Effects of compound Chinese medicine ultrafine powders on egg production, reproductive hormone, and related gene expression in laying hens
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摘要:目的
研究复方中药超微粉对蛋鸡产蛋性能、生殖激素及相关基因表达的影响。
方法试验选取307日龄的新杨黑羽蛋鸡216只，随机分为3组，每组8个重复，每个重复9只；对照组饲喂基础饲粮，试验组分别在基础饲粮中添加0.5%丹参Salvia miltiorrhiza+0.25%女贞子Ligustrum lucidum+0.25%蒲公英Taraxacum mongolicum(复方1)、0.3%益母草Leonurus japonicus+0.2%丹参+0.25%女贞子+0.25%蒲公英(复方2)的超微粉，均以质量分数计；预试期7 d，正试期120 d。测定产蛋性能、蛋品质、血浆生殖激素水平，用RT-PCR技术检测蛋品质相关基因表达。
结果与对照组相比，试验1~30、31~60和1~120 d，复方1组产蛋率分别增加7.56%、4.00%和5.31% (P<0.05)；试验1~120 d，复方2组产蛋率增加5.22% (P<0.05)；试验第60天，复方1组血浆雌二醇水平、输卵管PMCA1的mRNA相对表达量分别增加21.45%和77.00%(P < 0.05)，复方2组输卵管 KCNA1的mRNA相对表达量增加70.00% (P < 0.05)；第90天，复方1和2组蛋壳厚度分别增加12.12%和9.09% ( P < 0.05)；第120天，复方1和2组输卵管 CA2的mRNA相对表达量分别增加86.00%和66.00% (P < 0.05)，复方2组输卵管 CDH6、KCNA1和SLC26A9的mRNA相对表达量分别增加99.00%、86.00%和99.00% (P < 0.05)。
结论饲粮添加由益母草、丹参、女贞子和蒲公英组成的复方中药超微粉可增加蛋鸡的产蛋率，改善蛋品质，增加生殖激素水平，上调蛋壳形成相关基因的mRNA表达，且复方1的效果更佳。
Abstract:ObjectiveThis study was aimed to determine the effect of compound Chinese medicine ultrafine powders on egg laying performance, reproductive hormone, and related gene expression in laying hens.
MethodA total of 216 Xinyang black-feather laying hens (307-day-old) were selected and randomly divided into three groups with eight replicates in each group and nine in each replicate. The control group was fed the basal diet, and the experimental groups were fed basal diets supplemented with 0.5% Salvia miltiorrhiza (SM) + 0.25% Ligustrum lucidum (LL) + 0.25% Taraxacum mongolicum (TM)(compound 1), and 0.3% Leonurus japonicus (LJ) + 0.2% SM + 0.25% LL + 0.25% TM (compound 2) ultrafine powders, respectively. The pre-trial period was seven days, and the formal trial period was 120 days. Egg production performance, egg quality, and plasma reproductive hormone level were determined. The expressions of genes related to egg quality were detected by RT-PCR technology.
ResultCompared with the control group, during days 1−30, 31−60, and 1−120 of the trial, the egg laying rates of the compound 1 group increased by 7.56%, 4.00%, and 5.31% (P<0.05), respectively, and during 1−120 days the egg laying rate of the compound 2 group increased by 5.22% (P<0.05). On day 60 after treatment the plasma estradiol level and relative expression of oviductPMCA1 mRNA increased by 21.45% and 77.00% (P<0.05), respectively, in the compound 1 group, and the relative expression of oviductKCNA1 mRNA increased by 70.00% (P<0.05) in the compound 2 group. On day 90, the thickness of the eggshells increased by 12.12% and 9.09% (P<0.05), respectively, in the compound 1 and 2 groups. On day 120, the relative expressions of oviductCA2 mRNA increased by 86.00% and 66.00% (P<0.05), respectively, in the compound 1 and 2 groups, and the relative expressions of oviductCDH6,KCNA1 andSLC26A9 mRNA increased by 99.00%, 86.00% and 99.00% (P<0.05), respectively, in the compound 2 group.
ConclusionDietary supplementation with compound Chinese medicine ultrafine powders consisting of LJ, SM, LL, and TM could increase the egg production rate, improve egg quality of laying hen, increase the level of reproductive hormone, and up-regulate mRNA expressions of genes associated with eggshell formation. In addition, compound 1 presents the better effect.
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普通大蓟马Megalurothrips usitatus又名豆大蓟马、豆花蓟马，隶属于缨翅目蓟马科大蓟马属，主要分布于澳大利亚、马来西亚、斯里兰卡、菲律宾、斐济、印度、日本等[1-3]，在我国海南、台湾、广东、广西、湖北、贵州、陕西等地也均有发生为害[4-5]。据报道，该虫有28种寄主，其中16种为豆科植物，目前它已成为危害华南地区豆科作物的主要害虫[6-9]，田间调查和室内试验均表明豇豆为其嗜好寄主[10-11]。普通大蓟马主要以锉吸式口器取食豇豆幼嫩组织的汁液，可造成叶片皱缩、生长点萎缩、豆荚痂疤等，严重影响豇豆品质[12-13]。此外，该虫体积小、发生量大、隐秘性强，大部分时间都躲在花中取食，从豇豆苗期至采收期均可为害[14-15]，以上特点均增加了农户的防治难度。当其为害严重时，农户只能增加施药频率和施药量，这也导致该虫对多种常用化学农药产生了严重的抗药性[16-17]。
目前关于普通大蓟马的研究主要集中在生物学特性[18]及综合防治技术[19-20]等层面，随着抗药性的不断发展与研究的不断深入，从分子层面解析普通大蓟马的抗药性机制和寄主选择机制等以寻求新型绿色防控方法势在必行，室内种群的大规模饲养是展开这些研究的基础。化蛹基质作为影响昆虫种群规模的关键因子，韩云等[21]曾指出普通大蓟马在含水量(w)为15%的砂壤土中羽化率显著高于砂土、壤土和黏土，但不适用于室内大规模饲养，因为实际应用中，存在土壤类型无法明确区分、配制砂壤土会增加人工饲养的工作量等问题。土壤以外的其他基质对普通大蓟马化蛹的适合度鲜见研究报道。
本研究以普通大蓟马为试验对象，室内观测其在沙子、蛭石和厨房用纸3种基质及无基质条件下的羽化规律，分析该虫对不同化蛹基质的适合度，以期为普通大蓟马的室内大规模饲养提供基础资料，为该虫的综合治理提供理论依据。
1. 材料与方法
1.1 供试材料
普通大蓟马于2017年采自广东省广州市增城区朱村豇豆田，采回后在RXZ-500C型智能人工气候箱(宁波江南仪器厂)内用豇豆豆荚饲养，饲养条件为温度(26±6) ℃，光照周期12 h光∶12 h暗，相对湿度(70±5)%。室内饲养多代后，选取发育一致的老熟2龄若虫(以体色变为橙红色为标准)进行室内试验。
供试基质包括沙子、蛭石、锯末和厨房用纸，并以无基质作为空白对照。试验前将沙子、蛭石和锯末置于DHG-9140型电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)中105 ℃恒温烘烤6 h备用。
1.2 试验方法
首先称取过筛烘干后的沙子50 g 3组，分别加入2.5、3.5和4.5 mL蒸馏水，充分混匀，配制成含水量(w)分别为5%、7%和9%的沙子化蛹基质；称取过筛烘干后的蛭石10 g 3组，分别加入10.0、12.5和15.0 mL蒸馏水，充分混匀，配制成含水量(w)分别为20%、25%和30%的蛭石化蛹基质；称取过筛烘干后的蛭石10 g 3组，分别加入12.5、15.0和17.5 mL蒸馏水，充分混匀，配制成含水量(w)分别为25%、30%和35%的锯末化蛹基质。将以上基质分别转移至350 mL玻璃组培瓶内，基质深度均为5 cm，将厨房用纸对折成合适大小后平铺在组培瓶底部作为基质。在所有基质上放置纱网，再加入1根新鲜的豇豆豆荚(长度约4~5 cm)，分别接入50头普通大蓟马老熟2龄若虫，用250目纱布封口后置于人工气候箱中饲养，每日观察并记录成虫羽化数量。每个处理设6次重复。设置不加入任何化蛹基质的空白对照。
含水量的测定方法按以下公式[22]进行：
含水量=实际含水质量/烘干后基质质量×100%。
1.3 数据分析
运用SPSS 24.0软件进行试验数据处理分析，不同基质及含水量对普通大蓟马羽化率、蛹历期和性比(雄性∶雌性)的影响采用单因素方差分析，并运用Duncan’s法检验差异显著性。
2. 结果与分析
2.1 不同基质对普通大蓟马羽化率、蛹历期和性比的影响
普通大蓟马在不同基质中的羽化率、蛹历期和性比具有显著差异(图1)。由图1A可知，普通大蓟马在厨房用纸中的羽化率显著高于其他基质，为54.33%，其次为含水量5%(w)的沙子，羽化率为44.67%；锯末最不适宜于普通大蓟马羽化，在含水量(w)为25%、30%、35%的锯末中普通大蓟马的羽化率分别为10.33%、5.33%、16.67%，显著低于空白对照与其他基质。
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图 1 不同基质对普通大蓟马羽化率、发育历期和性比(雄性∶雌性)的影响1~3分别为含水量(w)为5%、7%和1%的沙子，4~6分别为含水量(w)为20%、25%和30%的蛭石，7~9分别为含水量(w)为25%、30%和35%锯末，10：厨房用纸，11：无基质；各图中的不同小写字母表示差异显著(P<0.05，Duncan’s法)Figure 1. Effects of different substrates on eclosion rate, pupa developmental period and male-female ratio of Megalurothrips usitatus1: Sand with 5% moisture, 2: Sand with 7% moisture, 3: Sand with 10% moisture, 4: Vermiculite with 20% moisture, 5: Vermiculite with 25% moisture, 6: Vermiculite with 30% moisture, 7: Sawdust with 25% moisture, 8: Sawdust with 30% moisture, 9: Sawdust with 35% moisture, 10: Kitchen paper, 11: No substrate; Different lowercase leters in the same figure indicated significant difference among different substrate (P<0.05, Duncan’s method)由图1B可知，普通大蓟马在含水量5%(w)的沙子中蛹的发育历期最短，为5.29 d，其次为含水量7%(w)的沙子，为6.01 d，在其他基质中的蛹期则无显著差异，在6.14~7.16 d。
由图1C可知，普通大蓟马在含水量30%(w)的蛭石中性比最高，为0.60，含水量10%(w)的沙子和30%(w)的蛭石性比相对较低，分别为0.12和0.06，在其他基质中性比无显著差异。
2.2 不同基质条件下普通大蓟马的羽化情况
由表1数据可知，沙子含水量(w)为5%时普通大蓟马羽化最早，始于第2天；其次为蛭石，羽化始于第4天，其他条件下羽化均始于第3天；以锯末为基质时羽化最晚，始于第5天。沙子含水量(w)为5%和厨房用纸条件下，羽化高峰出现在第5天，羽化率分别为21%和22.67%；次高峰在第6天，羽化率分别为14.33%和21%。沙子含水量(w)为9%、锯末以及空白对照下羽化高峰出现在第7天，其他条件下羽化高峰均出现在第6天。不同基质类型及含水量条件下，普通大蓟马的羽化均结束于第8天或第9天，与不同基质培养条件下普通大蓟马蛹期之间的差异相对应。
表 1 不同基质对普通大蓟马逐日羽化率的影响1)Table 1. Effects of differents substrates on daily eclosion rate of Megalurothrips usitatus% t/d 沙子含水量(w) Water content in sand 蛭石含水量(w) Water content in vermiculite 5% 7% 9% 20% 25% 30% 1 0 0 0 0 0 0 2 1.67±0.42c 0 0 0 0 0 3 1.00±1.68c 0 0 0 0 0 4 1.33±0.67c 5.33±0.33c 0.33±0.33b 0 0 0 5 21.00±3.82a 5.33±2.17b 2.67±1.91b 3.00±2.30bc 10.33±3.48ab 0.33±0.33b 6 14.33±4.66b 17.33±1.76a 2.67±1.91b 11.67±2.09a 14.67±3.33a 7.67±2.22a 7 2.33±0.80c 5.00±0.85b 8.67±1.84a 6.33±2.28b 7.67±1.74bc 6.67±1.52a 8 0.67±0.42c 0.67±0.67c 0.67±0.42b 4.00±1.35bc 4.00±1.37cd 1.67±0.94b 9 0 0 0.33±0.33b 0.67±0.42b 0 0.67±0.42b 10 0 0 0 0 0 0 3. 讨论与结论
化蛹基质的类型对普通大蓟马化蛹具有一定影响，本研究发现锯末和蛭石不适宜于普通大蓟马化蛹，锯末和蛭石不同含水量条件下大蓟马的羽化率都显著低于空白对照。有研究指出土壤中砂土含量低于30%时，蓟马若虫不能化蛹[23]，蓟马在砂壤土中的羽化率也显著高于砂土、黏土、壤土等单一土壤[21]。
化蛹基质的含水量对普通大蓟马化蛹具有显著影响，本研究发现当沙子含水量(w)为5%时，羽化率仅次于厨房用纸，高达44.67%，与孟国玲等[23]关于豆带蓟马Taenithripsglycines在含水量(w)为5.7%时羽化率最高(43.63%)的报道相对一致。韩云等[21]研究发现普通大蓟马在含水量(w)为15%的砂壤土中羽化率最高，为52.08%，而土壤含水量(w)5%时羽化率仅为6.67%。这与本研究结果不符，究其原因可能是不同类型的基质吸水力与保水力不同，导致在相同的绝对含水量下湿度有差异。此外，有研究曾指出高含水量不利于蓟马化蛹[24]，这与本研究结果相一致，沙子含水量(w)5%时的羽化率显著高于含水量(w)7%和10%。
在本研究中，成虫性比普遍低于1∶1，含水量(w)30%的蛭石羽化性比最高，为0.6，含水量(w)30%锯末最低，为0.06，其他处理的性比无显著差异，为0.12~0.48。张念台[8]和谭柯[24]在田间调查的结果也显示其成虫性比低于1∶1，后代总是偏于雌性，谭柯[24]则表示后代偏雌性可能是蓟马暴发的原因之一。这与本研究结果相一致，后代偏于雌性。
本研究发现普通大蓟马在厨房用纸中的羽化率最高，蛹发育历期与其他基质相比无明显差异，且以厨房用纸为化蛹基质时，可以清楚地观察到普通大蓟马蛹期的形态特征变化，可以随时根据试验需求收集不同时期的若虫或成虫。虽然沙子含水量(w)5%时蛹发育历期最短且羽化率也较高，但蓟马一旦入土化蛹便无法继续观察形态或收集虫体。因此，本试验条件下，厨房用纸是最适合室内普通大蓟马大量饲养的化蛹基质。
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表 1 基础饲粮组成及营养水平1)
Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diets
项目 Item 成分 Ingredient w/% 原料 Ingredient 玉米 Corn 62.69 豆粕 Soybean meal 23.88 石粉 Limestone 7.94 豆油 Soybean oil 0.49 蛋氨酸 Met 0.10 预混料 Premix 5.00 合计 Total 100.00 营养成分 Nutrient 粗蛋白质 Crude protein 14.23 粗脂肪 Crude fat 9.66 钙 Ca 3.51 有效磷 Available P 0.34 赖氨酸 Lys 0.71 蛋氨酸 Met 0.37 代谢能/(MJ·kg−1) Metabolic energy 11.25 1) 风干基础；预混料为每千克饲粮提供：维生素A 1.4×105 IU，维生素D3 5×104 IU，维生素E 480 mg，维生素Κ 3 180 mg，维生素B1 63 mg，维生素B2 200 mg，维生素B6 140 mg，维生素B12 0.7 mg，烟酸胺1 000 mg，D−泛酸500 mg，叶酸50 mg，D−生物素5.0 mg，氯化胆碱900 mg，Fe 2.0 g，Cu 0.3 g，Mn 1.8 g，Zn 2.0 g，I 70 mg，Se 9 mg，植酸酶3 000 IU；粗蛋白质和粗脂肪为实测值，其余均为计算值 1) Air-dry basis; The premix provides the following per kg of diets: Vitamin A 1.4×105 IU, Vitamin D3 5×104 IU, Vitamin E 480 mg, Vitamin Κ 3 180 mg, Vitamin B1 63 mg, Vitamin B2 200 mg, Vitamin B6 140 mg, Vitamin B12 0.7 mg, nicotinic acid 1 000 mg, D-pantothenic acid 500 mg, folic acid 50 mg, D-biotin 5.0 mg, choline chloride 900 mg, Fe 2.0 g, Cu 0.3 g, Mn 1.8 g, Zn 2.0 g, I 70 mg, Se 9 mg, and phytase 3000 IU; Crude protein and crude fat are measured values, while the others are calculated values 
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表 2 实时定量PCR引物序列
Table 2 Primer sequences used for RT-PCR
基因名称 Gene name 登录号 Accession number 引物序列(5′→3′) Primer sequence 产物大小/bp Product size β−肌动蛋白 β-actin NM_205518.1 F: TGTTACCAACACCCACACCC R: TCCTGAGTCAAGCGCCAAAA 110 血小板反应蛋白2 THBS2 NM_001001755.1 F: TGTATGTGGCGAAAGGGTCC R: TGATTGGCTCCTCTGGCATC 125 钙黏蛋白6 CDH6 NM_001001758.2 F: TGTGCTGTGTGCAACGACTA R: CAGGCCTGGCAACTCTTTCT 245 钾离子通道 KCNA1 XM_004938075.3 F: TGCGGTACTTCGACCCTTTG R: GCTGGTATTCTCCCTCTGGC 243 碳酸酐酶2 CA2 XM_046910455.1 F: CTGACTACTCCACCACTGCA R: GCTCTGACTTCCCTGCTCTT 182 钙离子转运酶Ⅰ PMCA1 XM_046906440.1 F: GCTGTGGTCTGTTTTCCTGG R: ACAAGATCTGACCACGACGT 197 溶质转运蛋白 SLC26A9 XM_040691172.2 F: GACCTACTGCTCACCACTGT R: GTTGGAGAGGCGCTTTCAAA 231
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表 3 复方中药超微粉对蛋鸡产蛋性能的影响1)
Table 3 Effect of compound Chinese medicine ultrafine powders on egg-laying performance of laying hen
试验期/d Test period 组别 Group 产蛋率/% Laying rate 平均日采食量/g Average daily feed intake 平均蛋质量/g Average egg mass 料蛋比 Feed to egg ratio 1~30 对照 Control 84.26±1.58b 113.06±1.47a 51.71±1.24a 2.61±0.04a 复方1 Compound 1 90.63±0.65a 116.06±1.03a 53.49±1.74a 2.48±0.02b 复方2 Compound 2 86.30±2.12ab 117.48±1.69a 53.74±1.75a 2.55±0.03ab 31~60 对照 Control 84.91±1.32b 105.70±1.20a 49.70±1.83a 2.53±0.07a 复方1 Compound 1 88.31±0.99a 109.23±1.04a 52.05±0.42a 2.37±0.02a 复方2 Compound 2 87.62±0.69ab 108.70±1.61a 52.92±0.29a 2.37±0.03a 61~90 对照 Control 79.36±1.56a 105.50±1.74a 52.28±0.57a 2.36±0.04a 复方1 Compound 1 83.96±2.39a 106.94±1.41a 50.32±0.43a 2.48±0.08a 复方2 Compound 2 85.55±1.81a 107.10±1.58a 51.38±0.58a 2.42±0.06a 91~120 对照 Control 77.18±1.91a 100.52±3.01a 52.15±0.58a 2.50±0.05a 复方1 Compound 1 79.17±2.47a 101.88±2.21a 51.90±0.35a 2.48±0.95a 复方2 Compound 2 83.55±0.98a 100.65±2.33a 52.87±0.33a 2.30±0.44a 1~120 对照 Control 81.62±0.89b 104.58±1.61a 51.32±0.81a 2.50±0.01a 复方1 Compound 1 85.95±1.14a 108.71±0.91a 52.19±0.51a 2.43±0.04a 复方2 Compound 2 85.88±1.00a 108.12±1.68a 52.69±0.58a 2.41±0.04a 1) 相同时期同列数据后的不同小写字母表示差异显著(P<0.05，Duncan’s法) 1) Different lowercase letters in the same column of the same period indicate significant differences (P<0.05，Duncan’s method)
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表 4 复方中药超微粉对蛋鸡蛋品质的影响1)
Table 4 Effect of compound Chinese medicine ultrafine powders on egg quality of laying hen
t/d 组别 Group 蛋形指数 Shape index 蛋壳厚度/mm Eggshell thickness 蛋壳强度/(kg·cm−2) Eggshell strength 蛋白高度/mm Albumen height 哈氏单位 Haugh unit 30 对照组 Control 1.32±0.01a 0.37±0.01a 39.43±1.96a 3.79±0.30a 58.25±3.52a 复方1 Compound 1 1.31±0.01a 0.38±0.01a 44.49±1.71a 4.17±0.31a 65.78±2.82a 复方2 Compound 2 1.31±0.01a 0.38±0.01a 42.81±1.64a 4.27±0.29a 67.23±2.40a 60 对照组 Control 1.31±0.01a 0.37±0.01a 37.68±1.48a 3.80±0.33a 59.02±3.78a 复方1 Compound 1 1.31±0.01a 0.38±0.01a 40.12±1.95a 4.30±0.32a 63.43±3.55a 复方2 Compound 2 1.32±0.01a 0.36±0.01a 42.05±1.82a 3.97±0.26a 60.25±3.25a 90 对照组 Control 1.34±0.01a 0.33±0.01b 30.90±2.15b 3.86±0.25a 60.17±3.16a 复方1 Compound 1 1.30±0.01b 0.37±0.01a 38.93±1.52a 4.41±0.26a 67.84±2.20a 复方2 Compound 2 1.31±0.01b 0.36±0.01a 36.58±1.43a 4.19±0.30a 62.95±2.78a 120 对照组 Control 1.34±0.01a 0.38±0.01a 32.76±1.83a 3.91±0.22a 64.16±2.12a 复方1 Compound 1 1.31±0.01b 0.33±0.01b 35.17±1.84a 4.31±0.20a 65.17±2.13a 复方2 Compound 2 1.32±0.01ab 0.38±0.01a 35.20±1.45a 4.09±0.28a 64.69±2.41a t/d 组别 Group 蛋黄颜色指数 Yolk color index 蛋白相对质量/% Albumen ratio 蛋黄相对质量/% Yolk ratio 蛋壳相对质量/% Eggshell ratio 30 对照组 Control 11.83±0.13a 57.60±0.56a 31.94±0.55a 10.72±0.16a 复方1 Compound 1 11.50±0.12a 56.23±0.33a 32.45±0.39a 10.93±0.13a 复方2 Compound 2 11.71±0.11a 56.59±0.29a 32.37±0.35a 10.94±0.11a 60 对照组 Control 12.27±0.10ab 56.14±0.47a 33.19±0.41a 10.65±0.12b 复方1 Compound 1 12.63±0.16a 55.90±0.33a 32.71±0.33a 11.20±0.13a 复方2 Compound 2 12.08±0.15b 56.65±0.47a 32.34±0.44a 10.91±0.15ab 90 对照组 Control 12.17±0.16b 56.14±0.32a 33.19±0.31a 10.61±0.09b 复方1 Compound 1 12.61±0.16ab 55.70±0.34a 33.04±0.40a 11.04±0.15a 复方2 Compound 2 12.83±0.15a 56.74±0.43a 32.14±0.33a 10.68±0.15ab 120 对照组 Control 12.22±0.09b 56.24±0.50a 33.31±0.42a 10.48±0.11a 复方1 Compound 1 12.54±0.16a 56.05±0.33a 33.39±0.32a 10.49±0.12a 复方2 Compound 2 11.95±0.05b 56.64±0.66a 32.76±0.64a 10.64±0.17a 1) 相同时期同列数据后的不同小写字母表示差异显著(P<0.05，Duncan’s法) 1) Different lowercase letters in the same column of the same time indicate significant differences(P<0.05，Duncan’s method)
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表 5 复方中药超微粉对蛋鸡血浆生殖激素水平的影响1)
Table 5 Effect of compound Chinese medicine ultrafine powders on plasma reproductive hormone level of laying hen
t/d 组别 Group 促卵泡激素/(IU·L−1) Follicle-stimulating hormone (FSH) 促黄体生成素/(IU·L−1) Luteinizing hormone (LH) 雌二醇/(ng/L−1) Estradiol (E2) 60 对照 Control 18.34±0.35a 17.04±0.29a 401.40±10.37b 复方1 Compound 1 18.07±0.46a 15.78±0.55a 487.05±8.90a 复方2 Compound 2 17.51±0.34a 15.45±0.32a 438.91±18.81b 120 对照 Control 16.79±0.65a 16.75±0.50a 405.59±10.84a 复方1 Compound 1 18.06±0.29a 17.15±0.37a 386.44±10.75a 复方2 Compound 2 17.57±0.20a 17.91±0.36a 417.67±6.78a 1) 相同时期同列数据后的不同小写字母表示差异显著(P<0.05，Duncan’s法) 1) Different lowercase letters in the same column of the same time indicate significant differences(P<0.05，Duncan’s method)
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表 6 复方中药超微粉对蛋鸡输卵管子宫部相关基因mRNA表达量的影响1)
Table 6 Effect of compound Chinese medicine ultrafine powders on related gene expression in the uterus of hen oviduct
t/d 组别 Group 血小板反应蛋白2 THBS2 钙黏蛋白6 CDH6 钾离子通道1 KCNA1 碳酸酐酶2 CA2 钙离子转运酶I PMCA1 溶质转运蛋白 SLC26A9 60 对照 Control 1.00±0.18a 1.00±0.35a 1.00±0.18b 1.00±0.12b 1.00±0.12b 1.00±0.14b 复方1 Compound 1 0.90±0.09a 1.30±0.33a 1.23±0.22ab 1.64±0.12a 1.77±0.07a 1.58±0.12a 复方2 Compound 2 0.80±0.10a 0.87±0.20a 1.70±0.18a 1.13±0.13ab 1.40±0.38ab 1.16±0.14ab 120 对照 Control 1.00±0.20a 1.00±0.22b 1.00±0.11b 1.00±0.15c 1.00±0.11a 1.00±0.05b 复方1 Compound 1 2.17±0.25a 1.66±0.46ab 0.84±0.09b 1.86±0.17a 0.76±0.15a 0.67±0.32b 复方2 Compound 2 2.30±0.25a 1.99±0.21a 1.86±0.12a 1.66±0.14b 0.70±0.09a 1.99±0.32a 1) 相同时期同列数据后的不同小写字母表示差异显著(P<0.05，Duncan’s法) 1) Different lowercase letters in the same column of the same time indicate significant differences(P<0.05，Duncan’s method)
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