F：GCCATCTACAGTGTCAGCCA
R：GTCAACGAGATTCTCAGGGCID9 F：CTTCCCGTCGAGATCCACG
R：GTTGACAGCTTGTGGGGTCTID10 F：GCTAGAGATGGCTATTAGGTGCA
R：AGCGTGTCTAACCTCACTTATAACAID11 F：TAACTGTCTCGCTGGGCTTT
R：GGCGTCCGTCCAAATAAAID12 F：CCATGAGGAGGCATGTGTGG
R：CAGCTGGTTCACGCCACATCID13 F：TGCACTTCGAGAGGTTTGTT
R：TCATAATAGTCTCGTATCCAGCCTID14 F：ACCCAAGGACCCCAAAGAGA
R：GCCCTATGCTTGGGGAGTGID15 F：GCCTGTCTAGCATATGATGTGAA
R：GTCTCATGCCAAACGAGGATC3-102 F：CTAGCCAGCCCCCATTCTTC
R：GCAAGGAGTAGGGAGGACGTG
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表 2 qRT-PCR定量验证引物
Table 2 qRT-PCR quantitative verification primers
引物名称
Primer name序列(5′→3′)
SequenceHX1 F：TTTGAGCGAAACTCCAGTGC
R：ATGTTCATGTGCTGCAGGACHX2 F：GAGTCGGAGATCAGCATCGG
R：AAAGTGTCGGCGAAGAACCTHX3 F：TTGGGAAGACGAAGCCATTG
R：AGGTCGGCTTTCCATATGGACHX4 F：TCACTGAGCAGCCTTCCAAG
R：GACACGTGAGCAGACTCCAAHX5 F：GCCACGGGATCATGAAGGAG
R：TCTCCTCCAACAGACCCTCC
下载: 导出CSV
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[1] NEUFFER M G, SHERIDAN W F. Defective kernel mutants of maize: I: Genetic and lethality studies[J]. Genetics, 1980, 95(4): 929-944. doi: 10.1093/genetics/95.4.929
[2] BRUNELLE D C, CLARK J K, SHERIDAN W F. Genetic screening for EMS-induced maize embryo-specific mutants altered in embryo morphogenesis[J]. G3-Genes Genomics Genetics, 2017, 7(11): 3559-3570.
[3] WU Y R, MESSING J. Proteome balancing of the maize seed for higher nutritional value[J]. Frontiers in Plant Science, 2014, 5: 240.
[4] SCHMIDT R J, BURR F A, AUKERMAN M J, et al. Maize regulatory gene opaque-2 encodes a protein with a “leucine-zipper” motif that binds to zein DNA[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 1990, 87(1): 46-50. doi: 10.1073/pnas.87.1.46
[5] AZEVEDO R A, LEA P J, DAMERVAL C, et al. Regulation of lysine metabolism and endosperm protein synthesis by the opaque-5 and opaque-7 maize mutations[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2004, 52(15): 4865-4871. doi: 10.1021/jf035422h
[6] MYERS A M, JAMES M G, LIN Q. Maize opaque5 encodes monogalactosyldiacylglycerol synthase and specifically affects galactolipids necessary for amyloplast and chloroplast function[J]. Plant Cell, 2011, 23(6): 2331-2347. doi: 10.1105/tpc.111.087205
[7] FU S N, SCANLON M J. Clonal mosaic analysis of empty pericarp2 reveals nonredundant functions of the duplicated heat shock factor binding proteins during maize shoot development[J]. Genetics, 2004, 167(3): 1381-1394. doi: 10.1534/genetics.104.026575
[8] CHETTOOR A M, YI G, GOMEZ E, et al. A putative plant organelle RNA recognition protein gene is essential for maize kernel development[J]. Journal of Integrative Plant Biology, 2015, 57(3): 236-246. doi: 10.1111/jipb.12234
[9] YANG Y Z, DING S, WANG Y, et al. Small kernel2 encodes a glutaminase in vitamin B6 biosynthesis essential for maize seed development[J]. Plant Physiology, 2017, 174(2): 1127-1138. doi: 10.1104/pp.16.01295
[10] 薛慧, 张国治, 吕飞杰, 等. 抗性淀粉测定方法的研究[J]. 河南工业大学学报(自然科学版), 2012, 33(4): 57-60. doi: 10.16433/j.cnki.issn1673-2383.2012.04.017 [11] DICKINSON D B, PREISS J. Presence of ADP-glucose pyrophosphorylase in shrunken-2 and brittle-2 mutants of maize endosperm[J]. Plant Physiology, 1969, 44(7): 1058-1062. doi: 10.1104/pp.44.7.1058
[12] 周瑞颐, 青芸, 李道杨, 等. 玉米ZmBT1研究进展[J]. 分子植物育种, 2020, 18(20): 6702-6706. doi: 10.13271/j.mpb.018.006702 [13] MAGALIE C, PIERRE C, SYLVIE M, et al. Transcriptional and metabolic adjustments in ADP-glucose pyrophosphorylase-deficient bt2 maize kernels[J]. Plant Physiology, 2008, 146(4): 1553-1570. doi: 10.1104/pp.107.112698
[14] 宋欣冉, 胡书婷, 张凯, 等. 玉米籽粒突变体dek101的表型分析和精细定位[J]. 作物学报, 2020, 46(12): 1831-1838. [15] 石慧敏, 蒋成功, 王红武, 等. 玉米籽粒突变体dek48的表型鉴定与基因定位[J]. 作物学报, 2020, 46(9): 1359-1367. [16] HE Y H, WANG J G, QI W W, et al. Maize Dek15 encodes the cohesin-loading complex subunit SCC4 and is essential for chromosome segregation and kernel development[J]. The Plant Cell, 2019, 31(2): 465-485. doi: 10.1105/tpc.18.00921
[17] WANG G F, WANG F, WANG G, et al. Opaque1 encodes a myosin XI motor protein that is required for endoplasmic reticulum motility and protein body formation in maize endosperm[J]. The Plant Cell, 2012, 24(8): 3447-3462. doi: 10.1105/tpc.112.101360
[18] WANG G, QI W W, WU Q, et al. Identification and characterization of maize floury4 as a novel semidominant opaque mutant that disrupts protein body assembly[J]. Plant Physiology, 2014, 165(2): 582-594. doi: 10.1104/pp.114.238030
[19] GILLIKIN J W, ZHANG F, COLEMAN C E, et al. A defective signal peptide tethers the floury-2 zein to the endoplasmic reticulum membrane[J]. Plant Physiology, 1997, 114(1): 345-352. doi: 10.1104/pp.114.1.345
[20] KIM C S, GIBBON B C, GILLIKIN J W, et al. The maize Mucronate mutation is a deletion in the 16-kDa γ-zein gene that induces the unfolded protein response1[J]. The Plant Journal, 2006, 48(3): 440-451. doi: 10.1111/j.1365-313X.2006.02884.x
[21] KUSHWAHA H R, SINGH A K, SOPORY S K, et al. Genome wide expression analysis of CBS domain containing proteins in Arabidopsis thaliana (L. ) Heynh and Oryza sativa L. reveals their developmental and stress regulation[J]. BMC Genomics, 2009, 10: 200. doi: 10.1186/1471-2164-10-200
[22] 王立成. 玉米抗旱高通量FOX文库的构建与验证[D]. 杨凌: 西北农林科技大学, 2019. [23] 崔会婷, 蒋旭, 张铁军, 等. 植物CYP450家族研究进展[J]. 中国草地学报, 2020, 42(5): 173-180. doi: 10.16742/j.zgcdxb.20190182 [24] 刘薇, 张彦威, 李伟, 等. 大豆细胞色素P450基因GmCYP78A69的克隆和生物信息学分析[J]. 分子植物育种, 2020, 18(14): 4523-4531. [25] CHEN X, LIU W, HUANG X, et al. Arg-type dihydroflavonol 4-reductase genes from the fern Dryopteris erythrosora play important roles in the biosynthesis of anthocyanins[J]. PLoS One, 2020, 15(5): e232090. doi: 10.1371/journal.pone.0232090.
[26] GU Z Y, CHEN H, YANG R N, et al. Identification of DFR as a promoter of anthocyanin accumulation in poinsettia (Euphorbia pulcherrima, Willd. ex Klotzsch) bracts under short-day conditions[J]. Scientia Horticulturae, 2018, 236: 158-165. doi: 10.1016/j.scienta.2018.03.032
[27] DEIKMAN J, HAMMER P E. Induction of anthocyanin accumulation by cytokinins in Arabidopsis thaliana[J]. Plant Physiology, 1995, 108(1): 47-57. doi: 10.1104/pp.108.1.47
[28] BAI M Y, FAN M, OH E, et al. A triple helix-loop-helix/basic helix-loop-helix cascade controls cell elongation downstream of multiple hormonal and environmental signaling pathways in Arabidopsis[J]. The Plant Cell, 2012, 24(12): 4917-4929.
[29] 刘浩. 转录因子ABP7在玉米籽粒发育过程中的功能及其分子机理分析[D]. 北京: 中国农业大学, 2017. -
期刊类型引用(7)
1. 朱士江，李虎，徐文，冯雅婷. 三峡库区土壤含水量对柑橘园果实品质的影响. 中国农业科技导报. 2023(06): 201-207 . 
百度学术
2. 余高，陈芬，田霞，卢心，滕明欢，谢婉莹. 冬季覆盖对幼龄柑橘园土壤化学性质及酶活性的影响. 河南农业科学. 2023(09): 91-101 . 百度学术
3. 同晓蕾，豆攀，张伯虎，问亚军，闫苗苗. 旱地果园生草栽培技术研究进展. 黑龙江农业科学. 2021(02): 127-131 . 百度学术
4. 黄玉杰，唐明明，刘道纯. 覆草和浇水量对桃树幼苗生长及土壤温湿度的影响. 经济林研究. 2021(01): 184-190 . 百度学术
5. 高海英. 果园生草对土壤和果树影响的试验研究. 乡村科技. 2021(20): 62-64 . 百度学术
6. 高鹏，谢家兴，孙道宗，陈文彬，杨明欣，周平，王卫星. 基于物联网和LSTM的柑橘园土壤含水量和电导率预测模型. 华南农业大学学报. 2020(06): 134-144 . 本站查看
7. 李运珍，谢永旺，邹彬. 浅析沃柑的引种栽培管理技术. 农村科学实验. 2019(13): 47+49 . 百度学术
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