云南和广东省流行性出血病病毒血清6型毒株(EHDV-6)的分离与遗传特性

李占鸿; 杨振兴; 林栩慧; 吕敏娜; 肖雷; 寇美玲; 廖德芳; 朱建波; 杨恒; 李华春

doi:10.7671/j.issn.1001-411X.201908033

云南和广东省流行性出血病病毒血清6型毒株(EHDV-6)的分离与遗传特性

李占鸿^{1, †,},
杨振兴^{1, †,},
林栩慧²,
吕敏娜²,
肖雷¹,
寇美玲¹,
廖德芳¹,
朱建波¹,
杨恒^1, ,,
李华春^1, ,

1.
云南省畜牧兽医科学院/云南热带亚热带动物病毒病重点实验室，云南昆明 650224
2.
广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省兽医公共卫生公共实验室，广东广州 510640

基金项目: 国家重点研发计划(2017YFC1200505，2016YFD0500908)；公益性行业(农业)科研专项(201303035)；云南省中青年学术和技术带头人后备人才培养项目(2017HB055)

详细信息

作者简介:
李占鸿(1989—)，男，助理研究员，硕士，E-mail: dy081lzh@163.com

杨振兴(1986—)，男，助理研究员，硕士，E-mail：s300yn@163.com；†对本文贡献相同

通讯作者:
杨　恒(1978—)，男，研究员，博士，E-mail: yangheng2008.cool@163.com

李华春(1958—)，男，研究员，博士，E-mail: li_huachun@hotmail.com

†对本文贡献相同

中图分类号: S511；S502
计量
- 文章访问数: 1116
- HTML全文浏览量: 3
- PDF下载量: 1340
出版历程
- 收稿日期: 2019-08-29
- 网络出版日期: 2023-05-17
- 刊出日期: 2020-07-09

Isolation and genetic characteristics of epidemic hemorrhagic disease virus serotype 6 (EHDV-6) strains from Yunnan and Guangdong Provinces

LI Zhanhong^{1, †,},
YANG Zhenxing^{1, †,},
LIN Xuhui²,
LÜ Minna²,
XIAO Lei¹,
KOU Meiling¹,
LIAO Defang¹,
ZHU Jianbo¹,
YANG Heng^1, ,,
LI Huachun^1, ,

1.
Yunnan Animal Science and Veterinary Institute/Yunnan Tropical and Subtropical Animal Virus Diseases Laboratory, Kunming 650224, China
2.
Institute of Animal Health, Guangdong Academy of Agricultural Sciences/ Guangdong Open Laboratory of Veterinary Public Health, Guangzhou 510640, China

摘要

摘要:
目的
分离流行于我国南方地区的流行性出血病病毒血清6型毒株(EHDV-6)，掌握分离毒株的遗传特征。

方法
对设立于我国云南和广东省的哨兵动物定期采血，进行EHDV感染情况监测与病毒分离培养。通过血清中和试验确定分离EHDV的血清型，采用一步法RT-PCR对分离的EHDV-6毒株基因节段2、3、6(Seg-2、-3、-6)进行扩增与序列分析。

结果
2012—2016年，从云南省和广东省的哨兵动物中分离出25株EHDV毒株，其中，11株为EHDV-6型。中国EHDV-6型毒株的Seg-2、-3与-6均属Eastern型，核酸序列相似性分别为99.1%、98.9%和98.8%，在系统发生树上分别聚为1个独立的中国支系。在日本引起疫病暴发的EHDV-6型毒株与中国EHDV-6型毒株具有最近的亲缘关系。日本EHDV-6型毒株在系统发生树上处于中国支系内部，Seg-2、Seg-3与中国毒株的核酸序列相似性分别为98.5%和93.9%。

结论
云南和广东省流行的EHDV-6型毒株核酸与氨基酸序列高度相似；日本和中国的EHDV-6型毒株具有最近的亲缘关系，提示中日之间可能存在EHDV的流动。研究结果为进一步开展我国EHDV-6型毒株流行病学分析、致病性、病原学诊断与疫苗制备等研究提供了基础。
- 流行性出血病病毒 /
- 血清6型 /
- 分离鉴定 /
- 序列分析
Abstract:
Objective
To isolate epidemic hemorrhagic disease virus serotype 6 (EHDV-6) strains prevalent in southern China, and investigate the genetic characteristics of the isolated strains.

Method
Blood samples were collected from sentinel animals in Yunnan and Guangdong Provinces in China. EHDV infection was monitored and the virus was isolated. The serum types of isolated strains were determined by serum neutralization test, and segments 2, 3 and 6 (Seg-2, -3 and -6) of EHDV-6 isolated strains were amplified by one-step RT-PCR and subsequently sequenced.

Result
From 2012 to 2016, 25 EHDV strains were isolated from sentinel animals in Yunnan and Guangdong Provinces and 11 strains of them were EHDV-6. Seg-2, -3 and -6 of Chinese EHDV-6 strains were of Eastern topotype, and the nucleic acid sequence similarities were 99.1%, 98.9% and 98.8% respectively, which were clustered into an independent Chinese branch on the phylogenetic tree. Chinese EHDV-6 strains had the closest relationship with the EHDV-6 strains which caused epidemic outbreaks in Japan. The Japanese EHDV-6 strain was within the Chinese branch on the phylogenetic tree. The similarities of nucleic acid sequences of Seg-2 and Seg-3 between the Japanese and Chinese strains were 98.5% and 93.9% respectively.

Conclusion
The sequences of EHDV-6 strains prevalent from Yunnan and Guangdong Provinces are highly similar. The closest genetic relationship between Japanese and Chinese EHDV-6 strains suggests that there may be flow of EHDV between China and Japan. The results provide a basis for further research on epidemiological analysis, pathogenicity, etiological diagnosis and vaccine preparation of EHDV-6 strains in China.
- epizootic haemorrhagic disease virus /
- serotype 6 /
- isolation and identification /
- sequence analysis

HTML全文

雷琼黄牛是我国南亚热带的肉牛良种，属华南黄牛体系，主产于广东省湛江市和海南省海口市，分布于邻近县市^[1]。雷琼黄牛体貌似印度瘤牛，肩峰隆起、体躯匀称、肌肉结实紧凑，具有极强的抗逆、抗高温高湿、繁殖性能稳定等特征，但由于其体型小、生长速度缓慢等劣势，与我国地方优良的役肉兼用型黄牛品种存在一定的差距^[2]。秦川牛、南阳牛、鲁西牛、晋南牛和延边牛5个品种被公认为中国黄牛的代表性品种，其成年公牛体质量分别可达620.9、490.8、512.5、660.0和625.0 kg，而雷琼黄牛仅为354.6 kg^[3]。为了更好地发挥雷琼黄牛种资源优势，提高其生长性能与改善其肉品质，育种工作者引进外来优质牛，如西门塔尔牛、利木赞牛、安格斯牛等对雷琼黄牛进行杂交改良，但由于饲养管理水平低，缺乏完善的系谱登记制度，任由外来品种与雷琼黄牛频繁出现杂交紊乱现象，使得杂交牛系谱混乱，导致杂交牛后代杂交优势削减，遗传潜力未得到充分发挥。雷琼黄牛与西门塔尔牛、利木赞牛、安格斯牛杂交F1代生长发育规律与肉品质的研究鲜有报道，本研究以雷琼黄牛及其杂交牛F1代作为研究对象，对各项生长指标(体质量、体高、十字部高、体斜长、胸围)与肉品质理化指标(水分、灰分、蛋白质、脂肪、微量元素、剪切力、眼肌面积、肉色、氨基酸、脂肪酸)进行分析，比较雷琼黄牛及其杂交F1代的生长性状与肉用性能，为肉牛杂交改良提供科学依据。

1. 材料与方法

1.1 试验牛

在广东省湛江市，相同饲养条件下选取发育正常、健康、精神状态良好的西雷杂F1代25头(西门塔尔♂×雷琼黄牛♀)、利雷杂F1代133头(利木赞♂×雷琼黄牛♀)、安雷杂F1代42头(安格斯♂×雷琼黄牛♀)及雷琼黄牛190头，测定其初生、3月龄、6月龄、24月龄的体质量及体尺指标。

随机选取发育正常、健康、精神状态良好24月龄的雷琼黄牛、西雷杂F1代、利雷杂F1代及安雷杂F1代各3头，取其背最长肌为肉样。每头取肉样1 kg装入洁净密封袋中，并放进干冰保温箱中，冷冻保存待测。

1.2 肉牛生产性能测定

1.2.1 生长发育指标测定

测定雷琼黄牛、西雷杂F1代、利雷杂F1代、安雷杂F1代的生长发育性状，包括初生、3月龄、6月龄和24月龄的体质量及体尺指标(体高、十字部高、体斜长、胸围)。

1.2.2 肉品质分析

以雷琼黄牛、西雷杂F1代、利雷杂F1代、安雷杂F1代的背最长肌为样品，测定其理化指标：水分、蛋白质、脂肪、微量元素、氨基酸、脂肪酸和矿物质元素含量，以及剪切力和肉色。

1.2.3 眼肌面积测定

取位于第12和13对胸肋间眼肌，在硫酸纸上描出眼肌横切面轮廓，然后用方格纸描出并获得眼肌面积^[4]。

1.2.4 剪切力测定

将眼肌肉块切成23 cm厚的肉块，放置密封袋中，将肉块浸入80 ℃的恒温水浴锅中，加热至肉块中心温度为70 ℃时取出，用直径为1.27 cm的圆柱形取样器避开结缔组织，顺着肌纤维的方向取出。用肌肉嫩度仪测定每个样品的剪切力，每个样品测定8次，选取5个相近的值取其平均值，即为该肉样的剪切力^[5]。

1.3 数据分析

应用SPSS 20.0统计分析软件进行数据处理，所有数据结果均取平均值±标准误，采用One-Way ANOVA进行方差分析，采用LSD法进行差异显著性检验。

2. 结果与分析

2.1 雷琼黄牛与不同品种肉牛杂交后代生产性能比较

由表1可知，3组杂交牛F1代的体质量指标相较于雷琼黄牛均有大幅度的提升，其中利雷杂的提升幅度最大。3组杂交牛F1代的初生体质量极显著高于雷琼黄牛(P<0.01)，说明3组杂交牛F1代都继承了父本优良的肉用性能，具有较大的初生体质量。利雷杂、西雷杂和安雷杂的初生体质量分别比雷琼黄牛提高了60.55%、51.99%和50.43%，其中利雷杂的提升幅度最大。

表 1 雷琼黄牛与不同品种肉牛杂交F1代生长发育性状¹⁾

Table 1. Growth and developmental traits of F1 hybrids of Leiqiong yellow cattle and different breeds of beef cattle

牛龄 Age	品种 Breed	体质量/kg Body weight	体高/cm Body height	十字部高/cm Hip croop height	体斜长/cm Body length	胸围/cm Chest measurement
初生 Birth	西雷杂 Simmental×Leiqiong	28.24±0.51Aab	65.57±0.78Aab	69.00±1.02Bb	57.71±0.92Aab	70.43±0.61Aab
	利雷杂 Limousin×Leiqiong	29.83±0.42Aa	66.77±0.34Aa	70.30±0.31Aa	58.93±0.62Aa	70.82±0.40Aa
	安雷杂 Angus×Leiqiong	27.95±0.32Ab	64.91±0.34Ab	68.00±0.33Bb	56.55±0.28Ab	68.36±0.24Ab
	雷琼 Leiqiong	18.58±0.35Bc	60.38±0.32Bc	62.71±0.34Cc	53.92±0.30Bc	61.35±0.40Bc
3月龄 3-month-old	西雷杂 Simmental×Leiqiong	109.50±2.32Aa	86.17±0.95Bb	91.50±1.59Bb	87.00±1.77Aab	104.83±2.90Aab
	利雷杂 Limousin×Leiqiong	112.93±1.58Aa	87.84±0.61Aa	92.57±0.75Aa	87.16±0.69Aa	106.98±1.10Aa
	安雷杂 Angus×Leiqiong	93.77±2.51Bb	84.62±0.45Bb	89.00±0.75Bb	84.54±0.33Ab	102.77±0.52Ab
	雷琼 Leiqiong	67.62±1.16Cc	76.54±0.33Cc	79.59±0.45Cc	76.96±0.34Bc	93.28±0.66Bc
6月龄 6-month-old	西雷杂 Simmental×Leiqiong	178.14±4.38Bb	95.71±1.17Bb	103.14±1.03Bb	103.00±1.94Bb	127.00±1.05Bb
	利雷杂 Limousin×Leiqiong	194.33±2.40Aa	98.44±0.46Aa	106.23±0.37Aa	108.28±0.35Aa	130.72±0.48Aa
	安雷杂 Angus×Leiqiong	160.77±2.32Cc	93.77±0.47Bb	98.77±0.67Cc	97.92±0.71Cc	122.85±1.05Bc
	雷琼 Leiqiong	140.35±0.76Dd	89.94±0.36Cc	94.74±0.35Dd	100.91±0.67Bb	119.71±0.66Cd
24月龄 24-month-old	西雷杂 Simmental×Leiqiong	357.05±14.16Bb	122.80±2.50Aab	129.00±2.81Bb	139.00±2.88Aa	175.40±1.72Bb
	利雷杂 Limousin×Leiqiong	398.37±16.32Aa	123.83±3.00Aa	132.67±3.09Aa	140.17±3.47Aa	184.50±2.28Aa
	安雷杂 Angus×Leiqiong	331.02±12.05BCb	116.80±0.97ABb	122.80±0.58Bb	125.20±2.62Bb	178.00±1.84Aa
	雷琼 Leiqiong	289.43±6.56Cc	111.62±0.91Bc	115.77±0.56Cc	120.77±1.80Bb	169.54±1.77Bb
1)相同牛龄同列数据后的不同大、小写字母分别表示差异达到0.01和0.05的显著水平(LSD法) 　1)Different capital and lowercase letters in the same column of the same age indicate the difference reaches 0.01 and 0.05 significance levels respectively (LSD method)

下载: 导出CSV

| 显示表格

利雷杂、西雷杂和安雷杂F1代在断乳后不同月龄的体质量显著高于雷琼黄牛(P<0.05)，3月龄体质量分别比雷琼黄牛提高了67.01%、61.83%和38.67%，6月龄体质量分别比雷琼黄牛提高了38.46%、26.93%和14.55%，24月龄体质量分别比雷琼黄牛提高了37.64%、23.36%和14.37%。由此可知，3组杂交牛F1代中，利雷杂在初生至24月龄阶段的体质量增加幅度最大。

在初生至24月龄阶段，3组杂交牛F1代和雷琼黄牛的各体尺指标(体高、十字部高、体斜长、胸围)均呈现出不同程度的增长趋势，各体尺指标的增长强度大小顺序总体为利雷杂>西雷杂>安雷杂>雷琼黄牛。由表1可知，利雷杂、西雷杂和安雷杂比同年龄段雷琼黄牛的体高、十字部高、体斜长和胸围都有明显的提升，其中利雷杂的提升幅度是最大的。在24月龄阶段，对于体高、十字部高和体斜长3项体尺指标，利雷杂的测量值均极显著大于安雷杂与雷琼黄牛(P<0.01)，西雷杂的测量值显著大于安雷杂与雷琼黄牛(P<0.05)；利雷杂与安雷杂的胸围极显著大于雷琼黄牛(P<0.01)；而西雷杂和雷琼黄牛的胸围差异不显著；24月龄的利雷杂比雷琼黄牛的体高、十字部高、体斜长、胸围分别提高了10.94%、14.60%、16.06%和8.82%；24月龄的西雷杂比雷琼黄牛的体高、十字部高、体斜长、胸围分别提高了10.02%、11.43%、15.09%和3.46%；24月龄的安雷杂比雷琼黄牛的体高、十字部高、体斜长、胸围分别提高了4.64%、6.07%、3.67%和4.99%。由此可知，3组杂交牛F1代中，利雷杂改良雷琼黄牛体型效果最优。

2.2 雷琼黄牛与不同品种肉牛杂交后代肉品质理化指标分析

2.2.1 肉品质物理指标

消费者主要通过牛肉的嫩度、系水力以及肉质的风味评定肉的好坏，其中嫩度是肉质评定的一个重要指标，高档牛肉剪切力小，易咀嚼^[5]。由表2结果可知，剪切力大小顺序为西雷杂>雷琼黄牛>安雷杂>利雷杂，由此可知利雷杂与安雷杂的肉质嫩度优于雷琼黄牛，利雷杂的嫩度最优，而西雷杂的肉质嫩度最差。

表 2 雷琼黄牛与不同品种肉牛杂交F1代的肉品质物理指标¹⁾

Table 2. Physical indexes for meat qualities of F1 hybrids of Leiqiong yellow cattle and different breeds of beef cattle

品种 Breed	剪切力/kg Shearing force	眼肌面积/cm² Loin eye area	肉色
品种 Breed	剪切力/kg Shearing force	眼肌面积/cm² Loin eye area	L	a	b
西雷杂 Simmental×Leiqiong	5.80±0.25Aa	73.05±0.63Bb	34.51±0.27Bb	20.09±0.68Aa	13.72±0.75Aa
利雷杂 Limousin×Leiqiong	3.71±0.23Cc	60.30±0.43Cc	33.68±0.48Bb	16.89±0.85Bb	11.34±0.67Ab
安雷杂 Angus×Leiqiong	4.19±0.24Cc	83.20±0.55Aa	37.05±0.37Aa	16.02±0.93Bb	13.13±0.79Aab
雷琼 Leiqiong	5.00±0.20Bb	61.33±0.88Cc	31.85±0.40Cc	12.84±0.58Cc	11.66±0.74Aab
1)同列数据后的不同大、小写字母分别表示差异达到0.01和0.05的显著水平(LSD法) 　1)Different capital and lowercase letters in the same column indicate the difference reaches 0.01 and 0.05 significance levels respectively (LSD method)

下载: 导出CSV

| 显示表格

眼肌面积是预测胴体质量的一个重要指标，也是显示瘦肉率比例高低的辅助指标，眼肌面积越大，优质切块比例越大，胴体净肉率越高^[6]。由表2可知，本试验中各杂交牛F1代的眼肌面积大小顺序为安雷杂>西雷杂>雷琼黄牛>利雷杂，西雷杂的眼肌面积极显著高于雷琼黄牛(P<0.01)，安雷杂的眼肌面积(83.20 cm²)极显著高于其余3组(P<0.01)，说明安雷杂和西雷杂的瘦肉率高于雷琼黄牛，安格斯牛在提高雷琼黄牛的瘦肉率方面优势大于西门塔尔牛与利木赞牛，由此可知当培育高档杂交肉牛时，安格斯牛为首选，西门塔尔牛次之。

肉色是牛肉的外观体现，据研究表明，肉色为樱红色能够增加消费者对牛肉的购买欲^[7]。L、a、b值分别代表亮度、红度与黄度。由表5可知利雷杂的L值极显著高于雷琼黄牛(P<0.01)，安雷杂的L值极显著高于其余3组(P<0.01)；利雷杂的a值极显著高于雷琼黄牛(P<0.01)；雷琼黄牛的L值与a值都极显著低于3组杂交牛F1代(P<0.01)。由此可知西雷杂、利雷杂与安雷杂3组的肉色优于雷琼黄牛，说明西门塔尔、利木赞和安格斯与雷琼黄牛杂交均可提升雷琼黄牛肉色的红度与亮度，改善雷琼黄牛肉色偏白的情况。

表 5 雷琼黄牛与不同品种肉牛杂交F1代肌肉饱和脂肪酸(SFA)含量¹⁾

Table 5. Saturated fatty acid (SFA) contents in muscle of F1 hybrids of Leiqiong yellow cattle and different breeds of beef cattle w/%

品种 Breed	肉豆蔻酸 Myristic acid	棕榈酸 Palmitic acid	硬脂酸 Stearic acid	总量 Total
西雷杂 Simmental×Leiqiong	0.84±0.04Dd	24.60±0.36Aa	27.16±0.39Aa	54.24±0.69Aa
利雷杂 Limousin×Leiqiong	3.83±0.05Aa	26.88±0.11Aa	17.12±0.05BCc	50.90±0.16Cc
安雷杂 Angus×Leiqiong	2.19±0.13Cc	27.78±1.62Aa	24.22±1.68Ab	57.81±2.80Aa
雷琼 Leiqiong	2.93±0.27Bb	25.74±1.99Aa	14.34±3.56Cd	49.63±1.92Bb
1)同列数据后的不同大、小写字母分别表示差异达到0.01和0.05的显著水平(LSD法) 　1) Different capital and lowercase letters in the same column indicate the difference reaches 0.01 and 0.05 significance levels respectively (LSD method)

下载: 导出CSV

| 显示表格

2.2.2 牛肉营养成分含量

蛋白质与脂肪是牛肉中重要的营养成分^[8]。由表3可知，雷琼黄牛的蛋白质含量显著高于利雷杂和西雷杂(P<0.05)，与安雷杂差异不显著；雷琼黄牛的脂肪含量显著高于安雷杂和西雷杂(P<0.05)。表明安雷杂F1代保持了安格斯牛肉质中蛋白质含量高、肌内脂肪含量低的特点，通过与安格斯杂交改良降低了原雷琼黄牛的肌内脂肪，提升了雷琼黄牛的瘦肉率。

表 3 雷琼黄牛与不同品种肉牛杂交F1代肌肉营养成分含量¹⁾

Table 3. Muscle nutrient contents of F1 hybrids of Leiqiong yellow cattle and different breeds of beef cattle

品种 Breed	w/%				w/(mg·kg⁻¹)
品种 Breed	水分 Water	灰分 Ash	蛋白质 Protein	脂肪 Lipid	Na	Fe	Mn	Ca	Zn
西雷杂 Simmental×Leiqiong	76.37±0.18Aa	1.06±0.04Aa	23.95±0.41Ac	7.39±0.33Cd	776.67±5.78Aa	18.37±0.78Aa	0.14±0.00Aa	64.87±1.42Aa	48.60±0.32Aa
利雷杂 Limousin×Leiqiong	71.30±0.06Ab	1.10±0.00Aa	24.46±0.17Abc	57.66±0.69Aa	608.33±1.76Aa	26.40±2.00Aa	0.11±0.00Aa	43.27±0.74Aa	38.60±0.67Aa
安雷杂 Angus×Leiqiong	74.80±0.29Aab	1.13±0.03Aa	25.74±0.25Aab	9.59±0.43Cc	559.67±7.88Aa	16.17±2.29Aa	0.14±0.00Aa	54.03±1.68Aa	34.63±0.15Aa
雷琼 Leiqiong	71.60±2.18Ab	1.07±0.03Aa	25.85±0.53Aa	25.36±0.42Bb	455.00±56.20Aa	24.17±3.67Aa	0.11±0.01Aa	21.07±4.78Aa	44.23±2.57Aa
1)同列数据后的不同大、小写字母分别表示差异达到0.01和0.05的显著水平(LSD法) 　1) Different capital and lowercase letters in the same column indicate the difference reaches 0.01 and 0.05 significance levels respectively (LSD method)

下载: 导出CSV

| 显示表格

2.2.3 牛肉风味物质含量

肉的风味是评价肉品质好坏的重要指标之一，氨基酸是肉香味的重要前体物质^[9]。由表4可知，安雷杂的甘氨酸和丙氨酸含量高于其余3组，表明安格斯牛与雷琼黄牛杂交改良能够提升原雷琼黄牛肉质中风味物质的含量。

表 4 雷琼黄牛与不同品种肉牛杂交F1代肌肉与鲜味有关的氨基酸含量¹⁾

Table 4. Amino acid contents in muscle related to umami of F1 hybrids of Leiqiong yellow cattle and different breeds of beef cattle w/%

品种 Breed	谷氨酸 Glu	甘氨酸 Gly	丙氨酸 Ala	天门冬氨酸 Asp
西雷杂 Simmental×Leiqiong	13.03±0.14Ab	4.32±0.01Aa	4.31±0.02ABb	6.94±0.04Bc
利雷杂 Limousin×Leiqiong	13.88±0.03Aab	3.01±0.06Bb	4.29±0.02Bb	7.70±0.02Ab
安雷杂 Angus×Leiqiong	14.41±0.07Aa	4.34±0.01Aa	5.38±0.02Aa	8.12±0.04Aab
雷琼 Leiqiong	14.48±0.10Aa	3.99±0.01Bb	4.85±0.02ABab	8.17±0.04Aa
1)同列数据后的不同大、小写字母分别表示差异达到0.01和0.05的显著水平(LSD法) 　1)Different capital and lowercase letters in the same column indicate the difference reaches 0.01 and 0.05 significance levels respectively (LSD method)

下载: 导出CSV

| 显示表格

2.2.4 牛肉脂肪酸含量

如表5所示，饱和脂肪酸中，4个品种肉牛背最长肌肉豆蔻酸含量大小顺序为利雷杂>雷琼黄牛>安雷杂>西雷杂，西雷杂的肉豆蔻酸含量(w=0.84%)最小，与其余3组肉牛差异极显著(P<0.01)。4个品种肉牛背最长肌中棕榈酸含量大小顺序为安雷杂>利雷杂>雷琼黄牛>西雷杂，安雷杂棕榈酸含量(w=27.78%)最高，但与其他品种的棕榈酸含量差异不显著。4个品种背最长肌中硬脂酸含量大小顺序为西雷杂>安雷杂>利雷杂>雷琼黄牛，西雷杂硬脂酸含量(w=27.16%)最高，雷琼黄牛硬脂酸含量(w=14.34%)最低，两者差异极显著(P<0.01)。4个品种肉牛饱和脂肪酸总量大小顺序为安雷杂>西雷杂>利雷杂>雷琼黄牛，安雷杂饱和脂肪酸总量(w=57.81%)最高，饱和脂肪酸中棕榈酸和硬脂酸含量较高。

如表6所示，单不饱和脂肪酸中，4个品种肉牛背最长肌肉豆蔻油酸含量大小顺序为利雷杂>雷琼黄牛>西雷杂>安雷杂，利雷杂肉豆蔻油酸含量(w=1.07%)最高，显著高于其余3个品种(P<0.05)。各品种肉牛背最长肌棕榈油酸含量大小顺序为利雷杂>雷琼黄牛>安雷杂>西雷杂，利雷杂棕榈油酸含量(w=5.05%)最高，极显著高于其余3个品种(P<0.01)。油酸是单不饱和脂肪酸中的主要脂肪酸，各品种肉牛间背最长肌中油酸含量大小顺序为利雷杂>雷琼黄牛>安雷杂>西雷杂，利雷杂油酸含量(w=39.11%)最高，极显著高于其余3个品种(P<0.01)。

表 6 雷琼黄牛与不同品种肉牛杂交F1代肌肉单不饱和脂肪酸(MUFA)含量¹⁾

Table 6. Monounsaturated fatty acid (MUFA) contents in muscle of F1 hybrids of Leiqiong yellow cattle and different breeds of beef cattle w/%

品种 Breed	肉豆蔻油酸 Myristoleic acid	棕榈油酸 Palmitoleic acid	油酸 Oleic acid	异油酸 Isooleic acid
西雷杂 Simmental×Leiqiong	0.55±0.02Ab	1.51±0.05Bb	27.23±1.67Cc	2.95±0.42Aa
利雷杂 Limousin×Leiqiong	1.07±0.01Aa	5.05±0.04Aa	39.11±0.14Aa	0.53±0.05Bc
安雷杂 Angus×Leiqiong	0.51±0.01Ab	1.71±0.13Bb	33.32±2.37Bb	1.33±0.17Ab
雷琼 Leiqiong	0.69±0.18Ab	3.93±0.68Bb	33.50±2.37Bb	1.73±0.58Ab
1)同列数据后的不同大、小写字母分别表示差异达到0.01和0.05的显著水平(LSD法) 　1) Different capital and lowercase letters in the same column indicate the difference reaches 0.01 and 0.05 significance levels respectively (LSD method)

下载: 导出CSV

| 显示表格

如表7所示，多不饱和脂肪酸主要有亚油酸和α−亚麻酸，其中亚油酸是主要的多不饱和脂肪酸，各品种肉牛背最长肌中亚油酸大小顺序为西雷杂>雷琼黄牛>安雷杂>利雷杂，西雷杂亚油酸含量(w=7.52%)最高，且极显著高于利雷杂和安雷杂(P<0.01)。各品种肉牛背最长肌α−亚麻酸含量大小顺序为雷琼黄牛>安雷杂>西雷杂>利雷杂，雷琼黄牛α−亚麻酸含量(w=1.94%)最高，且极显著高于其他3个品种(P<0.01)。

表 7 雷琼黄牛与不同品种肉牛杂交F1代肌肉多不饱和脂肪酸(PUFA)含量¹⁾

Table 7. Polyunsaturated fatty acid (PUFA) contents in muscle of F1 hybrids of Leiqiong yellow cattle and different breeds of beef cattle w/%

品种 Breed	亚油酸 Linoleic acid	α−亚麻酸 α-linolenic acid	花生四烯酸 Arachidonic acid
西雷杂 Simmental×Leiqiong	7.52±0.97Aa	0.68±0.06Bb	2.03±0.22Aa
利雷杂 Limousin×Leiqiong	1.48±0.02Bb	0.39±0.02Bc	0.12±0.01Bb
安雷杂 Angus×Leiqiong	4.20±0.57Bb	0.81±0.14Bb	0.15±0.01Bb
雷琼 Leiqiong	6.60±1.80Aa	1.94±0.55Aa	0.49±0.05Bb
1)同列数据后的不同大、小写字母分别表示差异达到0.01和0.05的显著水平(LSD法) 　1) Different capital and lowercase letters in the same column indicate the difference reaches 0.01 and 0.05 significance levels respectively (LSD method)

下载: 导出CSV

| 显示表格

2.2.5 牛肉必需氨基酸含量

肉中氨基酸含量和组成是评价肉营养价值的重要指标，也是影响肉品质的重要因素^[10]。由表8可知，西雷杂F1代牛肉中必需氨基酸的含量极显著低于雷琼黄牛(P<0.01)；而雷琼牛、利雷杂、安雷杂三者的必需氨基酸含量差异不显著。

表 8 雷琼黄牛与不同品种肉牛杂交F1代肌肉必需氨基酸含量¹⁾

Table 8. Essential amino acid contents in muscle of F1 hybrids of Leiqiong yellow cattle and different breeds of beef cattle w/%

品种 Breed	苏氨酸 Thr	缬氨酸 Val	亮氨酸 Leu	赖氨酸 Lys	异亮氨酸 L1e	苯丙氨酸 Phe	蛋氨酸 Met	必需氨基酸 Essential amino acid
西雷杂 Simmental×Leiqiong	11.34±0.56Ac	12.91±0.31Aa	20.75±0.63Bb	23.64±0.94Bb	11.94±0.51Bb	11.82±0.42Aa	7.48±0.34Aa	88.29±0.53Bb
利雷杂 Limousin×Leiqiong	11.70±0.41Ab	12.82±0.41Aa	20.70±0.51Aa	23.40±0.61Aa	12.15±0.45Aa	12.04±0.32Aa	7.20±0.35Aa	88.89±0.35Aa
安雷杂 Angus×Leiqiong	11.95±0.22Aa	12.40±0.32Ab	20.74±0.53Aa	23.56±0.73Aa	12.18±0.31Aa	11.95±0.41Aa	7.22±0.41Aa	88.87±0.33Aa
雷琼 Leiqiong	11.94±0.31Aa	12.49±0.45Ab	20.92±0.42Aa	23.66±0.53Aa	12.05±0.42Aa	11.39±0.31Aa	7.56±0.32Aa	89.13±0.47Aa
1)同列数据后的不同大、小写字母分别表示差异达到0.01和0.05的显著水平(LSD法) 　1) Different capital and lowercase letters in the same column indicate the difference reaches 0.01 and 0.05 significance levels respectively (LSD method)

下载: 导出CSV

| 显示表格

3. 讨论与结论

3.1 西门塔尔牛、安格斯牛、利木赞牛改良雷琼黄牛对其F1代生长性能的影响

雷琼黄牛作为华南地区优良的役用牛，具有耐热性能好、耐粗饲以及抗病能力强等优点。随着农业耕种技术发展以及农业机械化的普及，主要作为役用的雷琼黄牛逐渐转向肉用^[11]。由于雷琼黄牛的体型小、生长速度慢以及产肉性能差，导致其经济效益远低于优良的肉用牛品种(如西门塔尔牛、安格斯牛、利木赞牛)，因此可以采用杂交改良的方式提高雷琼黄牛的生产性能。

西门塔尔牛、安格斯牛、利木赞牛对雷琼黄牛种牛杂交改良效果明显，其中利雷F1代(利木赞♂×雷琼黄牛♀)在初生体质量、3月龄体质量、6月龄体质量、24月龄体质量和月增质量6个指标上的效果明显。

各杂交F1代的初生质量大小顺序为利雷杂>西雷杂>安雷杂>雷琼黄牛，初生质量分别为29.83、28.24、27.95和18.58 kg，可见，利木赞牛改良本地黄牛F1代的初生质量具有更强的杂交优势。姚守秀等^[12]利用利木赞牛、西门塔尔牛、安格斯牛改良北塔山土种牛生长与肉用性能的研究结果表明，利木赞牛、西门塔尔牛、安格斯牛杂交F1代初生质量分别为28.90、26.56、24.95 kg，北塔山土种牛初生质量为20.98 kg^[12]，与本试验研究结果的趋势相同，本试验中，3组杂交牛F1代都继承了父本初生质量大的特点，其中利雷杂的初生质量大于其余2组杂交牛。

在24月龄阶段，各杂交F1代的体质量大小顺序为利雷杂>西雷杂>安雷杂>雷琼黄牛，其体质量分别为398.37、357.05、331.02和289.43 kg，由试验结果可知，利雷杂的体质量高于西雷杂11.57%，表明利木赞牛改良效果比西门塔尔牛改良效果好。黄力刚等^[13]在西门塔尔与利木赞肉牛杂交效果比较分析研究中的结果表明：在断乳期后西门塔尔杂交F1代的体尺指标以及体质量均显著大于利木赞杂交F1代，说明西门塔尔牛的改良效果优于利木赞牛，与本试验的结果不相符，这可能与地方牛的品种、地域环境和饲喂条件有关。

肉牛体尺指标直接反映肉牛的体格大小和体躯结构、发育程度等状况，也间接反映牛组织器官的发育情况及体质量，肉牛体尺指标与家畜的生理机能、生产性能、抗病力以及对外界生活条件的适应能力等密切相关^[14]。本试验中，从体尺的改良效果来看，利雷杂的改良效果优于西雷杂与安雷杂，利用利木赞牛改良雷琼黄牛，F1代24月龄的体高、体斜长和胸围分别是123.83、140.17和184.50 cm，从体尺的改良效果上看，利木赞的体尺改良效果更好，利雷杂F1代的体型大于其余3组。

3.2 西门塔尔牛、安格斯牛、利木赞牛改良雷琼黄牛对其F1代牛肉品质的影响

肉的嫩度是肉品质的重要指标，剪切力的大小反映了肉的嫩度，剪切力越小，肉的嫩度越好，高档牛肉的剪切力偏小，嫩度好，易咀嚼^[15]。本试验比较了雷琼黄牛与西雷杂、利雷杂和安雷杂F1代背最长肌的剪切力，表现为利雷杂剪切力最小(3.71 kg)，西雷杂剪切力最大(5.80 kg)，雷琼黄牛和安雷杂剪切力分别为5.00 和4.19 kg。罗欣等^[16]在研究中国育肥牛肉品质和感官评定时指出，当牛肉剪切力>5.3 kg时，消费者认为牛肉较韧；当剪切力<4.0 kg时，牛肉较嫩；当剪切力在4.1~5.2 kg时，牛肉嫩度可以接受。对比相关临界值可发现，消费者认为利雷杂F1代的肉质较嫩，安雷杂F1代与雷琼黄牛的嫩度可以接受，西雷杂F1代的肉质嫩度较差。

肉的嫩度受品种、年龄、性别、营养状况以及肌肉部位等因素的影响，其本质是这些因素使肌纤维粗细、质地以及结缔组织质量与数量有着明显的差异，其中肌纤维的粗细及结缔组织的质地是影响肉质嫩度的主要因素^[16]。1900年育种学家对利木赞牛进行选育，利木赞牛从兼用型转向专门化肉用品种，并在1924年形成专门化肉牛品种；由于农业机械化以及农耕条件的变化，主要作为役用的雷琼黄牛逐渐转向肉用。刘正柱等^[15]在研究中表明，牛的运动量越大，其肌肉的负荷越大，使肌肉的强度提高，肌纤维变粗，导致肌肉剪切力值提高、嫩度降低。专门化肉牛品种利木赞牛(♂)与役用牛雷琼黄牛(♀)杂交改良F1代，其背最长肌嫩度优于母本，符合刘正柱等^[15]的研究结果，也与本试验的结果相同。

眼肌面积是决定牛肉等级和产肉量等经济性能的重要指标^[17]。崔冰冰等^[1]2017年利用安格斯牛与海福特牛改良枣北黄牛，海枣F1代眼肌面积最大(97.53 cm²)，安枣F1代眼肌面积次之(95.25 cm²)，枣北黄牛眼肌面积最小(81.17 cm²)。本试验中安雷杂F1代的眼肌面积(83.20 cm²)极显著高于其余3组试验牛(P<0.01)，但仅比枣北黄牛的眼肌面积提高了2.50%，且远小于海枣F1代与安枣F1代的眼肌面积，说明安雷杂F1代产肉性能尚有大幅提升的空间。

3.3 结论

利木赞牛对雷琼黄牛杂交改良作用明显，尤其在初生体质量、24月龄体质量以及体尺发育方面效果显著。利雷杂F1代肉质嫩度优于其余3组，其中西雷杂F1代肉质嫩度最差；西雷杂F1代的眼肌面积大于雷琼黄牛，安雷杂F1代的眼肌面积大于其余3组；3组杂交牛F1代均可改善雷琼黄牛肉色偏白的情况。利雷杂、安雷杂、雷琼黄牛三者的必需氨基酸含量相比差异不显著，但西雷杂F1代肌肉中必需氨基酸含量极显著低于雷琼黄牛。综合3组杂交牛F1代的生长发育特点与肉品质情况，利雷杂F1代的杂交优势显著，因此利雷杂F1代为最优杂交种。

图 1 邻近法构建的EHDV-6型毒株Seg-2系统发生树

“▲”表示本研究获取的中国EHDV-6型毒株序列，“●”表示与中国EHDV-6型毒株具有最近亲缘关系的日本毒株序列

Figure 1. Phylogenetic tree of Seg-2 of EHDV-6 strain contructed by Neighbor-joining method

“▲” indicated sequence of Chinese EHDV-6 strain isolated in this study, “●” indicated sequence of Japanese strain that had the closest relationship with Chinese EHDV-6 strain

下载: 全尺寸图片幻灯片

图 2 邻近法构建的EHDV-6型毒株Seg-6系统发生树

“▲”表示本研究获取的中国EHDV-6型毒株序列

Figure 2. Phylogenetic tree of Seg-6 of EHDV-6 strain constructed by Neighbor-joining method

“▲” indicated sequence of Chinese EHDV-6 strain isolated in this study

下载: 全尺寸图片幻灯片

图 3 邻近法构建的EHDV-6型毒株Seg-3系统发生树

“▲”表示本研究获取的中国EHDV-6型毒株序列，“●”表示与中国EHDV-6型毒株具有最近亲缘关系的日本毒株序列

Figure 3. Phylogenetic tree of Seg-3 of EHDV-6 strain constructed by Neighbor-joining method

“▲” indicated sequence of Chinese EHDV-6 strain isolated in this study, “●” indicated sequence of Japanese strain that had the closest relationship with Chinese EHDV-6 strain

下载: 全尺寸图片幻灯片

表 1 中国EHDV-6型分离毒株Seg-2、Seg-3与Seg-6节段扩增引物

Table 1 Primers for amplifying Seg-2, Seg-3 and Seg-6 of EHDV-6 isolates in China

引物名称 Prime name	引物序列(5′→3′) Primer sequence	引物位置 Primer location	产物大小/bp Product size
EHDV-6-S2-F	AGTTGCCCAAGAGTATGTGA	Seg-2 (1 247~1 266 bp)	913
EHDV-6-S2-R	CATCATTCTGTAAAGATAGGTCG	Seg-2 (2 139~2 161 bp)
EHDV-6-S3-F	CAAAARATAATYGATGGRGTGAAAG	Seg-3 (204~228 bp)	1 095
EHDV-6-S3-R	GGYGCTGGTTCTCTATTTTCAA	Seg-3 (1 276~1 299 bp)
EHDV-6-S6-F	CRGGTGAATCYTACGGTGAA	Seg-6 (210~230 bp)	1 149
EHDV-6-S6-R	CGCCYTCTTGTTGAAYCGCTAT	Seg-6 (1 315~1 337 bp)

下载: 导出CSV

表 2 中国EHDV-6型毒株分离信息表

Table 2 Information of EHDV-6 strains isolated in China

毒株 Strain	来源动物 Animal source	分离年份 Isolation year	分离地点 Isolation place	经度 Longitude	纬度 Latitude	海拔/m Altitude
YNSZ/V003/2012	黄牛 Cattle	2012	云南师宗 Shizong, Yunnan	E104°17′	N24°36′	940
YNSZ/V003/2012	黄牛 Cattle	2012	云南师宗 Shizong, Yunnan	E104°17′	N24°36′	940
YNSZ/V283/2013	黄牛 Cattle	2013	云南师宗 Shizong, Yunnan	E104°17′	N24°36′	940
YNJC/V274/2014	黄牛 Cattle	2014	云南江城 Jiangcheng, Yunnan	E101°51′	N22°35′	1 129
YNSZ/V273/2015	黄牛 Cattle	2015	云南师宗 Shizong, Yunnan	E104°17′	N24°36′	940
GDST/V263/2016	奶牛 Dairy cattle	2016	广东汕头 Shantou, Guangdong	E116°40′	N23°21′	5
GDST/V258/2016	奶牛 Dairy cattle	2016	广东汕头 Shantou, Guangdong	E116°40′	N23°21′	5
GDST/V259/2016	奶牛 Dairy cattle	2016	广东汕头 Shantou, Guangdong	E116°40′	N23°21′	5
GDST/V260/2016	奶牛 Dairy cattle	2016	广东汕头 Shantou, Guangdong	E116°40′	N23°21′	5
GDST/V261/2016	奶牛 Dairy cattle	2016	广东汕头 Shantou, Guangdong	E116°40′	N23°21′	5
YNSZ/V276/2016	黄牛 Cattle	2016	云南师宗 Shizong, Yunnan	E104°17′	N24°36′	940

下载: 导出CSV

表 3 世界范围内EHDV-6型毒株Seg-2/VP2、Seg-3/VP3和Seg-6/VP5核酸与氨基酸序列相似性¹⁾

Table 3 Nucleic acid and amino acid sequence similarities among Seg-2/VP2, Seg-3/VP3 and Seg-6/VP5 of EHDV-6 strains around the world %　

国家/地域 Country/Region	Seg-2	VP2	Seg-6	VP5	Seg-3	VP3
中国 China	99.1±0.7	99.1±0.7	98.8±0.9	99.9±0.2	98.9±0.7	99.9±0.1
日本 Japan	98.5±0.4	98.9±0.4	—	—	93.9±2.9	99.6±0.3
澳大利亚 Australia	90.5±0.3	93.9±0.2	90.5±0.2	98.1±0.2	92.5±1.4	99.8±0.3
美国 America	90.0±0.4	93.3±0.3	90.1±0.1	98.5±0.1	80.2±0.3	96.9±0.3
非洲 Africa	71.0±0.2	73.6±0.5	79.8±0.1	96.3±0.2	80.0±0.3	97.2±0.2
中东 Middle East	71.0±0.1	73.1±0.1	79.7±0.1	96.3±0.2	79.4±0.4	97.0±0.2
1)“—”表示缺乏相应的毒株序列信息　1) “—” indicated no corresponding sequence information of strain

下载: 导出CSV

参考文献(26)

[1]	SAVINI G, AFONSO A, MELLOR P, et al. Epizootic heamorragic disease[J]. Res Vet Sci, 2011, 91(1): 1-17. doi: 10.1016/j.rvsc.2011.05.004
[2]	YADIN H, BRENNER J, BUMBROV V, et al. Epizootic haemorrhagic disease virus type 7 infection in cattle in Israel[J]. Vet Rec, 2008, 162(2): 53-56. doi: 10.1136/vr.162.2.53
[3]	TEMIZEL E M, YESILBAG K, BATTEN C, et al. Epizootic hemorrhagic disease in cattle, western Turkey[J]. Emerg Infect Dis, 2009, 15(2): 317-319. doi: 10.3201/eid1502.080572
[4]	CORBEL M J, MACMILLAN A P. Office International des Epizooties OIE Manual of standards for diagnostic tests and vaccines[M]. Paris: Office International des Epizooties O.I.E, 2008: 1092-1106.
[5]	MERTENS P P C, MAAN S, SAMUEL A, et al. Orbiviruses, Reoviridae[M]. FAUQUET C M, MAYO M A, MANILOFF J, et al. Virus taxonomy: Eighth report of the international committee on taxonomy of viruses. London: Elsevier academic press, 2005: 466-483.
[6]	ANTHONY S J, MAAN S, MAAN N, et al. Genetic and phylogenetic analysis of the outer-coat proteins VP2 and VP5 of epizootic haemorrhagic disease virus (EHDV): Comparison of genetic and serological data to characterise the ehdv serogroup[J]. Virus Res, 2009, 145(2): 200-210. doi: 10.1016/j.virusres.2009.07.012
[7]	HUISMANS H, BREMER C W, BARBER T L. The nucleic acid and proteins of epizootic haemorrhagic disease virus[J]. Onderstepoort J Vet Res, 1979, 46(2): 95-104.
[8]	ANTHONY S J, MAAN N, MAAN S, et al. Genetic and phylogenetic analysis of the core proteins VP1, VP3, VP4, VP6 and VP7 of epizootic haemorrhagic disease virus (EHDV)[J]. Virus Res, 2009, 145(2): 187-199. doi: 10.1016/j.virusres.2009.07.011
[9]	SHIRAFUJI H, KATO T, YAMAKAWA M, et al. Characterization of genome segments 2, 3 and 6 of epizootic hemorrhagic disease virus strains isolated in Japan in 1985-2013: Identification of their serotypes and geographical genetic types[J]. Infect Genet Evol, 2017, 53: 38-46. doi: 10.1016/j.meegid.2017.05.010
[10]	李占鸿, 肖雷, 杨振兴, 等. 牛源流行性出血病病毒(EHDV)血清10型毒株在我国的分离鉴定[J]. 病毒学报, 2019, 35(1): 112-120.
[11]	YUKA K, MASAHIRO K, YASUYUKI O, et al. Epizootic hemorrhagic disease virus serotype 6 infection in cattle, Japan, 2015[J]. Emerg Infect Dis, 2018, 24(5): 902-905. doi: 10.3201/eid2405.171859
[12]	曹颖颖, 吴健敏, 林俊, 等. 广西首例牛源鹿流行性出血热病毒的分离鉴定[J]. 中国预防兽医学报, 2015, 37(10): 746-750. doi: 10.3969/j.issn.1008-0589.2015.10.04
[13]	张怡轩, 林俊, 曹颖颖, 等. 广西鹿流行性出血热病毒血清型调查及分布影响分析[J]. 上海畜牧兽医通讯, 2016(4): 19-21. doi: 10.3969/j.issn.1000-7725.2016.04.006
[14]	张胜男, 李华春, 朱建波, 等. 2015年内蒙古地区蓝舌病及流行性出血热流行病学调查及血清型鉴定[J]. 中国预防兽医学报, 2016, 38(12): 939-943.
[15]	杨振兴, 孟锦昕, 肖雷, 等. 流行性出血病病毒(EHDV)血清7型毒株在中国的首次分离与鉴定[J]. 畜牧兽医学报, 2019, 50(3): 150-158.
[16]	朱建波, 杨振兴, 肖雷, 等. 流行性出血病多克隆抗体C-ELISA检测方法的建立[J]. 畜牧兽医学报, 2018, 49(7): 1440-1450. doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2018.07.013
[17]	杨振兴, 朱建波, 李占鸿, 等. 蓝舌病病毒和流行性出血病病毒双重荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. 中国兽医科学, 2019, 49(9): 1104-1111.
[18]	BATTEN C A, HENSTOCK M R, BIN-TARIF A, et al. Bluetongue virus serotype 26: Infection kinetics and pathogenesis in Dorset Poll sheep[J]. Vet Microbiol, 2012, 157(1/2): 119-124.
[19]	TAMURA K, STECHER G, PETERSON D, et al. MEGA6: Molecular evolutionary genetics analysis version 6.0[J]. Mol Biol Evol, 2013, 30(12): 2725-2729. doi: 10.1093/molbev/mst197
[20]	MAAN N S, MAAN S, NOMIKOU K, et al. RT-PCR assays for seven serotypes of epizootic haemorrhagic disease virus & their use to type strains from the Mediterranean region and North America[J]. PLoS One, 2010, 5(9): e12782. doi: 10.1371/journal.pone.0012782
[21]	ALLISON A B, GOEKJIAN V H, POTGIETER A C, et al. Detection of a novel reassortant epizootic hemorrhagic disease virus (EHDV) in the USA containing RNA segments derived from both exotic (EHDV-6) and endemic (EHDV-2) serotypes[J]. J Gen Virol, 2010, 91(2): 430-439. doi: 10.1099/vir.0.015651-0
[22]	LEE F, TING L J, LEE M S, et al. Genetic analysis of two taiwanese bluetongue viruses[J]. Vet Microbiol, 2011, 148(2/3/4): 140-149.
[23]	YANG H, ZHU J, LI H, et al. Full genome sequence of bluetongue virus serotype 4 from China[J]. J Virol, 2012, 86(23): 13122-13123. doi: 10.1128/JVI.02393-12
[24]	BREARD E, BELBIS G, VIAROUGE C, et al. Epizootic hemorrhagic disease virus serotype 6 experimentation on adult cattle[J]. Res Vet Sci, 2013, 95(2): 794-798. doi: 10.1016/j.rvsc.2013.06.026
[25]	冯云, 章域震, 杨卫红, 等. 阿卡斑病毒云南分离株全基因组序列特征研究[J]. 病毒学报, 2016, 32(2): 161-169.
[26]	LIAO Y K, INABA Y, LI N J, et al. Epidemiology of bovine ephemeral fever virus infection in Taiwan[J]. Microbiol Res, 1998, 153(3): 289-295. doi: 10.1016/S0944-5013(98)80014-1

施引文献(12)

期刊类型引用(8)

1.	高元，雍艳红，刘晓曦，马兴斌，于志超，李有全，陈宗周，吴淑婷，张颜颜，巨向红. 利木赞牛杂交改良雷琼黄牛的效果分析. 中国草食动物科学. 2024(02): 85-88 . 百度学术
2.	陈宗周，雍艳红，刘晓曦，李有全，李大刚，闵力，陈卫东，王刚，吴淑婷，高元，牛雪婷，王新晨，巨向红. 不同年龄雷琼黄牛及其杂交利木赞牛F_1代背最长肌肉品质比较研究. 中国畜牧杂志. 2024(05): 162-166 . 百度学术
3.	黄甫克，韦良炬，蓝锐，胡湘云，韦国旺，韦干流. 大石山区肉牛不同杂交组合杂交改良效果评价. 饲料研究. 2024(11): 102-108 . 百度学术
4.	陈宗周，雍艳红，刘晓曦，李有全，李大刚，闵力，陈卫东，王刚，吴淑婷，高元，牛雪婷，王新晨，巨向红. 2岁雷琼黄牛及利雷杂一代公牛肌肉品质的比较研究. 中国草食动物科学. 2023(02): 73-76 . 百度学术
5.	刘萍，赵敏霖，许娅虹，周仕钰，张发强，申晓静，毛华明，梅国栋，赵家华，李清. 德系西门塔尔×荷斯坦公牛的屠宰性能和肉质性状分析. 中国畜牧杂志. 2023(05): 110-116 . 百度学术
6.	强文军，李晓燕，张杰，朱建平，张冬林. 不同肉牛品种杂交后代生产性能比较研究. 甘肃畜牧兽医. 2023(05): 75-78 . 百度学术
7.	胡灿颖，雍艳红，陈圣威，温佳颖，鲍明隆，吴莲云，巨向红. 12月龄雷琼黄牛生长曲线拟合的比较分析. 中国草食动物科学. 2021(02): 17-22 . 百度学术
8.	卢寿群. 冻精冷配改良当地黄牛技术要点分析. 中国畜禽种业. 2021(11): 100-101 . 百度学术

其他类型引用(4)

资源附件(0)

图(3) / 表(3)

计量

文章访问数: 1116
HTML全文浏览量: 3
PDF下载量: 1340
被引次数: 12

1. 材料与方法
1.1 试验牛
1.2 肉牛生产性能测定
1.2.1 生长发育指标测定
1.2.2 肉品质分析
1.2.3 眼肌面积测定
1.2.4 剪切力测定
1.3 数据分析
2. 结果与分析
2.1 雷琼黄牛与不同品种肉牛杂交后代生产性能比较
2.2 雷琼黄牛与不同品种肉牛杂交后代肉品质理化指标分析
2.2.1 肉品质物理指标
2.2.2 牛肉营养成分含量
2.2.3 牛肉风味物质含量
2.2.4 牛肉脂肪酸含量
2.2.5 牛肉必需氨基酸含量
3. 讨论与结论
3.1 西门塔尔牛、安格斯牛、利木赞牛改良雷琼黄牛对其F1代生长性能的影响
3.2 西门塔尔牛、安格斯牛、利木赞牛改良雷琼黄牛对其F1代牛肉品质的影响
3.3 结论

1. 材料与方法
1.1 试验牛
1.2 肉牛生产性能测定
1.2.1 生长发育指标测定
1.2.2 肉品质分析
1.2.3 眼肌面积测定
1.2.4 剪切力测定
1.3 数据分析
2. 结果与分析
2.1 雷琼黄牛与不同品种肉牛杂交后代生产性能比较
2.2 雷琼黄牛与不同品种肉牛杂交后代肉品质理化指标分析
2.2.1 肉品质物理指标
2.2.2 牛肉营养成分含量
2.2.3 牛肉风味物质含量
2.2.4 牛肉脂肪酸含量
2.2.5 牛肉必需氨基酸含量
3. 讨论与结论
3.1 西门塔尔牛、安格斯牛、利木赞牛改良雷琼黄牛对其F1代生长性能的影响
3.2 西门塔尔牛、安格斯牛、利木赞牛改良雷琼黄牛对其F1代牛肉品质的影响
3.3 结论

参考文献(26)

施引文献(12)

资源附件(0)

云南和广东省流行性出血病病毒血清6型毒株(EHDV-6)的分离与遗传特性

作者简介: 李占鸿(1989—)，男，助理研究员，硕士，E-mail: dy081lzh@163.com 杨振兴(1986—)，男，助理研究员，硕士，E-mail：s300yn@163.com；†对本文贡献相同

通讯作者: 杨 恒(1978—)，男，研究员，博士，E-mail: yangheng2008.cool@163.com 李华春(1958—)，男，研究员，博士，E-mail: li_huachun@hotmail.com

†对本文贡献相同

计量

出版历程