张欣,崔敏,房红莹,贺东生,罗满林. 鸭白细胞介素-2基因克隆、原核表达及生物学活性检测[J]. 华南农业大学学报, 2008, 29(4). DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2008.04.024
    引用本文: 张欣,崔敏,房红莹,贺东生,罗满林. 鸭白细胞介素-2基因克隆、原核表达及生物学活性检测[J]. 华南农业大学学报, 2008, 29(4). DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2008.04.024
    ZHANG Xin,CUI Min,FANG Hong-ying,HE Dong-sheng,LUO Man-lin. Cloning and Prokaryotic Expression of Duck Interleukin-2 Gene and Detection of Its Bioactivity[J]. Journal of South China Agricultural University, 2008, 29(4). DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2008.04.024
    Citation: ZHANG Xin,CUI Min,FANG Hong-ying,HE Dong-sheng,LUO Man-lin. Cloning and Prokaryotic Expression of Duck Interleukin-2 Gene and Detection of Its Bioactivity[J]. Journal of South China Agricultural University, 2008, 29(4). DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2008.04.024

    鸭白细胞介素-2基因克隆、原核表达及生物学活性检测

    Cloning and Prokaryotic Expression of Duck Interleukin-2 Gene and Detection of Its Bioactivity

    • 摘要: 根据GenBank发表的鸭白细胞介素-2(IL-2)基因序列设计并合成了特异性引物,以经ConA诱导的广州白鸭外周血淋巴细胞提取的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出长度为360 bp的目的基因片段. 将该基因克隆到pMD18-T simple vector上,经酶切、PCR鉴定及序列测定,结果表明获得了鸭IL-2成熟蛋白基因的完整克隆. 构建的表达质粒pET-IL-2经BamHI、XhoⅠ双酶切鉴定构建正确;经SDS-PAGE分析,在约33 000处出现新的蛋白条带,Western-blotting分析表明,融合蛋白能够被抗His单克隆抗体识别,体外活性检测表明,重组蛋白具有促进淋巴细胞增殖的活性.

       

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