H9N2亚型禽流感病毒ns1基因的融合表达
Fusion Expression of ns1 Gene of Avian Influenza Virus H9N2 Subtype in E.coli BL 21(DE3)
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摘要: 禽流感病毒(AIV)非结构蛋白NS1在病毒粒子中不存在,因此,可以通过检测NS1抗体来鉴别禽流感病毒感染鸡群和免疫鸡群.将ns1基因和T4噬菌体soc基因在大肠埃希氏菌中融合表达,融合蛋白可以作为鉴别禽流感免疫鸡群和感染鸡群的检测抗原.采用RT-PCR方法扩增禽流感病毒H9N2的ns1基因(654bp);将该片段克隆至pSOC质粒soc基因3’端,成功构建了重组质粒pSOC-NS1,用该重组质粒转化EcoliB121(DE3)感受态细胞,以终浓度1mmol/mL的IPTG诱导表达.SDS-PAGE结果表明pSOC-NS1融合蛋白相对分子质量约39000.Western-blot证实,表达产物与AIV H9N2病毒感染的小鼠血清具有良好的反应性.